"SK-MEL-24 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞
DiFi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL10細(xì)胞、MLM細(xì)胞、8305C細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
TGHAVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC70細(xì)胞、Hs839.T細(xì)胞、Raji細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SK-MEL-24 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。
細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長不宜超過72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞
DLD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞、LS1034細(xì)胞
HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞
RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞
RPMI-6666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG3A細(xì)胞、MC-116細(xì)胞、Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
SK-MEL-24 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對腫瘤細(xì)胞來說,這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過有人說EDTA對細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞!
細(xì)胞形態(tài)特性:星形的
SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞
KBM-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞
SNU-484細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T.T細(xì)胞、KTC-1細(xì)胞、EBNA293細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細(xì)胞、526mel細(xì)胞、Lung cancer-1/squamous細(xì)胞
MSF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細(xì)胞、U87-MG細(xì)胞、Panc 10.05細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
RPE D407細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115F細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞、SW-480細(xì)胞
SK-MEL-24 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG/HOS細(xì)胞、AD293細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞
STC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-686細(xì)胞、P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、NIH/3T3細(xì)胞
PC615.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC827細(xì)胞、LIM1215細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞
Metastatic Variant-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2291細(xì)胞、GH 3細(xì)胞、Granta 519細(xì)胞
MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞
A-204細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 205細(xì)胞、P31/FUJ細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞
BAR-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293F細(xì)胞、H22-H8D8細(xì)胞、CWR-22rv1細(xì)胞
U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
RFL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞、COLO 738細(xì)胞
HP615細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 8.13細(xì)胞、HPASMC細(xì)胞、PIG1細(xì)胞
NCIH647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit 225-K6細(xì)胞、Tca-83細(xì)胞、CX1細(xì)胞
BrCL18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUTZ3細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞、VK-2/E6E7細(xì)胞
BpRcl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞
CT-26 WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 697細(xì)胞、CAL33細(xì)胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
CT-26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortal Pig Intestinal-2I細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞、A2780/Taxol細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
COLO-320-DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GEO細(xì)胞、KYSE-520細(xì)胞、SW1353細(xì)胞
H8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-354細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞
D341MD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI-1細(xì)胞、Verda reno細(xì)胞、COLO-320-HSR細(xì)胞
MT2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-294-T細(xì)胞、BIU87細(xì)胞、DMS273細(xì)胞
GOTO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MTC-TT細(xì)胞、OV 1063細(xì)胞、KRC-Y細(xì)胞
EBTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE2細(xì)胞、SNU869細(xì)胞、TSU-Pr1細(xì)胞
MDA MB 134VI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE410細(xì)胞、DHL-4細(xì)胞、PK-136細(xì)胞
Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞
RWPE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2073細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞、TE3細(xì)胞
Emory University-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI747細(xì)胞、CHP100細(xì)胞、Capan-2細(xì)胞
H295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T173細(xì)胞、CMK細(xì)胞、KRCY細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
BNL-HCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker 256細(xì)胞、Vero細(xì)胞、QGY細(xì)胞
FCCH1024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞、Emory University-3細(xì)胞
NWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細(xì)胞、OCI AML3細(xì)胞、Natural Killer-92細(xì)胞
BTI-TN5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HASMC細(xì)胞、NTera 2/cl.D1細(xì)胞、Human Pancreatic Duct Epithelial細(xì)胞
LS-411N細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N-87細(xì)胞、H1648細(xì)胞、MESSA細(xì)胞
DoTc2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細(xì)胞、FU-OV-1細(xì)胞、MV4:11細(xì)胞
GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞
Fao細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI #8226細(xì)胞、Keio University-19-19細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞
ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞
TH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9(Hamprecht)細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、SC1細(xì)胞
FLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs68細(xì)胞、PC10細(xì)胞、SNU484細(xì)胞
OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞
PLA-801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHL124細(xì)胞、BTT739細(xì)胞、PC-3細(xì)胞
SK-MEL-24 Cell:人惡性黑色素瘤細(xì)胞系
LA-N-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細(xì)胞、B16F10細(xì)胞、CHG-5細(xì)胞
LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞
CL1-0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞、NCIADR.RES細(xì)胞、PK(15)細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、MC3T3-E細(xì)胞、HCT.116細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
PL9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-78細(xì)胞、CAKI1細(xì)胞、MDA-MB-231-GFP細(xì)胞
NCI-H510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1755細(xì)胞、BE(2)M17細(xì)胞、BI-Mel細(xì)胞
Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞
NUGC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL-2細(xì)胞、CF-1 MEF細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞
Lewis lung carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細(xì)胞、293H細(xì)胞、WERI-Rb1細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
KP-N-NS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV 1細(xì)胞、NCI-H1437細(xì)胞、H865細(xì)胞
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