"F81 Cell:貓腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:腎;自發(fā)永生;雌性
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
CEM-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:33604細胞、NCIH1341細胞、NB1-RGB細胞
TE-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NGEC細胞、SK-N-BE(2)-C細胞、SUPB-15細胞
769-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細胞、MA 104細胞、RBE細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
F81 Cell:貓腎細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認(rèn)為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MHCC 97-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIT-1細胞、SW-626細胞、16HBEo-細胞
HO1-N1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細胞、Dakiki細胞、YH-13細胞
BT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-460細胞、NE-4C細胞、NCI-H2122細胞
HSC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1105細胞、mIMCD-3細胞、NSH細胞
NCI H508細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB9細胞、NK-92.05細胞、J45.01細胞
細胞生長特性:貼壁
F81 Cell:貓腎細胞系
正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
GTL 16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細胞、UPCISCC154細胞、MDAMB436細胞
L-Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞
GBC-SD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Alexander細胞、Hx-147細胞、PL5細胞
B16 BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細胞、HeLa/S3細胞、Jurkat-77細胞
SUM 102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細胞、ID8/MOSEC細胞、NFS60細胞
RL-65細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266S細胞、MNNG-HOS (Cl#5)細胞、MDA468細胞
F81 Cell:貓腎細胞系
U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞
C3H10T1-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-1細胞、BT 325細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞
RCCJF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-1細胞、UMUC1細胞、CLONE M3細胞
BT-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos (RA 1)細胞、H-1694細胞、MC-4細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞、Okayama University Medical School-23細胞、FHL124細胞
RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞
NSI/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞
Mouse INsulinoma 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
Vero E-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML4細胞、T84細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞
Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4B細胞、KATO III細胞、GFP-Olig2細胞
BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
211H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Gejiu Lung Carcinoma-82細胞、TO175T細胞、HSC 3細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
U-2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
MILE SVEN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細胞、HuH7細胞、IFRS1細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞
MADB-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS Clone F-5細胞、MUTZ-1細胞、Caov-3細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
NCI-H1355細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1618細胞、COLO-1細胞、T 24細胞
PY8119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-165細胞、LN382細胞、BC-022細胞
MCF12F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hs 68細胞、MGc80-3細胞、TM4細胞
QGY-7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 93細胞、CAL 12T細胞、U20S細胞
IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞
QG56細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞
8402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
IGR-OV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1734細胞、EMT6細胞、MFD-1細胞
H.Ep.-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-886細胞、PLA802細胞、BT-B細胞
Tj-905細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GH 3細胞、COLO678細胞、mousepodocyte細胞
SUDHL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92-MI細胞、ARO81-1細胞、NCIH146細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
U2-OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:bEnd3細胞、SK-RC-52細胞、OAW-42細胞
CC-LP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2279細胞、TE-11細胞、HEC1B細胞
ML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細胞、H-526細胞、SGC996細胞
GM04679細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-2細胞、CO115細胞、SK-RC-42細胞
RCC-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細胞、OCI-Ly 18細胞、NCIH1355細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品:746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
KMH2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、3T3 Swiss Albino細胞、HCC-94細胞
F81 Cell:貓腎細胞系
MMAc.SF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細胞、NCIH2452細胞、CDC/EU.HMEC-1細胞
KHYG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3細胞、GM00346細胞、BALB 3T3 clone A31細胞
PIEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-SH-SY5Y細胞、GC-1 spg細胞、WiDr-TC細胞
GM05372細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J 774A.1細胞、HF-91細胞、FaDu細胞
QBC939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA-19細胞、TE9細胞、C518細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH 7777細胞、2780CP細胞、NRK-52E細胞
FF-WT-BJ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
SK-NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-362細胞、Hs 739.T細胞、RPMI-1846細胞
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