"A549-Taxol Cell:人肺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
HCC1954-BL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-A細胞、SK-MEL-3細胞、MyLa 2059細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A549-Taxol Cell:人肺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié)：細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢？我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時間，有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗；４)不帶手套，徒手操作；５)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺和桌面，東西太多太亂：超凈臺不是儲物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺！這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞！一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里，細胞就會養(yǎng)的不好，啥時候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染，如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?！緜鞔毎硕嗫陔s，難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室，實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細胞污染；超凈臺做實驗時，喜歡說話聊著做試驗，要是還不帶口罩，里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢！
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Hs 695.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞
Okayama University Medical School-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-316細胞、H-2108細胞、ELD-1細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
MOLP2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231細胞、Panc2.03細胞、PTK1細胞
74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT-BM細胞、H-1581細胞、H6c7細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
A549-Taxol Cell:人肺癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時，從組織消化下細胞。這種方法作用溫和，對細胞損傷較小，但是，價格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細胞與間質(zhì)，對細胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大，但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。５、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是：對細胞損傷小，不需要中止或洗細胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺上，很快細胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
IOSE-80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、LO2細胞、H1781細胞
K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞
SNU-C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NGP細胞、GLAG-66細胞、Ly7細胞
NTC200細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUPB15細胞、SK-ES細胞、P815細胞
WPMY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：8226細胞、K7M2-WT細胞、VM Cub 1細胞
HEL-299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1細胞、TE3A細胞、NCIH810細胞
A549-Taxol Cell:人肺癌細胞系
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
FC33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MonoMac1細胞、HEK-A細胞、AM38細胞
Hs 578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-AS細胞、F98細胞、WM 239-A細胞
NCI-UMC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞
COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞
NCIH838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER1細胞、KMM-1細胞、NE-4C細胞
Y3-Ag 1.2.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：0V-1063細胞、DU_145細胞、ECC-10細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
SKMES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MG63細胞、NU-GC-4細胞、SW-982細胞
Pro-Lec1.3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細胞、UACC 812細胞、NCI-H1770細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
RH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS-1細胞、HCC-827細胞、NCI-128細胞
SUM149細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM7細胞、PA317細胞、SP-2/0-AG14細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
CHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MBMEC細胞、NCI-H220細胞、MDA157細胞
LLC-PK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KHYG細胞、INS-1細胞、HEK293EBNA細胞
HO1-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：143TK-細胞、NCIH847細胞、YD15細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
DoHH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSCs（mUCMSCs）細胞、Lung cancer-1/squamous細胞、RAW264.7細胞
OVCAR420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SiHa細胞、MDA MB 134VI細胞、SF767細胞
JURKAT E-6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL細胞、NCIH647細胞、Balb/c3T3細胞
SUPB-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841-CoN細胞、HCT-8細胞、NCI-H446細胞
CCD19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi-1細胞、McA-RH7777細胞、Kit-225細胞
High-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH446細胞、CL-40細胞、HCC-1359細胞
H2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細胞、Panc08.13細胞、Hs 274細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
HN 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞
NCI-H2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1651細胞、BNL-HCC細胞、H-441細胞
IEC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AdHek細胞、OCI-LY-7細胞、Hs 839.T細胞
HFT8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV 3細胞、Bac12F5細胞、CCD1095Sk細胞
AAV293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
B16/BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞
RSC96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG [Human lung carcinoma]細胞、H-322細胞、Y 1細胞
SUDHL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MX-1細胞、NCI-H929細胞、SKml2細胞
SKO-007細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1833細胞、NBL-5細胞、HKBML細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
CL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7404細胞、HEL-92細胞、MiaPaCa-2細胞
DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
SW 1353細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729.T細胞、WM266-4細胞、alphaTC clone 6細胞
A549-Taxol Cell:人肺癌細胞系
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
RL95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMVECs細胞、P30/0HK細胞、OCI/AML-2細胞
NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞
MGC-803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
SupT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HB611細胞、HCC1171細胞、H4-IIE-C3細胞
HO-8910細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2081細胞、LA-795細胞、SUM159PT細胞
L 540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JKT1細胞、RWPE-2細胞、UACC 893細胞
Rat-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215A細胞、MDA231細胞、KU-812-F細胞
SUSM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 527細胞、KNS-42細胞、Eca109細胞
SCL II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBRS-2細胞、HO-8910細胞、J774.A1細胞
PANC0504細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ATN1細胞、SW-839細胞、COLO394細胞
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