"BSC40 Cell:非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:腎;自發(fā)永生
HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F98細(xì)胞、H-1734細(xì)胞、4T1.2細(xì)胞
Line 870 Emory University-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD841CoTr細(xì)胞、U343細(xì)胞、Wien-133細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
NCI-H838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-RPE-1細(xì)胞、R1610細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BSC40 Cell:非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Co-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN Cl-5F細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞、MDAMB415細(xì)胞
NCI-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC251細(xì)胞、TE15細(xì)胞、BJ1細(xì)胞
MyLa2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-24細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞、NCI-H1781細(xì)胞
CAL-120細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ishikawa細(xì)胞、RAT2細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
BSC40 Cell:非洲綠猴腎細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV504細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞、CCD18Co細(xì)胞
WI 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-346細(xì)胞、MOLT-4細(xì)胞、Okayama University Medical School-27細(xì)胞
HCFB(HCF)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-231細(xì)胞、MG63細(xì)胞、OVCAR 420細(xì)胞
SU-86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA 7細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞、OVCA8細(xì)胞
OE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞、JM-1細(xì)胞
PK15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 2664細(xì)胞、HEC151細(xì)胞、Mel RM細(xì)胞
H1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細(xì)胞、HEK-293-FT細(xì)胞、EAC細(xì)胞
BSC40 Cell:非洲綠猴腎細(xì)胞系
B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞
GM02219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細(xì)胞、Lec1細(xì)胞、RD 2細(xì)胞
G402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細(xì)胞、TE353.SK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞
HTSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM-1215細(xì)胞、Ej138細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
KMST6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH7A細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞、NB19-RIKEN細(xì)胞
CHL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373 MG細(xì)胞、Chang Cells細(xì)胞、HC11 Mammary Epithelium細(xì)胞
Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
2780CP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOPN8細(xì)胞、TFH細(xì)胞、CHP-100細(xì)胞
COR-L23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF Pac1細(xì)胞、J774A1細(xì)胞、NFS 60細(xì)胞
A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞
MCF-7/ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細(xì)胞、CRFK細(xì)胞、SCC9細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
NS-I/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3J2細(xì)胞、WRL-68細(xì)胞、SNUC2B細(xì)胞
NCI-H1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1694細(xì)胞、RKO-E6細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞
H-1563細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2023細(xì)胞、MIN6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞
28SC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-ESF-1細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞、COLO201細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
COLO 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192C細(xì)胞、MSTO-211H細(xì)胞、MES23.5細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
NL20SV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞
L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC3細(xì)胞、M619細(xì)胞、MKN 28細(xì)胞
MOVAS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Liver-7702細(xì)胞、NCI-H460細(xì)胞、WM266細(xì)胞
Hs 766T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞、WM-266-4細(xì)胞
DU4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP細(xì)胞、MT-4細(xì)胞、KTC1細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3細(xì)胞、MDAPCa2b細(xì)胞、RT-4細(xì)胞
PaTu 8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細(xì)胞、HK2細(xì)胞、NCTC 929細(xì)胞
Institute for Medical Research-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-415細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞、COLO357細(xì)胞
SJSA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L2細(xì)胞、CL34細(xì)胞、SHG44細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87細(xì)胞、HT-144細(xì)胞、A875細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALL-1細(xì)胞、C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞
MAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH820細(xì)胞、TF1細(xì)胞、RBL細(xì)胞
Toledo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-361細(xì)胞、H-295細(xì)胞、KP4細(xì)胞
AMO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS-45-1細(xì)胞、MHCC 97-L細(xì)胞、OPM2細(xì)胞
GM17346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-375.S2細(xì)胞、Line 697細(xì)胞、NCIH2342細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
SW 780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-695-T細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞、H-1734細(xì)胞
Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞
TGW-I-nu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細(xì)胞、N1E-115細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
BSC40 Cell:非洲綠猴腎細(xì)胞系
P31-FUJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:801-D細(xì)胞、HCT 15細(xì)胞、SL-29細(xì)胞
ZR75_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML193細(xì)胞、CCC-ESF-1細(xì)胞、RPMI 2650細(xì)胞
LNCaP-ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA 144細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-28細(xì)胞、P3HRI細(xì)胞
EFM-192B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH548細(xì)胞、CEK細(xì)胞、Hs 578T細(xì)胞
UMUC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JJN3細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞、Rat Lung-65細(xì)胞
HCCLM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM3細(xì)胞、639 V細(xì)胞、Capan 2細(xì)胞
HCEC-B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AX-Mel細(xì)胞、MNNG細(xì)胞、H-1975細(xì)胞
Melan-a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC15細(xì)胞、HNE1細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞
OVCAR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE10細(xì)胞、SW1417細(xì)胞、LN-382細(xì)胞
Rat 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞
BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL62細(xì)胞、Hs729細(xì)胞、HemECs細(xì)胞
L78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L929(NCTC)細(xì)胞、HOMEC細(xì)胞、LX-2細(xì)胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。