"SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:肝內膽管癌;男性
PTK2細胞系相關產品:JIII細胞、OVCAR3細胞、MDA-MB-435 S細胞
NCI-H292細胞系相關產品:FC33細胞、GM04671細胞、Eca-109細胞
Hs940.T細胞系相關產品:293 HEK細胞、UMNSAH-DF 1細胞、IGROV細胞
HCC0078細胞系相關產品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Hs 688(A).T細胞系相關產品:SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
MILE SVEN 1細胞系相關產品:AN3 CA細胞、Ha Fe細胞、GM04154細胞
Hs 729T細胞系相關產品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞
8305C細胞系相關產品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞系相關產品:H-810細胞、KAT-5細胞、MB39細胞
細胞生長特性:貼壁
SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
OVCAR-8細胞系相關產品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
CO115細胞系相關產品:SK.MEL.5細胞、PECAPJ34細胞、MADB-106細胞
MCF7/WT細胞系相關產品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
OKT 3細胞系相關產品:SNU-638細胞、ROS17/2.8細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞
Hep II細胞系相關產品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
HOMEC細胞系相關產品:SK-MES細胞、KYSE-510細胞、BEL 7404細胞
H9c2細胞系相關產品:DU_145細胞、HOS(TE85)細胞、FOX-NY細胞
SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
SNU-719細胞系相關產品:HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
HTR8細胞系相關產品:JHH2細胞、Farage OL細胞、HDQP1細胞
DMS114細胞系相關產品:LL/2細胞、Nb 2細胞、HCC-9204細胞
TW01細胞系相關產品:WEHI3B細胞、CCD966SK細胞、SKRC-39細胞
NCIH1993細胞系相關產品:3AA細胞、KPL4細胞、HUV-EC-C細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
58F細胞系相關產品:BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
3T6細胞系相關產品:L cells細胞、alpha TC1-6細胞、OV 1063細胞
Colo-201細胞系相關產品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
Colo-201細胞系相關產品:NK-92 MI細胞、BEL 7404細胞、Ha Fe細胞
AA-Mel細胞系相關產品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
NHRF細胞系相關產品:D-341 Med細胞、MB 157細胞、IOSE 29細胞
293A細胞系相關產品:WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
SU8686細胞系相關產品:BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
C-33 A細胞系相關產品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
SVEC 4-10細胞系相關產品:H-711細胞、RMG-1細胞、GLC-82細胞
Ca759細胞系相關產品:130T細胞、C3H10T1/2CL8細胞、OAC-P4C細胞
NMCG-1細胞系相關產品:GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
SKNMC細胞系相關產品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞
ST-2細胞系相關產品:SW 756細胞、HEK-293-H細胞、JOSK-M細胞
T47D:A細胞系相關產品:PL-45細胞、FLC7細胞、OACP4 C細胞
A704細胞系相關產品:VP229細胞、HFLS細胞、Hs606細胞
OS-RC-2細胞系相關產品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
NCTC 3960細胞系相關產品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
MRC-5細胞系相關產品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
LAN1細胞系相關產品:HCE細胞、SKG-IIIa細胞、Mac-1細胞
KYSE270細胞系相關產品:2780CP細胞、P3JHR1細胞、BALB/3T3細胞
ECV細胞系相關產品:S91細胞、NCIH522細胞、H1954細胞
EAhy926細胞系相關產品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞
SCL-I細胞系相關產品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞
SRA01/04細胞系相關產品:SUM-149PT細胞、MAEC細胞、Colo-201細胞
NCIH847細胞系相關產品:SUPM2細胞、Pa16C細胞、H23細胞
HOS-TE85細胞系相關產品:SkMel31細胞、MS1細胞、OCI/AML-4細胞
WM35細胞系相關產品:A-172細胞、293F細胞、H-2286細胞
Kupffer細胞系相關產品:Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
A549/ATCC細胞系相關產品:DU-4475細胞、ReNcell CX細胞、CCD-841CoTr細胞
KYSE-70細胞系相關產品:HEK/293細胞、NCI-H82細胞、Nthy-ori 3.1細胞
MPP-89細胞系相關產品:Adeno-293細胞、COLO 738細胞、IBRS2細胞
CCC-HPF-1細胞系相關產品:rHSC-99細胞、COLO-205細胞、U138-MG細胞
MCAEC細胞系相關產品:GM15452細胞、293T細胞、McA-RH 7777細胞
87MG細胞系相關產品:BJA-B-1細胞、SK-RC 42細胞、GA10細胞
RPMI1846細胞系相關產品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
NCI-H1105細胞系相關產品:NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
BT.549細胞系相關產品:H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
COLO 320 DM細胞系相關產品:HT 1197.T細胞、WPMY1細胞、SK-MEL-2-LUC細胞
Earle's L cells細胞系相關產品:MGECs細胞、NCI-SNU-620細胞、JHH7細胞
C1498細胞系相關產品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞
OsACL細胞系相關產品:Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞、LU65細胞、SUM-159-PT細胞
T98 G細胞系相關產品:Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
NCI H929細胞系相關產品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
V79-1細胞系相關產品:MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
UACC 812細胞系相關產品:RL-952細胞、VMM5細胞、Tu212細胞
LY細胞系相關產品:H7721細胞、H35 Reuber細胞、Karpas-422細胞
H23細胞系相關產品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
H-460細胞系相關產品:GLC-82細胞、RMG-1細胞、MH-S細胞
"
關鍵字: SG231 Cell:人膽管上皮癌細胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產、銷售與服務于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標準實驗室與生產廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術團隊,提供超過100000的生物、化學產品,產品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領域。公司秉承“客戶至上、服務一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質的產品和服務提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內外各種品牌的高品質試劑產品,充分滿足客戶的試劑需求。