"NeHepLxHT Cell:人正常干細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
FD-LSC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DI-TNC1細胞、DK-MG細胞、C127細胞
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
NeHepLxHT Cell:人正常干細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：５-１：１０傳代，每周換液２-３次
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SW839細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RC-2細胞、Kit 225 K6細胞、SNU182細胞
526mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1(C4)細胞、RPMI7951細胞、HD11細胞
Bac1 2F5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：X63Ag8.653細胞、PanC1細胞、Hu-P-T4細胞
EBC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCMEC細胞、Institute for Medical Research-32細胞、NCI-H650細胞
SNU-216細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC97-L細胞、JVM-3細胞、M-NFS-60細胞
細胞生長特性：貼壁生長
NeHepLxHT Cell:人正常干細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：上皮樣
SK UT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU216細胞、HD11細胞、MN60細胞
U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞
SUM-52-PE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 175 VII細胞、HN13細胞、HuH1細胞
PNT1/A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1599細胞、Hs729T細胞、NRK-49F細胞
BEL7402細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Radiation Effects Research Foundation-Lung Cancer-MS細胞、2PK3細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞
CWR22R-V1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞
KU 19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bovine Turbinate細胞、NCIH2141細胞、Caco-2BBe細胞
NeHepLxHT Cell:人正常干細胞系
HCT-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB（HCF）細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
P30-OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA468細胞、KU812-F細胞、H441細胞
H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞
HIT T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細胞、DH82細胞、TCMK-1細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞
Panc3_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG13細胞、Hs 746.T細胞、SVG p12細胞
CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC9706細胞、SP2/0 Ag-14細胞、EA hy 926細胞
OVCA420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H 9細胞、MGH-U1細胞、CEM-CCRF細胞
SRA01/04 (HLE)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMO-1細胞、SBC3細胞、3-LL細胞
A431/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2135細胞、MCF12F細胞、LMTK-細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
MPC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-886細胞、NCIH1703細胞、MOLM-14細胞
SCC25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-940細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、P3-Jiyoye細胞
NCIH1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1650_CO細胞、JS1細胞、Swiss 3T6細胞
PC-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CWR-22rv1細胞、V79-GalK1細胞、JJN3細胞
MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly3細胞、HBVSMC細胞、OPM-2細胞
Farage OL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：F-36P細胞、SK-RC 52細胞、SK-MEL5細胞
YD38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-J細胞、OVCAR-8/ADR細胞、143B細胞
SK-RC-42細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LoMeT-ccRcc細胞、U87細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞
MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞
GM03190A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-253細胞、Fu97細胞、TEC細胞
AC16 [Human hybrid]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU86.86細胞、L2細胞、L23/P細胞
EJ 138細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IEC18細胞、MV(4;11)細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞
NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞
Astrocyte type I clone細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-1細胞、H2.35細胞、SHI1細胞
T-ALL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS(4;11)細胞、HFE-145細胞、SKMel-5細胞
KP4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS653細胞、F9細胞、VP229細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
U-hth74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEL-526細胞、HuT-78細胞、P3HR1細胞
H1793細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu-1細胞、SVEC 4-10細胞、SK Mel 1細胞
HNE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RINm5F細胞、TE-14細胞、AX-Mel細胞
MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：I90細胞、Clone 929細胞、SW 839細胞
KRC/Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMM5細胞、GT1-1細胞、P31/FUJ細胞
Monomac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2228細胞、Panc 10.05細胞、SUM190細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
CT26細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-EMC-SS細胞、GM03569B細胞、H-526細胞
RIN-m細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-13細胞、DMS 53細胞、BMU-S1細胞
MDBK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC10細胞、U-hth74細胞、HBZY1細胞
RBL 2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細胞、UPCI-SCC-90細胞、C4-2細胞
NeHepLxHT Cell:人正常干細胞系
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tsup-1細胞、P3X63Ag8細胞、HTori-3.1細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
A-875細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-433細胞、Helacyton gartleri細胞、MIA Paca2細胞
IOSE 80細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2330細胞、NALM-6細胞、FHC細胞
MDA157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞
S.B.細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
RKOAS451細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T2(174 x CEM.T2)細胞、H-2141細胞、H-820細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
MC-116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC3細胞、NPA87-1細胞、H-510細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
NCIH1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-JF細胞、D283細胞、SK-OV-433細胞
KMB17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Verda reno細胞、NCI-H157細胞、MC/CAR細胞
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