"AAV-293 Cell:腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:我們推薦使用AAV-293細胞株繁殖腺病毒相關(guān)重組病毒。 AAV-293源自普遍使用的 HEK293細胞株,但產(chǎn)生的病毒滴度更高。 HEK293細胞是剪切過的腺病毒5型DNA轉(zhuǎn)染的人胚腎細胞。 跟HEK293細胞一樣,AAV-293細胞反式表達腺病毒E1基因,當共轉(zhuǎn)染三個AAV助質(zhì)粒(一個含ITR的質(zhì)粒,pAAV-RC, 和E1缺失助質(zhì)粒)時,可以產(chǎn)生有感染力的腺病毒-相關(guān)病毒顆粒。
JeKo 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-2細胞、TE-8細胞、hOMF細胞
MDA-MB-175-VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1463細胞、KOSC2細胞、NB.4細胞
HRMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-90細胞、3T3-Swiss細胞、Hs852T細胞
TM-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAC-P4C細胞、HEC-1-B細胞、CCD966SK細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
AAV-293 Cell:腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BXPC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE-19細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞、H-7721細胞
PAN 02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFM-223細胞、MTEC1細胞、RAW-264.7細胞
MRC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5細胞、SW 780細胞、ST2細胞
RCK-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細胞、WC00079細胞、RPMI 7666細胞
GM3569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.NS-1/1.Ag4.1細胞、MDA-MB361細胞、KNS-81細胞
細胞生長特性:貼壁生長
AAV-293 Cell:腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
SK-MEL-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細胞、EM-3細胞、NuTu 19細胞
MCF7ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細胞、A549ATCC細胞、BrCL12細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
HT 1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細胞、Panc-327細胞、NCIH1993細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
MV 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 140細胞、CV-1.K細胞、RAW2647細胞
AAV-293 Cell:腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
CCC-HEH-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-GT-4細胞、Tn5 B1-4細胞、MESSADX5細胞
Tokyo Medical and Dental university 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細胞、HB 611細胞、FLC-7細胞
C-8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB-985細胞、BS-C-1細胞、SNU-423細胞
HBL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2-OS細胞、VSMC細胞、D324細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
CL 1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-1細胞、H-1563細胞、IBMF-7細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
CCD-841-CoN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細胞、SK MEL 28細胞、LK 2細胞
HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
TGW-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP細胞、OCI Ly10細胞、TE-85細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
SW579細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
NCI-H2081細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞
KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
SCC 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroC1008細胞、NCI-H522細胞、MV4-11細胞
M059K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NMCG1細胞、C-Lu65細胞、M07e細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
PATU-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHZ-88細胞、NCI-460細胞、SW620細胞
H-1184細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES23.5細胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細胞、MH-22a細胞
NCIH446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Medical University of Graz-Chordoma 1細胞、Ketr3細胞、HRA 19細胞
TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞
NCI H929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 159細胞、J82COT細胞、CCRF-CEM細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
Hs 888.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT細胞、PL12細胞、P3J細胞
HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞
SCC-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mREC細胞、HCC-1500細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞
MC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE-21細胞、SUDHL8細胞、HeLa S3細胞
SkChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細胞、H-146細胞、LU165細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
SNT-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E-6細胞、HPAEC細胞、HET-1A細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細胞、JHH-2細胞、Daudi細胞
AAV-293 Cell:腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞系
HMC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞
HeLa 229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2cl.D1細胞、LS 180細胞、FRTL5細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
T-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ML2細胞、Walker 256細胞、BL-6細胞
NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
NCTC clone 929細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB157細胞、SU-DHL-1細胞、CCD19Lu細胞
NSC34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTera 2/cl.D1細胞、H.Ep. #2細胞、LC1-Sq細胞
SBC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞
KBM7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3A細胞、MDA-MB-231-luc細胞、HS-766-T細胞
SHP-77細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細胞、NOR 10細胞、PANC1005細胞
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