"DLM8 Cell:C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:Dunn's骨肉瘤;雌性;C3H
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞
HSC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細(xì)胞、mIMCD-3細(xì)胞、NSH細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DLM8 Cell:C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
143TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)C細(xì)胞、SK Hep1細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞
LM(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細(xì)胞、373 MG細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞
SU86.86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2D1細(xì)胞、BIC細(xì)胞、H-1435細(xì)胞
NCIH2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-382細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞、NCIH1581細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁
DLM8 Cell:C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
Clone M-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB435細(xì)胞、MOPC細(xì)胞、SNU-368細(xì)胞
FBHE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細(xì)胞、A2780/CP細(xì)胞、MHCC97L細(xì)胞
Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CRFK細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞、NB9細(xì)胞
SW962細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞
COLO-829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細(xì)胞、SW48細(xì)胞、CA 46細(xì)胞
NIH:OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細(xì)胞、QBI-HEK 293A細(xì)胞、IEC-6細(xì)胞
NTERA-2/D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細(xì)胞、H-520細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞
DLM8 Cell:C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞系
JVM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES-2細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞、SKHEP1細(xì)胞
HGC-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLS細(xì)胞、H510細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞
CHP 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC3.27細(xì)胞、RWPE-1細(xì)胞、Hs-611-T細(xì)胞
ST細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGF-1細(xì)胞、THPI細(xì)胞、RGM-1細(xì)胞
L-M(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細(xì)胞、BALB/3T3細(xì)胞、KMM1細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
Hs821T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATC241細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞、MZ-CRC-1細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
JEKO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-520細(xì)胞、NCIH1975細(xì)胞、33604細(xì)胞
BJA-B-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GES1細(xì)胞、OVCAR-10細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞
CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞
ECC 10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1-Sq細(xì)胞、HCC-2218細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞
HEL-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細(xì)胞、NCIH1184細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞
NCIH1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-324 Med細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、NCIH82細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
32D/cl3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4-II-E-C3細(xì)胞、Hs746-T細(xì)胞、EM-3細(xì)胞
NCI-H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J82COT細(xì)胞、SKMEL28細(xì)胞、HT144-mel細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
B16-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C6661細(xì)胞、COLO 357細(xì)胞、HLEC-B3細(xì)胞
M-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEEpiC細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、RPMI7951細(xì)胞
IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞
A101D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-C2B細(xì)胞、NCI-A549細(xì)胞、B6Tert-1細(xì)胞
G422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKGT2細(xì)胞、B16F1細(xì)胞、H-2170細(xì)胞
HCC1500細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC33細(xì)胞、HTR-8/SV neo細(xì)胞、H1417細(xì)胞
HR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293F細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞、SNU638細(xì)胞
hTERT RPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8226細(xì)胞、MHCC97-H細(xì)胞、H-2108細(xì)胞
SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
PTK 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 699細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞、hCMEC/D3細(xì)胞
MC 116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM06141細(xì)胞、KFB細(xì)胞、MH-S細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
D283 Med細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JB-V細(xì)胞、L 428細(xì)胞、BC3H1細(xì)胞
Hs-606-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKES1細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞、LP-1細(xì)胞
Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細(xì)胞、McCoy B細(xì)胞、MES-SA Dx5細(xì)胞
ChaGo-K-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞、LS123細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞
NCI.H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE450細(xì)胞、751細(xì)胞、AG06814-J細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
COLO 320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THLE-2細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞、NCI-H1876細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
MDA157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mink Lung細(xì)胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞
Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞
HEK-293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304細(xì)胞、U-373 MG細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞
DLM8 Cell:C3H小鼠骨肉瘤細(xì)胞系
CHO-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞、NCI-HUT-69細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
BHK 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-1細(xì)胞、LLC細(xì)胞、HUVEC細(xì)胞
NP-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4-II-E細(xì)胞、Huh7.5細(xì)胞、NCIH1105細(xì)胞
Jurkat Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE2Z細(xì)胞、D-324MED細(xì)胞、RIN-m細(xì)胞
H.Ep. #2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1792細(xì)胞、Hs 739.T細(xì)胞、COV-362細(xì)胞
NCC-IT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2198細(xì)胞、MGHU1細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞
BV173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細(xì)胞、RBL.2H3細(xì)胞、HS-445細(xì)胞
HSC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2081細(xì)胞、Nb2細(xì)胞、HUCEC細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
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