"COLO 684 Cell:人子宮腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
NCI-SNU-407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細(xì)胞、UC-3細(xì)胞、H-2009細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
B16BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI193細(xì)胞、Rat Basophilic Leukemia-1細(xì)胞、MSF細(xì)胞
OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
COLO 684 Cell:人子宮腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀(guān)察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀(guān)察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
BT.549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞、DV90細(xì)胞
NTERA-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCMK1細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞、NCI-H378細(xì)胞
Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞
GC1-SPG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
COLO 684 Cell:人子宮腺癌細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀(guān)察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴(lài)殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
149 PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578T細(xì)胞、H-9細(xì)胞、SNU878細(xì)胞
H-2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:67NR細(xì)胞、TK10細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞
OV433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMO6細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞、RSC96細(xì)胞
MKN-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM12 SM細(xì)胞、108CC15細(xì)胞、NR-8383細(xì)胞
MH-22a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High-5細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
Hs294T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細(xì)胞、DanG細(xì)胞、J-82細(xì)胞
COLO 684 Cell:人子宮腺癌細(xì)胞系
Hs274T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1437細(xì)胞、CAOV3細(xì)胞、PC-9/S1細(xì)胞
SK-RC 39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-15細(xì)胞、HT1080細(xì)胞、NCI.H23細(xì)胞
PF382細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細(xì)胞、RWPE1細(xì)胞、PC 61 5.3細(xì)胞
H1522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細(xì)胞、AML193細(xì)胞、CTLA4Ig-24細(xì)胞
MDA-MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LoVo細(xì)胞、NCI-H727細(xì)胞、2780CP細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
MV(4;11)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC12(高分化)細(xì)胞、WISH細(xì)胞、451-LU細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
TOV-112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECGI10細(xì)胞、HEK293-H細(xì)胞、Hs68細(xì)胞
B16 melanoma F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH69細(xì)胞、OKT3細(xì)胞、EFO-27細(xì)胞
PC-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Lung Epithelial-12細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞、8226/S細(xì)胞
GM2131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT-112細(xì)胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細(xì)胞、PIEC細(xì)胞
KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞
PLB 985細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細(xì)胞、OEC33細(xì)胞、FRH-0201細(xì)胞
QSG7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT-1細(xì)胞、CCRF-SB細(xì)胞、PGBE1細(xì)胞
COR-L279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細(xì)胞、Caov-4細(xì)胞、HCC0015細(xì)胞
H1404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:He-La細(xì)胞、Hs-343-T細(xì)胞、PT-67細(xì)胞
MHHCALL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞、WM35細(xì)胞
GTL-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H35 Reuber細(xì)胞、SNG-M細(xì)胞、Colo205細(xì)胞
SK-HEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM-1細(xì)胞、MC3T3-E1細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
Hs 606細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L132細(xì)胞、NCI-H2081細(xì)胞、NTERA-2 clone D1細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
MV-4:11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159-PT細(xì)胞、FHs74 Int細(xì)胞、H-1755細(xì)胞
B16 subline B78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-2細(xì)胞、DMS-273細(xì)胞、CALU1細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
ME-1 [Human leukemia]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、U373MG細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
GA-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3-L1細(xì)胞、HIEC-6細(xì)胞、K1細(xì)胞
NH6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MonoMac6細(xì)胞、WERI細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞
L-02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細(xì)胞、H-2330細(xì)胞、ECC 12細(xì)胞
SUIT 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K562/ADR細(xì)胞、P-3J細(xì)胞、SUDHL5細(xì)胞
MALME.3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細(xì)胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細(xì)胞、SP-2細(xì)胞
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
GM03569B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1819細(xì)胞、HCC1588細(xì)胞、MOLT 3細(xì)胞
CoCL3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1355細(xì)胞、H2228細(xì)胞、T-ALL1細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
HL60細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞、Farage細(xì)胞、MDA MB 436細(xì)胞
LCLC103H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-S細(xì)胞、OAC-P4C細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
RGC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI7666細(xì)胞、RKO-AS45-1細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞
PC 61.5.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha TC1 clone 6細(xì)胞、SK-MEL-MeWo細(xì)胞、U-251-MG細(xì)胞
COLO 684 Cell:人子宮腺癌細(xì)胞系
CAL12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細(xì)胞、SEG1細(xì)胞、NCI H747細(xì)胞
Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞
UCLA-SO-M14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C22細(xì)胞、NCIH1563細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞
DoHH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRCRCZ細(xì)胞、KYSE 180細(xì)胞、H-2291細(xì)胞
Hs27F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt3A細(xì)胞、IPLB-Sf21-AE細(xì)胞、HLEpiC細(xì)胞
Hs.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞、Nb 2細(xì)胞
Farage Original Line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Van細(xì)胞、HO1N1細(xì)胞、HEL 299細(xì)胞
H-35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP 4細(xì)胞、SUDHL2細(xì)胞、BSC1細(xì)胞
SKNEP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細(xì)胞、BV173細(xì)胞、HT3細(xì)胞
WB-F344細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H211細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、COLO_320DM細(xì)胞
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