"HuT 78 Cell:人T淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:懸浮
細(xì)胞背景資料:皮膚;T淋巴瘤;男性
CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞
MOLT 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R.K.13細(xì)胞、HANK1細(xì)胞、NS20-Y細(xì)胞
SNB19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV21細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞、H748細(xì)胞
NCI-H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細(xì)胞、H676細(xì)胞、VSMC細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HuT 78 Cell:人T淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2227細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2286細(xì)胞、HC11細(xì)胞、FAT細(xì)胞
HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞
Hs 839.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H661細(xì)胞、HEK 293細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞
G401細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu-8988s細(xì)胞、GM03571細(xì)胞、H322細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:懸浮
HuT 78 Cell:人T淋巴瘤細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
WEHI-164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞、PC-3M-1E8細(xì)胞
H-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266 B1細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞
MT-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞、RPTEC TERT1細(xì)胞
HCC-1833細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細(xì)胞、Panc 5.04細(xì)胞、HOCF細(xì)胞
RLE-6TN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2CL8細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞
HK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 10細(xì)胞、2E8細(xì)胞、H-4-II-E細(xì)胞
HuT 78 Cell:人T淋巴瘤細(xì)胞系
LuCL4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CD 18細(xì)胞、BC-025細(xì)胞、Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞
CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞
CAL 148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TPC-1細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞、HRA-19細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
SNU354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI522細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞、BN-CL2細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞
DMS153細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL-9細(xì)胞、NCI-H1819細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
SF-767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU251細(xì)胞、IOSE-Mar細(xì)胞、CT 26細(xì)胞
NG 108-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569B細(xì)胞、MDA-MB-436細(xì)胞、A431細(xì)胞
DSL6A/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-4細(xì)胞、SW 900細(xì)胞、LK-2細(xì)胞
CAKI 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞、CHL/IU細(xì)胞
TE9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03569細(xì)胞、NCIH838細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞
Panc-1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H460細(xì)胞、GM03570E細(xì)胞、PLA801-95D細(xì)胞
746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞、VM-CUB1細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB361細(xì)胞、SW-837細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞
Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL 100細(xì)胞、HRCEC細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞
SW1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-GEO細(xì)胞、HuH-1細(xì)胞、LNCaP-C4-2細(xì)胞
CCD-841CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPF細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞
Scott and White No. 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H735細(xì)胞、MCF-7ADR細(xì)胞、NCIH740細(xì)胞
OCI AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-45細(xì)胞、SUNE1細(xì)胞、GM00346B細(xì)胞
H-1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-3細(xì)胞、MLMEC細(xì)胞、CPA47細(xì)胞
HeLa-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293T/17細(xì)胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞
HS766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLL(2)細(xì)胞、HMO6細(xì)胞、PZ-HPV-7細(xì)胞
KATO III細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 23.5細(xì)胞、PLC8024細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞
WML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106細(xì)胞、BCP1細(xì)胞、K7M2細(xì)胞
PC-9/GR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61-5-3細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞、MDA MB 134VI細(xì)胞
H2286細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU-812F細(xì)胞、MUVEC細(xì)胞、SuDHL 8細(xì)胞
A498細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-196細(xì)胞、C2-C12細(xì)胞、OSC19細(xì)胞
Functional Liver Cell-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OK-WT細(xì)胞、BC-3H-1細(xì)胞、CAMA1細(xì)胞
Nakata-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2172細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞、NCIADRRES細(xì)胞
NF639細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞
UCLA-SO-M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細(xì)胞、STO細(xì)胞、MV-3細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
NSC34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞
U-266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA.hy 926細(xì)胞、NCI H508細(xì)胞、HCC-1500細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
Hu-P-T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1細(xì)胞、NCI-H28細(xì)胞、526mel細(xì)胞
M-G63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-5細(xì)胞、SUIT-2細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
HuT 78 Cell:人T淋巴瘤細(xì)胞系
HCC44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH358細(xì)胞、SF295細(xì)胞、ME1細(xì)胞
BRL-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-6細(xì)胞、Hi5細(xì)胞、KM.12細(xì)胞
SNUC2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaTu 8988 S細(xì)胞、H-727細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞
C2C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞、RPE D407細(xì)胞
NCIH1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 B細(xì)胞、Metastatic Variant-522細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞
HD11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05887細(xì)胞、RPMI-6666細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞
RSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DH-L5細(xì)胞、TKB1細(xì)胞、UWB1.289細(xì)胞
Vero細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3255細(xì)胞、A-375SM細(xì)胞、32D.3細(xì)胞
H766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞
NCIH1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03570E細(xì)胞、COLO-738細(xì)胞、TOV112D細(xì)胞
H1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞、H-676細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞、U87 MG細(xì)胞
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