"RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
AtT-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1436細(xì)胞、HConEpic細(xì)胞、A-253細(xì)胞
Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞
HL-60 clone15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLOY4細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞、NIH-OVCAR-3細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存：目前，細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長(zhǎng)情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié)：細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染，大多數(shù)較難處理。那么，哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢？我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?！具`規(guī)操作】１)為節(jié)省時(shí)間，有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí)，不開紫外滅菌３０min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn)；２)器材或者溶液很久沒用，未檢測(cè)是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用；３)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈；點(diǎn)了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗(yàn)；４)不帶手套，徒手操作；５)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋，未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具，如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需１２１°C高壓滅菌２０分鐘后３７％烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面，東西太多太亂：超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱，什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)！這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面，切忌東西堆積如山，不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞！一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里，細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好，啥時(shí)候死了都不知道！【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了，并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了，首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染，如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊，那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了，得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水沒了要記得加，還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜，難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高，人多了，不確定因素多了，難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿，不扣紐扣，不戴，就容易造成細(xì)胞污染；超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí)，喜歡說話聊著做試驗(yàn)，要是還不帶口罩，里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢！
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
HCC2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL-7402細(xì)胞、CCD-33Co細(xì)胞、B16/F0細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
SCL-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細(xì)胞、LL/2(LLc1)細(xì)胞、CCFSTTG1細(xì)胞
Hs895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BMU-S1細(xì)胞、D10細(xì)胞、H1395細(xì)胞
MC-CAR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NSH細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞、BE2M17細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹：１、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在０.２５-０.５%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大，從幾分鐘到幾十分鐘不等。０.２５%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞，在３７度條件下，一般消化１-５分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液，否則影響活性。保存于-２０度。２、膠原酶。這種方法比較少，一般是用原代培養(yǎng)時(shí)，從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和，對(duì)細(xì)胞損傷較小，但是，價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。３、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在０.０２%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì)，對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意，它能顯著影響pH值，而且在弱堿性條件下才易溶。因此，配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此，消化下來的細(xì)胞要洗一遍。４、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大，但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。５、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。６、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理，我想是因細(xì)胞冷凍后收縮，從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是：對(duì)細(xì)胞損傷小，不需要中止或洗細(xì)胞，方便，不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊，又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng)，效果非常滿意。具體過程是：１、用較多的４度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以６孔板為例，加１.５ml/孔)，２、再加０.５毫升４度的PBS，靜置操作臺(tái)上，很快細(xì)胞就小片脫落，３、輕輕吹打，細(xì)胞即完全脫落，４、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
L6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO 1細(xì)胞、DU4475細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-12F細(xì)胞
OCI-Ly 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-HEP-1細(xì)胞、UCLA RO-81-A-1細(xì)胞、J 82細(xì)胞
Tu177細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT64細(xì)胞、Mhh-Call 2細(xì)胞、HPDE細(xì)胞
H-1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞
RPMI7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)-C細(xì)胞、HT144細(xì)胞、TGW-nu細(xì)胞
Namalwa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A 253細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
CWR22Rv1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2110細(xì)胞、Det 562細(xì)胞、HME-1細(xì)胞
DV90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04 (HLE)細(xì)胞、RenCa細(xì)胞、373 MG細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細(xì)胞、UACC-812細(xì)胞、D-324 Med細(xì)胞
NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞
LC2/Ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM1細(xì)胞、McG-1細(xì)胞、Hep II細(xì)胞
Colo-678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SupB15WT細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
EC-GI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV-3細(xì)胞、PK13細(xì)胞、293-GP細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
MNNGHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC1細(xì)胞、V 79細(xì)胞、H28細(xì)胞
Hs-729-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI8226細(xì)胞、OCILY-10細(xì)胞、MM96L細(xì)胞
SGC-7901/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoTr細(xì)胞、DHL5細(xì)胞、LLCPK1細(xì)胞
VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞
SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-44細(xì)胞、SK UT 1細(xì)胞、TE-1細(xì)胞
L5178Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞、J774.A1細(xì)胞、PL-5細(xì)胞
HEK-A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTPA細(xì)胞、VAESBJ細(xì)胞、NCIH747細(xì)胞
SDBMSC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：hSCC-25細(xì)胞、HSAS4細(xì)胞、VMM39細(xì)胞
J774A.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D:cl3細(xì)胞、UCLA-SO-14細(xì)胞、U-138-MG細(xì)胞
VMRC-LCD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細(xì)胞、NBL-S細(xì)胞、NCI-H1522細(xì)胞
Pro-Lec1.3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3 clone A31細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞、NCI-H1770細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
CTLL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KU-19-19細(xì)胞、SLMT-1細(xì)胞、MC9細(xì)胞
HEL92.1.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLMEC細(xì)胞、MDA157細(xì)胞、GM05372細(xì)胞
SCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞、4175細(xì)胞、TFK-1細(xì)胞
SNU398細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：G 401細(xì)胞、SKUT-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)-C細(xì)胞
HEC-1B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPB/ALL細(xì)胞、SW-982細(xì)胞、H226細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
YES-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H889細(xì)胞、OCI-LY-18細(xì)胞、BNL 1MEA.7R.1細(xì)胞
AC29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1-B細(xì)胞、H8細(xì)胞、GM3190細(xì)胞
SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
NCIH841細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C33-A細(xì)胞、HARAB細(xì)胞、NCI-SNU-761細(xì)胞
Jurkat FHCRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-1395細(xì)胞、KMY1022細(xì)胞、SNK6細(xì)胞
P-36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT_116細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞
526-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MMAc-Serum Free細(xì)胞、LLC-MK2細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞
SUP-T1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-2a細(xì)胞、A-431細(xì)胞、SN12C細(xì)胞
Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞
B6Tert-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-0細(xì)胞、EL4細(xì)胞、SNT8細(xì)胞
H341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MTEC1細(xì)胞、Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細(xì)胞、MDAMB435細(xì)胞
751-NA-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA-560細(xì)胞、SW 480細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞
GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HONE-1細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞、H735細(xì)胞
RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞
HFL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tregs細(xì)胞、HT1376細(xì)胞、H-295細(xì)胞
RKO-E6 Cell:人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系
H22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE 70細(xì)胞、Y3Ag1.2.3細(xì)胞、Glioma 261細(xì)胞
Ku812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK-2/E6E7細(xì)胞、HTh 74細(xì)胞、EFM192細(xì)胞
RAW264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK MEL 5細(xì)胞、U-266細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
HT144mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB435細(xì)胞、HPAF細(xì)胞、CHL1細(xì)胞
HT clone H9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AsPC-1細(xì)胞、KU-19-19細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞
MSB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI3細(xì)胞、MC57細(xì)胞、NBL-5細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
Kit 225-K6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-F442A細(xì)胞、PIEC細(xì)胞、SK-MEL-3細(xì)胞
BEL 7402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR-8/SVneo細(xì)胞、SW403細(xì)胞、NT-2細(xì)胞
MDAMB361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-6細(xì)胞、SW1783細(xì)胞、HT1080細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞
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