"SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細胞系 細胞背景資料:在裸鼠中成瘤(產(chǎn)生三級惡性紡錘狀巨細胞瘤)。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 SK-NEP-1細胞系相關產(chǎn)品:SCL II細胞、Dunn LM8細胞、COLO-829細胞 JROECL 33細胞系相關產(chǎn)品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 COR-L 105細胞系相關產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞 細胞生長:貼壁 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 冷凍細胞解凍程序:依據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例,制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細胞均無法立即適應不同之基礎培養(yǎng)基或不同之血清種類,若因?qū)嶒炐枰?,必須有所不同時,務必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成,確定細胞適應后,方進行所需之實驗。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清),對細胞而言差異極大,請務必依據(jù)細胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管,立即放入37°C水槽中快速解凍,水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿,否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化后,以70%ethanol擦拭冷凍管外部,移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細胞種類和濃度,于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T25或T75flask中。取出已解凍之細胞懸浮液,緩緩加入T25或T75flask內(nèi)之培養(yǎng)基,混合均勻,放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細胞而言,1%以下之冷凍保護劑DMSO,不會對細胞之貼附或活化有不良影響,不需立刻由解凍細胞中去除,待第二天確定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細胞分化之細胞,需立即去除DMSO者,則可將解凍后之細胞懸浮液放入5-10ml培養(yǎng)基中,離心300xg(約1000rpm),5分鐘,小心移去上清液,加入適量新鮮培養(yǎng)基,將細胞均勻混合后,轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中,再放入37°C,5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 RKO-AS45-1細胞系相關產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞 HCC0038細胞系相關產(chǎn)品:U-373MG細胞、Hs688(A)T細胞、J-774細胞 P-388D1細胞系相關產(chǎn)品:OV1063細胞、L-Wnt3A細胞、Neuro 2a細胞 T 84細胞系相關產(chǎn)品:SACC83細胞、Strain L-929細胞、BCP1細胞 HIT.T15細胞系相關產(chǎn)品:M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。 EFO27細胞系相關產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞 786-0細胞系相關產(chǎn)品:NCIH716細胞、TOG細胞、NCIH2291細胞 LNCaP-FGC細胞系相關產(chǎn)品:CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 RBE細胞系相關產(chǎn)品:IGROV-1細胞、HEK 293 c18細胞、NS1-Ag4/1細胞 Centre Antoine Lacassagne-39細胞系相關產(chǎn)品:Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、High 5細胞、CD 18細胞 HeLa-229細胞系相關產(chǎn)品:HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞 Michigan Cancer Foundation-12A細胞系相關產(chǎn)品:NBL-12細胞、HSC/mHSC細胞、CAL27細胞 CEF細胞系相關產(chǎn)品:Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞、343 MG細胞、MALME 3M細胞 U87細胞系相關產(chǎn)品:PANC1005細胞、ECC10細胞、RCM1細胞 NCI-H87細胞系相關產(chǎn)品:7404細胞、RH-35細胞、COLO824細胞 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細胞系 C-4 I細胞系相關產(chǎn)品:Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細胞、THP-1(ATCC)細胞、CCRF/CEM細胞 LIM1215細胞系相關產(chǎn)品:HCC44細胞、HL60細胞、MDAMB468細胞 PLA801-95D細胞系相關產(chǎn)品:SJSA細胞、Panc05.04細胞、MPC 11細胞 M-14細胞系相關產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞 BAEC細胞系相關產(chǎn)品:C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞 NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品:RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞 NCIH1092細胞系相關產(chǎn)品:RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞 MDCK.2細胞系相關產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞 LL/2 (LLC1)細胞系相關產(chǎn)品:HeLa229細胞、ROS 17/2.8細胞、LAN6細胞 Calu6細胞系相關產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞 RPMI No. 1846細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞 BSC1細胞系相關產(chǎn)品:Granta-519細胞、SNU-119細胞、H69/P細胞 4175細胞系相關產(chǎn)品:OVCAR433細胞、MDCK II細胞、Human Melanoma Cell Bowes細胞 BEP2D細胞系相關產(chǎn)品:HuT102細胞、HFL-I細胞、LS-1034細胞 HBVP細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞 NCI-SNU-423細胞系相關產(chǎn)品:CNE2細胞、JKT-1細胞、PMVEC細胞 BV-173細胞系相關產(chǎn)品:Hs 940.T細胞、Mv1.Lu細胞、H676細胞 NS1/1-Ag4.1細胞系相關產(chǎn)品:JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞 H2347細胞系相關產(chǎn)品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞 SK-N-BE(1)細胞系相關產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞 NCIADRRES細胞系相關產(chǎn)品:RWPE-1細胞、CEL細胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 Bowes melanoma cells細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1187細胞、Panc327細胞、QGY-7701細胞 H4-II-EC3細胞系相關產(chǎn)品:SUM-190細胞、SKRC-20細胞、T241細胞 SUM-52細胞系相關產(chǎn)品:AG 9細胞、B16/F0細胞、HCC 2185細胞 SW1088細胞系相關產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞 NCTC929細胞系相關產(chǎn)品:OAW-42細胞、GM07404細胞、SK-N-BE(1)n細胞 C17.2細胞系相關產(chǎn)品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞 Mevo細胞系相關產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞 NCI-H2228細胞系相關產(chǎn)品:HEM細胞、CaES-17細胞、Jiyoye(P-2003)細胞 H-1155細胞系相關產(chǎn)品:143BTK-細胞、LN 229細胞、hADSCs細胞 L細胞系相關產(chǎn)品:PMVEC細胞、DU-4475細胞、NCI-SNU-668細胞 G422細胞系相關產(chǎn)品:SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞 FUOV1細胞系相關產(chǎn)品:COLO320 DM細胞、MonoMac 6細胞、MNNGHOS細胞 MDA-MB-231-GFP細胞系相關產(chǎn)品:EJ細胞、LuCL4細胞、BTI-Tn-5B1-4細胞 NCI-1155細胞系相關產(chǎn)品:GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞 MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關產(chǎn)品:RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞 MCF/Adr細胞系相關產(chǎn)品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞 Wien-133細胞系相關產(chǎn)品:NCI-322細胞、NL20細胞、NCIH2030細胞 RT4-D6P2T細胞系相關產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞 J82細胞系相關產(chǎn)品:Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞 EA. hy 926細胞系相關產(chǎn)品:SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞 H2029細胞系相關產(chǎn)品:CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞 CCD-841CoTr細胞系相關產(chǎn)品:Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞 M-20細胞系相關產(chǎn)品:HCCC9810細胞、CAL148細胞、MUVEC細胞 Hs 688(A).T細胞系相關產(chǎn)品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞 Hs839T細胞系相關產(chǎn)品:U-87MG ATCC細胞、PANC0203細胞、SK-Hep1細胞 FDCP1細胞系相關產(chǎn)品:RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞 R.K.13細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-134-VI細胞、Microbiological Associates-104細胞、OCI AML5細胞 PC-3/M細胞系相關產(chǎn)品:184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞 MLMA細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H727細胞、COLO-16細胞、SW1417細胞 SW579 epithelioid cells人甲狀腺鱗癌細胞系 SKNBE(2)細胞系相關產(chǎn)品:786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞 B16F1細胞系相關產(chǎn)品:870細胞、H2052_MM細胞、SK-N-BE(2)C細胞 SKG3A細胞系相關產(chǎn)品:IOSE29細胞、SK-CO-1細胞、Ca761細胞 LNCaP-FGC細胞系相關產(chǎn)品:CORL26細胞、SCC7細胞、HLMVEC細胞 "
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