"FHs 74 Int Cell:人小腸正常細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:小腸
NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
FHs 74 Int Cell:人小腸正常細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW 839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL 4細胞、TT細胞、FU-97細胞
EFM-192C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細胞、MDAPC2B細胞、293-H細胞
SCC90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO.205細胞、U-373MG ATCC細胞、W256細胞
PC-3M IE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細胞、MRC-V細胞、AML-12細胞
HEL-92-1-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細胞、Panc-3_27細胞、BNL.1ME A.7R.1細胞
細胞生長特性:貼壁
FHs 74 Int Cell:人小腸正常細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細胞、COLO 16細胞、C2C12細胞
EOC20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細胞、AgC11x3A細胞、Madin-Darby Canine Kidney細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞
FHs 74 Int Cell:人小腸正常細胞系
NCI-H1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL2H3細胞、RA細胞、NCI-H596細胞
NE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 180細胞、OV-2008細胞、MEC-1細胞
L132細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 579細胞、UCLA SO M14細胞、SK-LMS-1細胞
EPC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細胞、SPCA1細胞、HCC1419細胞
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
brain-derived Endothelial cells.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NH-6細胞、RPMI 7951細胞、OCI-Ly 3細胞
H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
NCI-H1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2110細胞、KYSE 510細胞、CNE1細胞
CCD841CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-72細胞、MFM223細胞、U-343細胞
RBVEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細胞、HDLM2細胞、HBZY 1細胞
H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
RS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細胞、MSTO-211細胞、Namalwa細胞
SN-12C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BRL 3A細胞、KM.12細胞、MCF7細胞
CACO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG231細胞、HFB細胞、GBCSD細胞
LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE520細胞、Colon26細胞、HIBEC細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
MG-63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEV-1細胞、NRK-52E細胞、FK81細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、COLO-679細胞、Hs-27細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
LPC-H12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
N9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細胞、KU-812-F細胞、HT144mel細胞
H-1930細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PaCa2細胞、HS-294-T細胞、253J-BV細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
CHP 126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-23細胞、OVCAR.3細胞、Cates-1B細胞
NS20-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F442-A細胞、HeLa229細胞、FM-88細胞
6-10B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ChA-1細胞、OVCA8細胞、SU-86-86細胞
OVCAR432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU-65M細胞、Malme-3M細胞、H-2030細胞
NCIH1819細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW2細胞、SUM52PE細胞、SVEC 4-10細胞
Roswell Park Memorial Institute 1788細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EM3細胞、SGC7901/DDP細胞、C3H10T1/2細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
Ramos 2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSI/1-Ag4-1細胞、Hx147細胞、no.11細胞
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
SU4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細胞、MCA-38細胞、CAL-39細胞
CF-1 MEF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-62細胞、RM1細胞、NCI-H-82細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
LS174細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIBEC細胞、33604細胞、H1838細胞
B16F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-FT細胞、NCI H2106細胞、MLA144細胞
PFSK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GT38細胞、Tu-212細胞、Roswell Park Memorial Institute 8402細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
WM115細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1細胞、SN12PM6細胞、Jurkat FHCRC細胞
FHs 74 Int Cell:人小腸正常細胞系
H4-II-E細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hmy.2 CIR細胞、PANC 203細胞、624細胞
HCC-94細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細胞、8226/S細胞、H2081細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
NCIH146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H64細胞、A375SM細胞、293-F細胞
Glioma-261細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP 10-3細胞、H2141細胞、COLO 205細胞
H2073細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細胞、CSQT-2細胞、McA-RH8994細胞
Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞
J-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細胞、MDA-175細胞、NCI-H2172細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
WiDrTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-251細胞、SNU387細胞、OCI-LY-7細胞
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