"Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：乳腺癌；腹水轉(zhuǎn)移；女性
SNU-354細胞系相關產(chǎn)品：SK RC 20細胞、Ketr-3細胞、NCTC-1469細胞
U266 B1細胞系相關產(chǎn)品：NCIH727細胞、NHA細胞、H920細胞
P30-OHKUBO細胞系相關產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
Hs-578-T細胞系相關產(chǎn)品：H2196細胞、OKa-C-1細胞、H-2228細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié)：１)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為５%-１５%，不要低于５%或高過２０%，因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為１０%，可以適量加減；２)何時須更換培養(yǎng)基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換；３)購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集；４)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后，為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可；５)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–８０°C太久；６)收到的冷凍管瓶身破裂，瓶蓋有裂紋，或瓶蓋脫落之原因？冷凍管瓶蓋裂紋，或瓶身破裂，可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當，造成冷凍管裂損，建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫，乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象，冷凍管有可能因此而造成細胞污染，故冷凍管于放入和取出液氮桶時，均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Lewis-Lung細胞系相關產(chǎn)品：NCIH187細胞、CCRF細胞、HCC-1954細胞
MOPC細胞系相關產(chǎn)品：HS-294細胞、GM3570細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞
SL1細胞系相關產(chǎn)品：Cates-1B細胞、NCI-H2347細胞、TFK1細胞
H-889細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
SNU-1040細胞系相關產(chǎn)品：SCL-2細胞、MSC細胞、SW-1353細胞
細胞生長特性：貼壁
Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項：細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢？沒錯，就是記得到時間了，拿出來復蘇。那么，細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢？細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在？活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染(真菌、支原體等)，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至７０%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~５ x１０６ Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)；凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞，有不同類型的凍存液，根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有)：５-１０% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì)；５-１５%甘油；如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長，應在５０%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長２４小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型，日期，凍存人等信息，并保證每凍存管不超過１.５ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi)，因此，此步驟使用干冰，或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意，在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息，做好記錄是非常非常重要的！還有一個最重要的，一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞，以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題！細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要，熟記以下要點：當從液氮罐內(nèi)取出細胞時，有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況，使用保護面罩和防護服十分必要；其實，細胞復蘇只是一個簡單的實驗，不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié)，不然，也不一定會盡如人意。例如說，人身健康方面：一定要記得做好防凍工作，戴上護目鏡；盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
CA922細胞系相關產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
H-929細胞系相關產(chǎn)品：C3H/10T1/2 CL8細胞、ZR751細胞、NCI-H661細胞
WEHI 231細胞系相關產(chǎn)品：Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞
D-324MED細胞系相關產(chǎn)品：SF 539細胞、A-875細胞、OE-33細胞
Tu212細胞系相關產(chǎn)品：FOX-NY細胞、RT4P細胞、H-1436細胞
H2591細胞系相關產(chǎn)品：Hep G2-Luc細胞、SKOV-3細胞、CEMC7細胞
SKGT4細胞系相關產(chǎn)品：BEND細胞、HCC15細胞、CCRF SB細胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
SNU739細胞系相關產(chǎn)品：CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞
BXPC3細胞系相關產(chǎn)品：ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
HS-695T細胞系相關產(chǎn)品：HCV29細胞、SCC 25細胞、L M (TK-)細胞
NF639細胞系相關產(chǎn)品：MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞
MM.1S細胞系相關產(chǎn)品：HCC-1419細胞、C-4I細胞、F36P細胞
HEK 293 c18細胞系相關產(chǎn)品：HBEpiC細胞、OVCAR 420細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞
IPI-2I細胞系相關產(chǎn)品：KP-N-RT-BM-1細胞、Hs870T細胞、TE-14細胞
C-33A細胞系相關產(chǎn)品：NCIH740細胞、CEM-T4細胞、PC3M-IE8細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
CAL 33細胞系相關產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
TOV21G細胞系相關產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產(chǎn)品：Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
RD-ES細胞系相關產(chǎn)品：BSC1細胞、H-810細胞、OCI-AML-4細胞
NTERA2-cloneD1細胞系相關產(chǎn)品：GL-261細胞、MB49細胞、SUNE 1細胞
NTERA-2cl.D1細胞系相關產(chǎn)品：DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞
HuPT4細胞系相關產(chǎn)品：MC-38細胞、Loucy細胞、SJSA1細胞
CAL-78細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1435細胞、COLO 680N細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞
NPC-TW 01細胞系相關產(chǎn)品：SK-OV-3細胞、V79-4細胞、BLO11細胞
L132細胞系相關產(chǎn)品：SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：DHL6細胞、H-740細胞、OKAC1細胞
LUDLU1細胞系相關產(chǎn)品：OCILY3細胞、CT-26 WT細胞、K562細胞
BALL1細胞系相關產(chǎn)品：Wien 133細胞、HEH2細胞、UCLA-SO-M21細胞
MUTZ-1細胞系相關產(chǎn)品：SKM1細胞、HEK293-EBNA細胞、HIT-T15細胞
HuNS1細胞系相關產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞系相關產(chǎn)品：UACC 893細胞、JVM2細胞、LS-411N細胞
H1563細胞系相關產(chǎn)品：GM00346細胞、T98細胞、MT2細胞
MiaPaCa-2細胞系相關產(chǎn)品：TW-039細胞、FET細胞、Potorous tridactylus Kidney 1細胞
Karpas299細胞系相關產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
Hep 3B細胞系相關產(chǎn)品：Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞、SNGM細胞、HEK 293 c18細胞
MS751細胞系相關產(chǎn)品：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
C-Lu-65細胞系相關產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
GA10細胞系相關產(chǎn)品：H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞
HM06.A1細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H847細胞、H2029細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞
P3/NS-1細胞系相關產(chǎn)品：3LL細胞、SUM-102PT細胞、IPLB-Sf21細胞
Hs695細胞系相關產(chǎn)品：NB4細胞、C-33-A細胞、M109細胞
KHYG-1細胞系相關產(chǎn)品：Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
SHI-1細胞系相關產(chǎn)品：T24(ECV304)細胞、C32r細胞、A 172細胞
SUDHL-6細胞系相關產(chǎn)品：MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞
SR786細胞系相關產(chǎn)品：NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
LTPA細胞系相關產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
LTPA細胞系相關產(chǎn)品：NCIH244細胞、HT-55細胞、NCIH1299細胞
HAC-84細胞系相關產(chǎn)品：Panc-3_27細胞、KNS62細胞、Hs-729-T細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
Hepatoma 22細胞系相關產(chǎn)品：GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞
L1210細胞系相關產(chǎn)品：HCA-7細胞、SVG p12細胞、TE9細胞
FRH-0201細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-Clone-FGC細胞、H-125細胞、SCLC-21H細胞
SW 579細胞系相關產(chǎn)品：ATN-1細胞、WM 115細胞、EPC細胞
F81細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
Panc 05.04細胞系相關產(chǎn)品：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
P30-OHK細胞系相關產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
GM2131細胞系相關產(chǎn)品：RT-112細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞、PIEC細胞
H87細胞系相關產(chǎn)品：LNCaP-ATCC細胞、HEK293F細胞、RC-2細胞
NCI747細胞系相關產(chǎn)品：N87細胞、KYSE0520細胞、NCI-H735細胞
Sp2/mIL-6細胞系相關產(chǎn)品：MDAPCa2b細胞、WM239A細胞、UCLA RO-81-A-1細胞
AAV293細胞系相關產(chǎn)品：COS1細胞、JIMT-1細胞、PASMCS細胞
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關鍵字： Evsa-T Cell:人乳腺癌細胞系
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