"SNU-354 Cell:人肝癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
NHLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：149PT細胞、A-1847細胞、Anglne細胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729T細胞、BMU-S1細胞、Rca-B細胞
SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
SNU-354 Cell:人肝癌細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
LTEP-sm細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H146細胞、293/EBNA細胞、HFL-I細胞
SKNAS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNK-6細胞、Super Tube細胞、NIH:OVCAR4細胞
Detroit562細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NALM-6細胞、OE-33細胞、UCD-MLA-144細胞
NCIH441細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASH-3細胞、HA細胞、A-204細胞
NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
細胞生長特性：貼壁生長
SNU-354 Cell:人肝癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
Chinese Hamster Lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1568細胞、PNT1-a細胞、COLO-320-DM細胞
293 EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu 3細胞、SUM159細胞、B 95-8細胞
mIMCD3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-023細胞、CEM C7細胞、CNE-1細胞
HCT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H-295細胞、CNE1細胞、SK.MEL.28細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
HEK293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK62a細胞、Panc 4.03細胞、L-540細胞
MDA-MB231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SF-126細胞、NCI-H1184細胞、TW-039細胞
SNU-354 Cell:人肝癌細胞系
OK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y3-Ag123細胞、C-8161細胞、KU 812細胞
HKBML細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
HCC-78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H358細胞、RPMC細胞、L-Wnt-3A細胞
FU-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCl-H157細胞、MAD109細胞、Hs819T細胞
HepG2-luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNO1細胞、TE 671細胞、NRK clone 49F細胞
H8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-354細胞、HCC-78細胞、Jurkat Clone E6-1細胞
SW 48細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCe-8693細胞、MFHL-2細胞、Detroit-562細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
TC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMBC細胞、LC2/Ad細胞、A-72細胞
OVCAR5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞
MDAMB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-1990細胞、UMR-106細胞、SJRH-30細胞
PC-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-13細胞、P3X63NS1細胞、KM933細胞
SUP T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-325細胞、MT-2細胞、SKNF1細胞
Rat 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
RFL 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT 325細胞、HEC1-A細胞、SUM52細胞
SU-DH-L5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61細胞、RetroPack PT67細胞、EBTr細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
H-820細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-3M IE8細胞、HNE-2細胞、Onda 11細胞
SK_N_BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSTO-211 H細胞、NCI-H865細胞、NCIH2126細胞
MDCKII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H774細胞、EoL-1-cell細胞、HCE細胞
Nb 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3F442A細胞、A-549細胞、G401細胞
ZR-75-30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EBC-1/original細胞、SiHa細胞、EAC-E2G8細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
LC-2 ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17.2細胞、IMR-32細胞、SMA 560細胞
IMR90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Natural Killer-92細胞、Line 522細胞、COLO684細胞
HEP-3B2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CNE-2Z細胞、OCLY8細胞、KMM-1細胞
Doubling time: ~50 hours (ATCC).細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV1/P細胞、HFL細胞、RBSMC細胞
H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
AN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U373MG細胞、COLO 320細胞、HCM細胞
U251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3AO細胞、Cattle chondrocytes細胞、MCF10A細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
H-1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-3細胞、MLMEC細胞、CPA47細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
SW-1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat FHCRC細胞、NCI-H889細胞、JURKAT E-6.1細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
SNU-354 Cell:人肝癌細胞系
EST50細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-1095Sk細胞、GLRK 13細胞、SKES1細胞
MDAPC2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M07e細胞、H2106細胞、SF539細胞
mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
KMY1022細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCILY-19細胞、CT26.CL25細胞、HCC0095細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
OCLY8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PF-382細胞、Hs940T細胞、U251MG細胞
M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1385細胞、RKO細胞、SKCO 1細胞
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
D407細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR-3細胞、IB-RS-2細胞、Panc5.04細胞
X63-AG 8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-5細胞、OVCAR433細胞、H-157細胞
Earles's cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC3 H1細胞、FL83B細胞、HLEC-B3細胞
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