"CPA 47 Cell:牛肺血管內(nèi)皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肺血管；內(nèi)皮細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
NCM356細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK II細胞、REC1細胞、AK細胞
MDA453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EMT-6細胞、CEM clone 7細胞、P3/X63-Ag8細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
CPA 47 Cell:牛肺血管內(nèi)皮細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復(fù)１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
TYK-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SEG-1細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞、HTSMC細胞
HCC94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細胞、AN-3細胞、H2227細胞
SK-N-BE(2)-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS (TE85)細胞、HCC 2185細胞、PL9細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
WRL 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAT2細胞、LIXC002細胞、U 138 MG細胞
細胞生長特性：貼壁
CPA 47 Cell:牛肺血管內(nèi)皮細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCI-H187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCK8細胞、Y 1細胞、HEK-293H細胞
HSAS4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 2058細胞、C8166細胞、MDA-MB-134VI細胞
769P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH1細胞、AU-565細胞、H-1770細胞
OVCA 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
NCI-H2009細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHP 212細胞、LS 174T細胞、WEHI3細胞
NRCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fu97細胞、8505C細胞、COLO320HSR細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
CPA 47 Cell:牛肺血管內(nèi)皮細胞系
H4-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細胞、CESS細胞、THEECs細胞
DU 145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Human Lens-124細胞、McA-RH 8994細胞、U118-MG細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
GDM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞
PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
CCRF-CEM C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIMEC細胞、FaDu細胞、HCT-GEO細胞
CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
Line 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4IIEC3細胞、F442-A細胞、hMSC-BM細胞
624細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCMEC細胞、D10.G4.1細胞、CMT 64細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
Hk-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B5537SKIN細胞、BT20細胞、PC-10細胞
Granta 519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HET-1A細胞、J 774A.1細胞、Central Adrenergic TH-expressing a細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
McA-RH8994細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN1細胞、PL-45細胞、Mel624細胞
HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞
RPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES13細胞、293A細胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
SK-N-BE-2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1915細胞、Human Foreskin Fibroblast細胞、ABC-1細胞
Jurkat77細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞、H766T細胞
NF639細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN74細胞、MDAPCa-2b細胞、SJRH 30細胞
PLMVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細胞、HTh-74細胞、L(TK-)細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
NCI-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
BAR-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞
SU-DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-522細胞、SW 579細胞、NIHOVCAR3細胞
U-373MG ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21-AE細胞、A2780-CP細胞、HK-2 [Human kidney]細胞
HEK 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞
Karpas 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNE-1細胞、AML-12細胞、RINm5F細胞
OCI Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-1細胞、HD-LM-2細胞、A2780-CP細胞
C26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS123細胞、TNC-1B12B4細胞、H9c2細胞
H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc5.04細胞、NCIH1395細胞、190PT細胞
Vero 76 clone E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK HEP 01細胞、JEKO細胞、SKNSH細胞
HCC1588細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-211細胞、MDA-kb2細胞、H-3255細胞
CPA 47 Cell:牛肺血管內(nèi)皮細胞系
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
Chinese Hamster Ovary細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs934T細胞、SKBR-3細胞、MGC-803細胞
SMA 560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF-II細胞、H2444細胞、I90細胞
NRK 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCA205細胞、YAC-1細胞、T-CAM2細胞
Med 283細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT5A細胞、CHO-Lec1細胞、MS751細胞
H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
H-2085細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-PAP細胞、GTL16細胞、NCTC 3960細胞
HepG2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-102PT細胞、HUCCT1細胞、LS411細胞
Plaepi 34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA PCa 2b細胞、NBL_S細胞、CA922細胞
GM03570E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-2細胞、WM-239A細胞、Lu-165細胞
33604細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-18細胞、KMS18細胞、ZR-75-1細胞
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