"MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：該細(xì)胞是從克隆的但是表型各異的MC３T３-E１細(xì)胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養(yǎng)基生長的成骨細(xì)胞中選擇高或低成骨細(xì)胞分化、礦化的亞克隆。 MC３T３亞克?。矗ˋTCC CRL-２５９３）和MC３T３亞克?。保矗ˋTCC CRL-２５９４）在抗壞血酸和３到４mM無機(jī)鹽中生長表現(xiàn)出高水平的成骨細(xì)胞分化。 它們１０天后形成一個(gè)礦化良好的細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）。MC３T３亞克?。玻矗ˋTCC CRL-２５９４）和MC３T３亞克?。常埃ˋTCC CRL-２５９６）在抗壞血酸中生長表現(xiàn)出很差的成骨細(xì)胞分化
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻模〖?xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細(xì)胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Centre Antoine Lacassagne-33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Det. 562細(xì)胞、MV522細(xì)胞、MAC1細(xì)胞
H-2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS-11細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞、JJN-3細(xì)胞
SMMC-7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD841CoN細(xì)胞、NCIH1651細(xì)胞、L Wnt-3A細(xì)胞
GM03569細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA NPA-87-1細(xì)胞、NCIH3255細(xì)胞、BV2細(xì)胞
Vero from pool #76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-3細(xì)胞、DoTc2 4510細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
NCIH2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：16-HBE細(xì)胞、CFPAC1細(xì)胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細(xì)胞
143BTK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9細(xì)胞、NCIH1770細(xì)胞、HCEC細(xì)胞
Med 341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：373MG細(xì)胞、HG2855細(xì)胞、U-87 MG細(xì)胞
SJRH 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H498細(xì)胞、GA-10(Clone 4)細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞
H-2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細(xì)胞、VCaP細(xì)胞、Be Wo細(xì)胞
JROECL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOCF細(xì)胞、BHK細(xì)胞、C3H10T1/2CL8細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
MC-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CESS細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞
KYSE 410細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR7530細(xì)胞、Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、786.O細(xì)胞
Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞
H2342細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGE細(xì)胞、3AA細(xì)胞、MC 3T3-E1細(xì)胞
JM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI No. 1846細(xì)胞、Clone Y-1細(xì)胞、H7721細(xì)胞
COC1/CDDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA RO-81A-1細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞
GCT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL-3A細(xì)胞、M1細(xì)胞、EFM-192B細(xì)胞
VSC4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCH-1細(xì)胞、KE-37細(xì)胞、118 MG細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
hTERT-HME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-673細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞、NL-20細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
RetroPack PT67細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞
NIH-3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TM-4細(xì)胞、CAL-85-1細(xì)胞、HA1800細(xì)胞
U14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IFRS1細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞、H-1838細(xì)胞
Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞
MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
MRC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1155細(xì)胞、Hep-3B細(xì)胞、SNU-C2A細(xì)胞
OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞
Me Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB453細(xì)胞、SUM 159PT細(xì)胞、SW 1417細(xì)胞
H2066細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H889細(xì)胞、T-84細(xì)胞、PLA802細(xì)胞
KYSE450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM 6細(xì)胞、HEK293FT細(xì)胞、KMBC細(xì)胞
3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞
LS174T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Lung-65細(xì)胞、Ra #1細(xì)胞、P3/X63/Ag8細(xì)胞
VMM39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A498細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞、KCL22細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
RBVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML2細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞
H-1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC-10細(xì)胞、Swiss 3T6細(xì)胞、SCC-25細(xì)胞
WM 239A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164 TC細(xì)胞、NCI-H1672細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞
CHP212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTV1細(xì)胞、T-98細(xì)胞、Farage Original Line細(xì)胞
NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞
MLE12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KATO 3細(xì)胞、Hs 606.T細(xì)胞、SK-ES1細(xì)胞
Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHEE細(xì)胞、NCI-H660細(xì)胞、NS-1-Ag4-1細(xì)胞
OCI-Ly 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32Dc3細(xì)胞、LA 4細(xì)胞、SR-786細(xì)胞
H-524細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRA01/04細(xì)胞、FC33細(xì)胞、Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞
OCI-AML-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-294T細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞、UMUC3細(xì)胞
ND7/23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BA/F3細(xì)胞、LN229細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞
NCIH522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa16C細(xì)胞、CAL 120細(xì)胞、OVCAR433細(xì)胞
COLO 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細(xì)胞、SUM 102PT細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
AMC-HN8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746T細(xì)胞、LTEP-a-2細(xì)胞、PC3M細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
TMK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC細(xì)胞、NCIH1819細(xì)胞、RSC-96細(xì)胞
Strain L-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LED-WiDr細(xì)胞、H1915細(xì)胞、MT-4細(xì)胞
HEK 293-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TR 146細(xì)胞、Chang liver細(xì)胞、RPMI No. 1846細(xì)胞
ZR-75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細(xì)胞、SiHa細(xì)胞、EAC-E2G8細(xì)胞
HCC-1171細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-10A細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞、FDC-P1細(xì)胞
EU-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細(xì)胞、ZYM-DIEC02細(xì)胞、HEK-293F細(xì)胞
AR41P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW527細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞、EC-GI-10細(xì)胞
SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞
NCI-H2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-7/ADR-RES細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞、K422細(xì)胞
PATU-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHZ-88細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞、SW620細(xì)胞
MV4;11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed Human Liver Epithelial-2細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞、L 428細(xì)胞
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關(guān)鍵字： MC3T3-E1 Subclone 14 Cell:小鼠顱頂前骨細(xì)胞系
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