"Hs 578T Cell:人乳腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
COLO 320F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Hs 578T Cell:人乳腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度?冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
CT26-clone 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRCV細胞、Hce8693細胞、SF 539細胞
SKES1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細胞、Hs819.T細胞、HONE1細胞
HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞
PC615.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細胞、LIM1215細胞、BEL7402細胞
L-1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
Hs 578T Cell:人乳腺癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
PC 12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-2650細胞、RPMI 6666細胞、SKN-SH細胞
NBLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEF細胞、RT-BM 1細胞、RK 13細胞
NOK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、RPMI 1846細胞、DoHH2細胞
LLC-MK-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
HepaRG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/O細胞、HRVEC細胞、HEMCSS細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
Hs 578T Cell:人乳腺癌細胞系
GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞
VK-2/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-445細胞、HT(H9)細胞、GLC82細胞
KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、J111細胞、M14細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
OV2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4/1細胞、HRC-99細胞、NCI-H727細胞
NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
KMS11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細胞、HOS細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞
C-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC9細胞、JIMT細胞、GM-637細胞
CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞
HT 1197.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBSMC細胞、RMS 13細胞、KNS-42細胞
U-343MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-601細胞、SW480E細胞、DB細胞
HEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
OAW 42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-I細胞、ME-180細胞、RPMI no 8226細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
HT 1080.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細胞、HANK細胞、HFL細胞
C-33 A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST2細胞、KRC-Y細胞、VP 229細胞
NCIH747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞
Sf-21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
C3H10T1-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-1細胞、BT 325細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
H-661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細胞、MKN7細胞、HCC1359細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
HT 144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE1-LUC細胞、UMC-11細胞、PC-9細胞
NCTC 3960細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、HOS/MNNG細胞、JAR細胞
U251-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細胞、DMS-153細胞、CCD33Co細胞
H735細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細胞、IPLB-Sf21AE細胞、CAL 12細胞
CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞
OE-33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC1細胞、Hs 934.T細胞、KM12 SM細胞
NCIH1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞
H-1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc02細胞、Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、293A細胞
UMNSAH-DF 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細胞、SK.MEL.2細胞、H2052_MM細胞
H2023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUPT-1細胞、Hmy.2 CIR細胞、H1651細胞
578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME1細胞、MES 23.5細胞、HT 29細胞
IPLB-Sf21-AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1細胞、H-1648細胞、MT-2J細胞
Hs 578T Cell:人乳腺癌細胞系
SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞
Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞
Mo 59J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細胞、HuTu 80細胞、Ca759細胞
HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞
EFO27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2171細胞、H1417細胞、Balb/c 3T3細胞
Immortalized Human Hepatocytes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細胞、H-774細胞、CaES-17細胞
MDA-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA1細胞、CHP-100細胞、Caco-2/BBe 1細胞
108CC15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細胞、BHP10-3細胞、RT 112細胞
Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞
THP-1(ATCC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J.E6-1細胞、BLO-11細胞、Vero 76細胞
NP69SV40T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3E1細胞、HOEC細胞、MGHU1細胞
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU216細胞、H-1417細胞、PANC-10-05細胞
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