"LLC-PK1 Cell:豬腎細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：腎；自發(fā)永生；Hampshire
Scott細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GOS3細胞、SCC 4細胞、SW1116細胞
HEC-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Oka-C1細胞、SK Col 1細胞、OEC33細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
LLC-PK1 Cell:豬腎細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NPA87-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM 52PE細胞、Y3細胞、HT 1376細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
HeLa-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293T/17細胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細胞、SP2/0 Ag-14細胞
SUM159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
WERI-Rb1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GCT細胞、Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、CAOV3細胞
細胞生長特性：貼壁
LLC-PK1 Cell:豬腎細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
RMa-bm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞
KAT-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2030細胞、NCIH1993細胞、CMT93細胞
CCD-112 CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：266 Bl細胞、H211細胞、Panc-02細胞
H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Giant Cell Tumor細胞、HFF1細胞、8505C細胞
MS 751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA5細胞、BALB 3T3 clone A31細胞、NCI-H520細胞
H-865細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Huh-7.5細胞、A20細胞、SKES-1細胞
Madison lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-279細胞、CFPAC-1細胞、K 562細胞
LLC-PK1 Cell:豬腎細胞系
SNU-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH2細胞、NPC-TW01細胞、NCIH1435細胞
P3X63 AG8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-CAM2細胞、HMEC細胞、HELF細胞
Leydig細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
SK-N-FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu細胞、P3/X63/Ag8細胞、MCF 10A細胞
SNU878細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L cell細胞、CMECs細胞、A-875細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPA87細胞、HT-144細胞、A875細胞
NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
CEMx721.174.T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn5B1-4細胞、TE-13細胞、2BS細胞
BCPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細胞、X63-AG 8.653細胞、COLO-357細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
NCI-H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
B16-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C6661細胞、COLO 357細胞、HLEC-B3細胞
LS-174T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-EC3細胞、NCIH1869細胞、SKCol1細胞
NCI-HUT-596細胞系相關(guān)產(chǎn)品：675T細胞、A 253細胞、CWR22Rv1細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
CCD1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H711細胞、ETCC-007細胞、MM134細胞
GM-3573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD18細胞、COLO-394細胞、CCRF-CEM C7細胞
KALS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA 1細胞、SUDHL1細胞、OVCA433細胞
ATC241細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 1080.T細胞、CA922細胞、MDBK細胞
SW-948細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1573細胞、CL-34細胞、SKG-3a細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
Panc-3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WiDr細胞、SUIT 2細胞、PC3M-2B4細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
HEEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、BE(2)-C細胞、JCA1細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
MAVER-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-193細胞、NCI-H2170細胞、SNU-520細胞
Be-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-022細胞、SIRC細胞、3T3(A31)細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
LLC-PK1 Cell:豬腎細胞系
GTL-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H35 Reuber細胞、SNG-M細胞、Colo205細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
GP293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU 812細胞、CL-11細胞、BMSC/hBMSCs細胞
NP69細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2023細胞、LM(TK-)細胞、NCI-H1573細胞
MTC-TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞
HCT-FET細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 50細胞、H3255細胞、HCT-8細胞
SEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a2細胞、OC-3-VGH細胞、WM115細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
ROS1728細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
UPCI:SCC154細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞
H-2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細胞、HTR8細胞、EB-1細胞
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