"MDCK Cell:犬腎細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關文獻介紹
NHLF細胞系相關產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
GM346細胞系相關產(chǎn)品：LN 229細胞、HS-766-T細胞、NCI-H2286細胞
DF1細胞系相關產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞
TSCC1細胞系相關產(chǎn)品：SW-756細胞、M4e細胞、HuP-T4細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MDCK Cell:犬腎細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
培養(yǎng)細胞真的不難，最關鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCI-H2405細胞系相關產(chǎn)品：MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞
ANA1細胞系相關產(chǎn)品：C-127細胞、KBM7細胞、H-2081細胞
MKN74細胞系相關產(chǎn)品：AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
HUVSMC細胞系相關產(chǎn)品：H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
UWB1-289細胞系相關產(chǎn)品：A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞
細胞生長特性：貼壁生長
MDCK Cell:犬腎細胞系
細胞復蘇相關注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
OVCA 432細胞系相關產(chǎn)品：YES2細胞、NT-2細胞、HOC細胞
HN4細胞系相關產(chǎn)品：LA4細胞、MDA361細胞、H-1618細胞
MV-4-11細胞系相關產(chǎn)品：OCILY-3細胞、SPC-A1細胞、UACC-893細胞
NCIH2081細胞系相關產(chǎn)品：74Int細胞、HPAFII細胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細胞
M3 Clone M-3細胞系相關產(chǎn)品：HMy2.CIR細胞、HN-6細胞、T/G HA-VSMC細胞
HS-294-T細胞系相關產(chǎn)品：HSAEC1-KT細胞、TC-1[JHU-1]細胞、TALL1細胞
Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關產(chǎn)品：NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞
MDCK Cell:犬腎細胞系
NTERA2D1細胞系相關產(chǎn)品：MARC145細胞、MGH-U3細胞、H2195細胞
SW780細胞系相關產(chǎn)品：TOV-21G細胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Vero E6細胞
P31-FUJ細胞系相關產(chǎn)品：801-D細胞、HCT 15細胞、SL-29細胞
b.End3細胞系相關產(chǎn)品：Calu 6細胞、C1498細胞、8305-C細胞
451Lu細胞系相關產(chǎn)品：NS1-1 Ag4.1細胞、RPMI No. 1846細胞、HCa/16A3-F細胞
CV-1 in Origin Simian-7細胞系相關產(chǎn)品：MCF-7/ADR細胞、U937細胞、Vero C1008細胞
LLC-MK-2細胞系相關產(chǎn)品：A-9細胞、SN12CPM6細胞、NCI-H1734細胞
Hep G2-Luc細胞系相關產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
293/EBNA-1細胞系相關產(chǎn)品：SK_N_FI細胞、Ly3細胞、U2-OS細胞
HEC-1B細胞系相關產(chǎn)品：HPB/ALL細胞、SW-982細胞、H226細胞
RH-30細胞系相關產(chǎn)品：IAR-20細胞、SK-N-BE2C細胞、CMT 93細胞
Med 341細胞系相關產(chǎn)品：373MG細胞、HG2855細胞、U-87 MG細胞
NCI-H226細胞系相關產(chǎn)品：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞、H820細胞、RA細胞
NHDF細胞系相關產(chǎn)品：CAL 33細胞、UCLA-SO-M21細胞、D341 Med細胞
Panc08.13細胞系相關產(chǎn)品：PC-3M-1E8細胞、MEL-526細胞、NIH3T3-L1細胞
SNU1040細胞系相關產(chǎn)品：16HBE14o-細胞、PLA-801D細胞、RSC 96細胞
SIRC細胞系相關產(chǎn)品：YD-15細胞、RPE-hTERT細胞、NIH 3T3細胞
P3 88 D1細胞系相關產(chǎn)品：UM-UC-14細胞、SF-539 BT細胞、MES13細胞
SJSA細胞系相關產(chǎn)品：CAL 12T細胞、MHCC-LM3細胞、Th17細胞
Hce8693細胞系相關產(chǎn)品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
N-Tera-2細胞系相關產(chǎn)品：RBL-2H3細胞、IEC 18細胞、PC-3M IE8細胞
Fetal Human Lens-124細胞系相關產(chǎn)品：bEnd.3[BEND3]細胞、A375-S2細胞、A-431細胞
U-373 MG細胞系相關產(chǎn)品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
NCIH1435細胞系相關產(chǎn)品：CHG-5細胞、293-GP細胞、JIII細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞系相關產(chǎn)品：SNU-869細胞、SK-Col-1細胞、D341細胞
H1385細胞系相關產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
HCC2108細胞系相關產(chǎn)品：BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
HCC-2185細胞系相關產(chǎn)品：hTERT RPE-1細胞、SU-DHL-8細胞、KYSE140細胞
SDBMSC細胞系相關產(chǎn)品：hSCC-25細胞、HSAS4細胞、VMM39細胞
NCIH1436細胞系相關產(chǎn)品：RD-ES細胞、NR8383細胞、HLEC細胞
PANC-1細胞系相關產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
SK 1細胞系相關產(chǎn)品：Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞
SNU520細胞系相關產(chǎn)品：H2170細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞、MPASMC細胞
Huh7.5.1細胞系相關產(chǎn)品：H716細胞、MM96L細胞、LoMeT-ccRcc細胞
G361mel細胞系相關產(chǎn)品：VP 267細胞、HCC-202細胞、HPB/ALL細胞
MM134細胞系相關產(chǎn)品：H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
JVM3細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
LCMS細胞系相關產(chǎn)品：KRC-Y細胞、Tj-905細胞、CT-26細胞
293-H細胞系相關產(chǎn)品：NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
NCI-446細胞系相關產(chǎn)品：RM1細胞、H1522細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞
C-Lu-65細胞系相關產(chǎn)品：CMT-167細胞、AU565細胞、RH7777細胞
MDCK Cell:犬腎細胞系
Hs294細胞系相關產(chǎn)品：HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞
Lymph Node Carcinoma of the prostate細胞系相關產(chǎn)品：H-1623細胞、H-719細胞、OVSAHO細胞
EBC-1/original細胞系相關產(chǎn)品：Caki-2細胞、ACC-3細胞、AN-3細胞
Anglne細胞系相關產(chǎn)品：COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞
AAV293細胞系相關產(chǎn)品：COS1細胞、MLE12細胞、NCIH2171細胞
Strain L-929細胞系相關產(chǎn)品：LED-WiDr細胞、H1915細胞、MT-4細胞
C-32細胞系相關產(chǎn)品：EST81細胞、Cloudman M3細胞、UK Pan-1細胞
CAOV4細胞系相關產(chǎn)品：G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞
H-378細胞系相關產(chǎn)品：SW839細胞、NCI-H87細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞
MESSA-DX5細胞系相關產(chǎn)品：GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞
801-D細胞系相關產(chǎn)品：IPEC1細胞、Panc02細胞、PANC0813細胞
PA-1細胞系相關產(chǎn)品：Becker細胞、VMM39細胞、DU-145細胞
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