"EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：腹水瘤
PT67細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR22Rv1細胞、OCILY3細胞、CCD841CoN細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
Tb 1 Lu (NBL-12)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM-5A細胞、SU-DHL-2細胞、RASMCs細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MESSA-DX5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
MRMT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
ARPE19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Balb/3T3-4-Cl31細胞、U 937細胞、IM 9細胞
PTK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2052細胞、CFPAC細胞、MuM-2B細胞
細胞生長特性：半貼壁
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
Gejiu Lung Carcinoma-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1395細胞、87 MG細胞、OCILY-3細胞
MCF-12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞
SUP-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細胞、A-431細胞、SN12C細胞
HTori3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM637A細胞、MDA330細胞、P30/Ohkubo細胞
NK92-MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP 89細胞、CHP 126細胞、BRL3A細胞
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm-5F細胞、3T3-Swiss albino細胞、EBC1細胞
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
GM17219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM159細胞、BT483細胞、Hs-852-T細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞
P3.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
B95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE 32.T細胞、CoC1細胞、118MG細胞
Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞
BSC40細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J 82細胞、HCC-1599細胞、751-NA細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
HUT 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1666細胞、SNU-475細胞、MEG-01細胞
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
OCI/AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞
CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
RPTEC TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786O細胞、H2591細胞、CF PAC-1細胞
PCI:SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-1469細胞、NCI747細胞、A10細胞
Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
HEK-293-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：201T細胞、NCI-H1048細胞、STO細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞
HEK AD293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細胞、C918細胞、SF-767細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
RH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
MCF-12A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LSC-1細胞、SKHEP-1細胞、EB-2細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
MC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUIT2細胞、PTK-2細胞、CAL-85-1細胞
YD-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H64細胞、293-FT細胞、MS 751細胞
MBT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-9/GR細胞、M-14細胞、MHCC97H細胞
Walker256-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM239細胞、SW-954細胞、HN4細胞
SJRH-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 14細胞、746T細胞、SuDHL 4細胞
Spodoptera frugiperda clone 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21細胞、VP 267細胞、KBM5細胞
SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞
L(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
SuDHL 10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madin-Darby Canine Kidney細胞、CATHa細胞、SK-MEL 28細胞
GM02219細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMY1022細胞、KP-2細胞、MDA 231-LM2-4175細胞
WM266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT 5A細胞、OUMS23細胞、SGC7901細胞
TE15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-Tera-2細胞、PAEC細胞、4T1-LUC細胞
P3X63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞
HCA7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI1細胞、H128細胞、Hs-606-T細胞
MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞
EAC-E2G8 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
NCIH209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LA-N-5細胞、Capan 1細胞、VE細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
Hs840T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BTI-Tn5B14細胞、NCI H548細胞、HT-55細胞
alpha-TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-527細胞、CTV-1細胞、SLK細胞
THP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBVP細胞、WM115-mel細胞、MUTZ3細胞
NCIH1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1385細胞、Madison lung細胞、PL11細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
BrCL18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ3細胞、SKMEL-2細胞、VK-2/E6E7細胞
CF Pac1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：bEND.3細胞、32D-Cl3細胞、HCC-1588細胞
EOC 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(1)n細胞、HRMC細胞、CORL23細胞
mIMCD-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR4細胞、APRE-19細胞、Hs819.T細胞
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