"HEp-2 epithelioid cells人喉表皮樣癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:最初認(rèn)為這個(gè)細(xì)胞源自喉上皮癌,但隨后通過(guò)同功酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋分析發(fā)現(xiàn),起源細(xì)胞已被HeLa污染。 角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很?chē)?yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞 1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞 NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HEp-2 epithelioid cells人喉表皮樣癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿(mǎn)培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞 MBT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/GR細(xì)胞、M-14細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞 MeSoTheliOma-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87細(xì)胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2細(xì)胞、SU-DHL-1細(xì)胞 HLE-SRA-01/04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2.03細(xì)胞、CEMC7細(xì)胞、NTera 2細(xì)胞 NCIH2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs840T細(xì)胞、Mino細(xì)胞、IEC6細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HEp-2 epithelioid cells人喉表皮樣癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞 U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞 H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞 NCIH929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251MG細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞、MARC145細(xì)胞 J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞 HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞 Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞 Ramos.2G6.4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞 Murine Leydig Tumor Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH3細(xì)胞、DrG細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞 J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞 HEp-2 epithelioid cells人喉表皮樣癌細(xì)胞系 1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞 HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞 KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞 LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞 BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞 CAL-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1435細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細(xì)胞 STO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細(xì)胞、WEHI3B細(xì)胞、H-146細(xì)胞 CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞 HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞 SV40-MES13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRC Y細(xì)胞、G519細(xì)胞、149 PT細(xì)胞 RASMCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細(xì)胞、JIMT1細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞 WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞 RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞 184A1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2_1-7細(xì)胞、BALB/c 3T3 clone A31細(xì)胞、RK13細(xì)胞 LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞 OACP4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞、NB-4細(xì)胞 Jiyoye (P-2003)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1299細(xì)胞、COS1細(xì)胞、HMCB細(xì)胞 BOWES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 24細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞、3T3-A31細(xì)胞 IEC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細(xì)胞、H4細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞 MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly3細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞、OPM-2細(xì)胞 AC16 [Human hybrid]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU86.86細(xì)胞、L2細(xì)胞、L23/P細(xì)胞 CTLL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M14細(xì)胞、CemT4細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞 H-1650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF 21細(xì)胞、DAKIKI Clone 1細(xì)胞、U 266細(xì)胞 Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞 HEK293-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC154細(xì)胞、H-2170細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞 COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞 SPC-A-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM.C1細(xì)胞、BC-024細(xì)胞、751細(xì)胞 HOS-TE85細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkMel31細(xì)胞、MS1細(xì)胞、OCI/AML-4細(xì)胞 COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞 MOLM13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 85-1細(xì)胞、HCC-1954BL細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞 H3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1693細(xì)胞、KYSE 410細(xì)胞、WSU-DLCL(2)細(xì)胞 TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞 NCI-HUT-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TR-146細(xì)胞、ECV 304細(xì)胞、H-1869細(xì)胞 SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞 OAW-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNDZ細(xì)胞、Granta519細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞 MC3T3-E1(C4)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHCRC subclone 11細(xì)胞、PC 61.5.3細(xì)胞、P388D1細(xì)胞 SUDHL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H841細(xì)胞、RAOEC細(xì)胞、ATN-1細(xì)胞 NPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rabbit Kidney 13細(xì)胞、JB-6細(xì)胞、GM16136細(xì)胞 NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞 H747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD-4細(xì)胞、MDA MB 231細(xì)胞、SUM-52PE細(xì)胞 DSL-6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-420細(xì)胞、MDA175細(xì)胞、A427細(xì)胞 IM-95細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-204細(xì)胞、AMJ2-C8細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞 NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞 Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞 EBNA293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細(xì)胞、OV-1063細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞 LC-MS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細(xì)胞、SNU601細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞 CL 1-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細(xì)胞、H-1563細(xì)胞、IBMF-7細(xì)胞 SMA 560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II細(xì)胞、H2444細(xì)胞、I90細(xì)胞 L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞 NG108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRAEC細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、AA-Mel細(xì)胞 N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞 HEp-2 epithelioid cells人喉表皮樣癌細(xì)胞系 BEAS 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞、NCI-HUT-125細(xì)胞 Lieming Xu-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞、MDA231-LM2細(xì)胞 HeLaS3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM細(xì)胞、H-187細(xì)胞、MOVAS細(xì)胞 H-1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A431/P細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞 "
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