"8505C Cell:人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
NCI-H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞
YD38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AG06814-J細(xì)胞、OVCAR-8/ADR細(xì)胞、143B細(xì)胞
TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
8505C Cell:人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學(xué)都遇到過這個問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨立開來的時候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實際情況你自己把握)。這是第四步。其實還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細(xì)胞時把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個單個的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:6傳代
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
FK81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK-10細(xì)胞、DMS53細(xì)胞、A375SM細(xì)胞
HHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322細(xì)胞、HTori3細(xì)胞、DOK細(xì)胞
NRK52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1500細(xì)胞、SK-MEL-2細(xì)胞、SKNEP1細(xì)胞
U-937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC 11細(xì)胞、JM細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
8505C Cell:人甲狀腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞
hFOB1.19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Helacyton gartleri細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞、Ramos細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
beta-TC6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCPAP細(xì)胞、TE3細(xì)胞、Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞
L23/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ETCC007細(xì)胞、Mink細(xì)胞、Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
SuperTube細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細(xì)胞、TGW-I-nu細(xì)胞、LM6細(xì)胞
8505C Cell:人甲狀腺癌細(xì)胞系
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞
HEL9217細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kato-III細(xì)胞、H1836細(xì)胞、TE 85.T細(xì)胞
GM00215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OS-RC-2細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞、OCI AML2細(xì)胞
CL-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、MGH-U3 (RN)細(xì)胞、RC13細(xì)胞
H295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mia PACA 2細(xì)胞、MM134細(xì)胞、H660細(xì)胞
GT1-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY-R細(xì)胞、BCaP 37細(xì)胞、2B4細(xì)胞
RK 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2405細(xì)胞、HNE3細(xì)胞、SNU601細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
GM15452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 343.T細(xì)胞、Human Hepatocyte Line 5細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞
WRL 68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAT2細(xì)胞、LIXC002細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞
NF639細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN74細(xì)胞、MDAPCa-2b細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞
NIH 3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR42J細(xì)胞、KYSE-150細(xì)胞、RPMI-2650細(xì)胞
Hs822T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BL6細(xì)胞、HR-1細(xì)胞、HLE細(xì)胞
Duck embryo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC12細(xì)胞、SCLC21H細(xì)胞、Sp 2817細(xì)胞
Panc813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-E6細(xì)胞、HPB-ALL細(xì)胞、SuDHL 2細(xì)胞
SW1990細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU1040細(xì)胞、CACO2細(xì)胞、C-4I細(xì)胞
COV434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SRS-82細(xì)胞、NWA細(xì)胞、FL83B細(xì)胞
A-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB468細(xì)胞、HCC1937細(xì)胞、P30-OHK細(xì)胞
RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞
B16F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細(xì)胞、IPLB-Sf21細(xì)胞、BALB/3T3 cl. A31細(xì)胞
MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞
NCCIT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-929細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞
C6661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細(xì)胞、THLE-3細(xì)胞、NS1細(xì)胞
TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞
SU-DHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞
HK-2 [Human kidney]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞、KBM-7/Hap8細(xì)胞、H-522細(xì)胞
KTCTL-140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C518細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞、H-1954細(xì)胞
Rh30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細(xì)胞、Ramos.G6.C10細(xì)胞、JM-Jurkat細(xì)胞
HLCL9B10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細(xì)胞、8402細(xì)胞、BSC40細(xì)胞
Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞
RPMI8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TERT-RPE1細(xì)胞、PLA801-95C細(xì)胞、LIPF178C細(xì)胞
Caov-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BLO 11細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞、SUM-52細(xì)胞
SW579細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human ErythroLeukemia細(xì)胞、HS766T細(xì)胞、Ej138細(xì)胞
QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
G-Olig2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1-2細(xì)胞、SNUC1細(xì)胞、Calu 6細(xì)胞
PK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA PaCa-2細(xì)胞、MM1S細(xì)胞、BEAS-2B細(xì)胞
OCI-AML-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PSN1細(xì)胞、DMS79細(xì)胞、KLE細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞
B16BL-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞、H1755細(xì)胞
Clone Y1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23/P細(xì)胞、RPE1-hTERT細(xì)胞、H1876細(xì)胞
8505C Cell:人甲狀腺癌細(xì)胞系
NKM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細(xì)胞、SCL-1細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞
HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
H-929細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞、ZR751細(xì)胞、NCI-H661細(xì)胞
NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞
A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞
MUG-Chor1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv1.Lu細(xì)胞、L細(xì)胞、SW 1783細(xì)胞
hADSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLONE M3細(xì)胞、MESSA Dx5細(xì)胞、J82COT細(xì)胞
MPC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2OS細(xì)胞、SJSA細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞
SCC-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ls-174-T細(xì)胞、TU 686細(xì)胞、A2780/CP70細(xì)胞
H-1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-2細(xì)胞、BE(2)M-17細(xì)胞、HCC1428細(xì)胞
OVMANA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細(xì)胞、LIXC-002細(xì)胞、PA317細(xì)胞
HeLa S3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H82細(xì)胞、GM04154B細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
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