"NT2-D1 Cell:人畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
C-643細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AD293細(xì)胞、RA.1細(xì)胞、Granta519細(xì)胞
hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞
Human Embryo Kidney-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251-MG細(xì)胞、JROECL 21細(xì)胞、C-26細(xì)胞
SCL II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IBRS-2細(xì)胞、HO-8910細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NT2-D1 Cell:人畸胎瘤細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SKES-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192B細(xì)胞、WRL 68細(xì)胞、KMB-17細(xì)胞
OCI-LY-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEC-1細(xì)胞、SKml2細(xì)胞、HIT細(xì)胞
Hs 27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細(xì)胞、A101D細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞
SUM 190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS174T細(xì)胞、HeLaS3細(xì)胞、NE-1細(xì)胞
Capan-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1341細(xì)胞、NOR 10細(xì)胞、NG10815細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分
NT2-D1 Cell:人畸胎瘤細(xì)胞系
貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
hTERT-HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞
SK-Mel1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M-2B4細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞、Ketr3細(xì)胞
NCI-H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.28細(xì)胞、KNS42細(xì)胞、HEK;293細(xì)胞
T-ALL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS(4;11)細(xì)胞、HFE-145細(xì)胞、SKMel-5細(xì)胞
Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞
AML-193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU878細(xì)胞、KYSE 30細(xì)胞、Kelly細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
NT2-D1 Cell:人畸胎瘤細(xì)胞系
P3 88 D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC-14細(xì)胞、SF-539 BT細(xì)胞、MES13細(xì)胞
SC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1105細(xì)胞、3AO細(xì)胞、RH30SJ細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
COLO 829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F81細(xì)胞、Swiss3T3細(xì)胞、SK-UT-1細(xì)胞
LSC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1703細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
RPMI-8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuperTube細(xì)胞、ABE8.1/2細(xì)胞、HDMEC細(xì)胞
PCI:SG-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細(xì)胞、Hs 27細(xì)胞、Hs 706.T細(xì)胞
PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、SAOS 2細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞
AD-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
NPC-TW-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細(xì)胞、OV433細(xì)胞、LWnt3A細(xì)胞
BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCK-8細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞、CTV-1細(xì)胞
SKml2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/X63-Ag8細(xì)胞、C-32細(xì)胞、MOLM16細(xì)胞
SUM-190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-F1細(xì)胞、Calu-1細(xì)胞、CWR22-R1細(xì)胞
NCI-H102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細(xì)胞、B/C3T3細(xì)胞、WIL2 S細(xì)胞
NCI-460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL12T細(xì)胞、GFP-Olig2細(xì)胞、MKN-7細(xì)胞
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
QGY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-1112sk細(xì)胞、IPLB-SF-21細(xì)胞、HCC-4006細(xì)胞
HUASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC11細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞、hTERT-HME1細(xì)胞
P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞
HCT FET細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLAN5T細(xì)胞、MDCK supertube細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞
Hs-675-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞
B16F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞、NB1RGB細(xì)胞
N9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KB細(xì)胞、KU-812-F細(xì)胞、HT144mel細(xì)胞
SKNO1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175VII細(xì)胞、HCC-1937細(xì)胞、CT26細(xì)胞
SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
SNB-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP1細(xì)胞、CCD18細(xì)胞、SKOV3細(xì)胞
LNT-229細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1435細(xì)胞、MAVER-1細(xì)胞、C-33A細(xì)胞
Hs 445細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OP9細(xì)胞、TK.10細(xì)胞、H-1963細(xì)胞
T 84細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC83細(xì)胞、Strain L-929細(xì)胞、BCP1細(xì)胞
OCI-LY-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO007細(xì)胞、NCI-H2591細(xì)胞、HOP-62細(xì)胞
MAVER-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML-193細(xì)胞、NCI-H2170細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞
HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞
H-520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGP-1細(xì)胞、UPCI-SCC090細(xì)胞、CPAE細(xì)胞
MRASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tohoku Hospital Pediatrics-1細(xì)胞、EC9706細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
RPMI8226/S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFL-1細(xì)胞、SMA-560細(xì)胞、BEL7404細(xì)胞
NT2-D1 Cell:人畸胎瘤細(xì)胞系
Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞
SK ES 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN45細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞、NCI-H1385細(xì)胞
LMTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞、MOLM-13細(xì)胞
RKOAS451細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、H-2141細(xì)胞、H-820細(xì)胞
HuO9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1990細(xì)胞、MDA-436細(xì)胞、BT.549細(xì)胞
PT-K75細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KBM5細(xì)胞、NCIH548細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞
NCI-H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gerner 7666細(xì)胞、HS-68細(xì)胞、B35細(xì)胞
SK.MEL.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞、PLA801C細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
CD-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16 melanoma F10細(xì)胞、H-157細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞
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