"U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：U-２５１ MG分離至一位患者的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤組織。
MA-782細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKT細(xì)胞、AR41P細(xì)胞、UCLA SO M14細(xì)胞
W256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC細(xì)胞、SNU-739細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞
RN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC-4細(xì)胞、4T1細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細(xì)胞都是要成片生長的，尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞，單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話，傳代后細(xì)胞是不能貼壁的，這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以，消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài)，這個(gè)啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè)，因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開，受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-２細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長到７０%左右的時(shí)候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞，你在洗的時(shí)候如果是用無血清１６４０去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多，還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn)：傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時(shí)間，等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時(shí)間，不能時(shí)間太過了，要不然損傷細(xì)胞，細(xì)胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候，或者臨時(shí)沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候，它就會(huì)停止生長，及時(shí)傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí)，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NCI-H2030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、H-2591細(xì)胞、BIU-87/Adr細(xì)胞
SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞
H-64細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細(xì)胞、RDES細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞
PK 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB1細(xì)胞、HCC95細(xì)胞、Panc 3.27細(xì)胞
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁
U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時(shí)，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時(shí)更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時(shí)，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時(shí)，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時(shí)，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：成纖維細(xì)胞樣
HEC-251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17346細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞、MDA-MB361細(xì)胞
PC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞
LS 1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞、LY細(xì)胞、OVCA 433細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
KYSE180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSC-96細(xì)胞、SU4細(xì)胞、JROECL21細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
RCC23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 929細(xì)胞、BHK-21細(xì)胞、HCC-1438細(xì)胞
SNT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD33Co細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞、HP615細(xì)胞
LL/2 (LLC1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa229細(xì)胞、ROS 17/2.8細(xì)胞、LAN6細(xì)胞
MiaPaCa-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TW-039細(xì)胞、FET細(xì)胞、Potorous tridactylus Kidney 1細(xì)胞
HOS (TE85)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-IIE-C3細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞、PANC-08-13細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
MSTO211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NFS-60細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
P3-X63-Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo-678細(xì)胞、Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞
HTR-8/SV neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BDCM細(xì)胞、RMa-bm細(xì)胞、NCI-H747細(xì)胞
EFM192細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL8細(xì)胞、Hs 578.Bst細(xì)胞、G-292, clone A141B1細(xì)胞
NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞
IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞
UCW 100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT 1細(xì)胞、SW839細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞
Colo320細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC/PRF/5細(xì)胞、RBL-I細(xì)胞、TERT-RPE1細(xì)胞
Panc5.04細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細(xì)胞、H2342細(xì)胞、TOV21細(xì)胞
THP-1(ATCC)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J.E6-1細(xì)胞、BLO-11細(xì)胞、Vero 76細(xì)胞
MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞
M109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JAR細(xì)胞、RGC5細(xì)胞、Hs895.T細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
H1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HM細(xì)胞、C32 [Human melanoma]細(xì)胞、NCIH526細(xì)胞
H2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL27細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞、Hs 274細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
CAL-51細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 164細(xì)胞、HMVEC細(xì)胞、MC3T3細(xì)胞
LLC PK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U20S細(xì)胞、LTEP-s細(xì)胞、JTC-28細(xì)胞
KNS-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1876細(xì)胞、RS1細(xì)胞、BRL 3A細(xì)胞
NB-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LYR細(xì)胞、HEM細(xì)胞、HEK-AD 293細(xì)胞
QGP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞、JB6 Cl 30細(xì)胞
J-774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細(xì)胞、A9細(xì)胞、Rat-1細(xì)胞
A-431細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL95-2細(xì)胞、Raji細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞
NSC34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera 2/cl.D1細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞、LC1-Sq細(xì)胞
ST2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：R D細(xì)胞、RS4:11細(xì)胞、Hs675細(xì)胞
SKN-AS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1238細(xì)胞、Glioma-261細(xì)胞、Earle's L cells細(xì)胞
159 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2細(xì)胞、H526細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞
HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H82細(xì)胞、H676B細(xì)胞、Mink細(xì)胞
NCI-H716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM 637細(xì)胞、NT2-D1細(xì)胞、PK13細(xì)胞
HCC 2185細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1930細(xì)胞、P3X63Ag8-6-5-3細(xì)胞、N2a細(xì)胞
Institute for Medical Research-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CACO2細(xì)胞、NCIH2009細(xì)胞、NCI-H322T細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
PBMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細(xì)胞、LLC-MK-2細(xì)胞、526-mel細(xì)胞
P388.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP1細(xì)胞、BT 549細(xì)胞、U-87MG ATCC細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞
HSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-578-T細(xì)胞、EPC細(xì)胞、MPC-11細(xì)胞
YH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NL-20細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、NCIH596細(xì)胞
HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞
SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞
CCD19-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCD-MLA-144細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞、AAV-293細(xì)胞
Z-138細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H838細(xì)胞、LNCaP-FGC細(xì)胞、D283 Med細(xì)胞
SF 767細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSUpr1細(xì)胞、ESC細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞
NW38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1648細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞、NTERA2-D1細(xì)胞
TC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細(xì)胞、LC2/Ad細(xì)胞、A-72細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H9c2 (2-1)細(xì)胞、ES-2細(xì)胞、KYSE520細(xì)胞
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關(guān)鍵字： U-251MG Cell:人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系
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