"WISH Cell:人羊膜細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
細(xì)胞背景資料：最初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜，但隨后通過(guò)同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析，證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的；角蛋白陽(yáng)性。
Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞
HCT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細(xì)胞、HuT 102細(xì)胞、OVCAR 8細(xì)胞
SKNDZ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：751-NA-15細(xì)胞、HCC366細(xì)胞、PFSK-1細(xì)胞
DF1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞、H838細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 14細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
WISH Cell:人羊膜細(xì)胞系
細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去，胰酶潤(rùn)洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了，說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi)）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái)，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過(guò)２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤(rùn)洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過(guò)５min，即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：４傳代，每周２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開(kāi)封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過(guò)８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無(wú)法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
RCC 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM95細(xì)胞、NCI-H1869細(xì)胞、T-84細(xì)胞
SUM190PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細(xì)胞、MLE 12細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞
PFSK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H548細(xì)胞、RAW264細(xì)胞、SUSM-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)
WISH Cell:人羊膜細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題，還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，這是一般人所注意不到的，即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題，太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過(guò)７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問(wèn)題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見(jiàn)得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
KYSE 450細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Med 283細(xì)胞、WM239細(xì)胞、SNU354細(xì)胞
H-2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori 3細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、C1R細(xì)胞
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞
Douglas Foster-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2227細(xì)胞、APRE-19細(xì)胞、NIH:OVCAR-3細(xì)胞
EC-GI-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細(xì)胞、NOR10細(xì)胞、P31FUJ細(xì)胞
NPC-TW 01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-OV-3細(xì)胞、V79-4細(xì)胞、BLO11細(xì)胞
WISH Cell:人羊膜細(xì)胞系
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
H283細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266 Bl細(xì)胞、beta TC6細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞
Alexander細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞
H4-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-624細(xì)胞、CESS細(xì)胞、THEECs細(xì)胞
HeLa/S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、NCTC1469細(xì)胞、GP-293細(xì)胞
MOLT 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676B細(xì)胞、NBLAN5T細(xì)胞、TMK-1細(xì)胞
UCLA SO M21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細(xì)胞、Mono Mac 6細(xì)胞、SF-295細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
MDA-MB-435 S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA231-LM2細(xì)胞、DHL6細(xì)胞、INS1E細(xì)胞
TOV-21G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細(xì)胞、H865細(xì)胞、SNU-251細(xì)胞
Tu 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-187細(xì)胞、769P細(xì)胞、ssMCF7細(xì)胞
CWR22-R1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細(xì)胞、MCF-7B細(xì)胞、LS-411細(xì)胞
H4IIEC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細(xì)胞、MM1-S細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞
OEC33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR-75-1細(xì)胞、HPF細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
PLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs739T細(xì)胞、RPMI-1788細(xì)胞、OVCA-432細(xì)胞
HEK AD293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-X63.Ag8.653細(xì)胞、C918細(xì)胞、SF-767細(xì)胞
H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞
SKBr3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-281-T細(xì)胞、HFTF細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞
HeLa S 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-38細(xì)胞、C2BBe 1細(xì)胞、L-363細(xì)胞
AR4IP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341 Med細(xì)胞、IEC 6細(xì)胞、SUDHL-16細(xì)胞
Capan-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-1細(xì)胞、SNU-520細(xì)胞、RPMI1846細(xì)胞
SK-MEL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細(xì)胞、HUT-28細(xì)胞、SW 403細(xì)胞
NCI-H1793細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Sol8細(xì)胞、Colo-678細(xì)胞、H-2135細(xì)胞
Wien-133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-322細(xì)胞、NL20細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞
EFO27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2171細(xì)胞、H1417細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞
NCI-H1963細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR-90細(xì)胞、MSB1細(xì)胞、OsA-CL細(xì)胞
KE37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2107細(xì)胞、J111細(xì)胞、M14細(xì)胞
SKBR-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細(xì)胞、NCIH2085細(xì)胞、RT-BM-1細(xì)胞
526 mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細(xì)胞、293-EBNA細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
Hs604T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TSCCa細(xì)胞、P3X63細(xì)胞、GA-10 clone 4細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
Panc 4.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI-3細(xì)胞、RTE細(xì)胞、NCI-H2452細(xì)胞
H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 888.Lu細(xì)胞、H-2122細(xì)胞、LA795細(xì)胞
A2780/Taxol細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT112細(xì)胞、OVMANA細(xì)胞、HSC/mHSC細(xì)胞
H378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 8994細(xì)胞、H-929細(xì)胞、293H細(xì)胞
PANC0813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293c18細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞、BRL-3A細(xì)胞
SW837細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC 5細(xì)胞、293AD細(xì)胞、EBC-1細(xì)胞
H-716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細(xì)胞、KYSE140細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞
SACC-83細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細(xì)胞、SGC996細(xì)胞、HCC-38細(xì)胞
PANC-10-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-878細(xì)胞、TGBC11TKB細(xì)胞、B16 BL6細(xì)胞
EJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa-RG細(xì)胞、SNT8細(xì)胞、CORL105細(xì)胞
WISH Cell:人羊膜細(xì)胞系
U-87 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAC細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞、ST 486細(xì)胞
BT 20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-460細(xì)胞、NE-4C細(xì)胞、NCI-H2122細(xì)胞
TSCC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-756細(xì)胞、M4e細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞
VM-CUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細(xì)胞、MSCs（mUCMSCs）細(xì)胞、SW-948細(xì)胞
HNEpC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat-77細(xì)胞、M-NFS-60細(xì)胞、C4-I細(xì)胞
NCI-SNU-761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：293細(xì)胞、KM12細(xì)胞、SNU-182細(xì)胞
HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞
CAKI 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細(xì)胞、MILE SVEN1細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞
OCI AML5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1693細(xì)胞、Hs-688A-T細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞
Ramos 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBE 135-E6/E7細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞、Sc-1細(xì)胞
HEK 293 EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rca-B細(xì)胞、Hs 683.T細(xì)胞、CHL-CL-11細(xì)胞
GP2-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AM38細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞
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