"SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
3T3 clone A31細胞系相關產品:EC-109細胞、NB-4細胞、BDCM細胞
MCF/Adr細胞系相關產品:BE(2)M-17細胞、BEL-7404細胞、CCC-ESF-1細胞
SCI1細胞系相關產品:HC11 Mammary Epithelium細胞、SK-NSH細胞、PIGI細胞
HT-3細胞系相關產品:TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
細胞消化過程總結:其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質材料的附著已經消失了,細胞之間的附著也已經消失了,細胞已經獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
MDCK.2細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-10A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞、Hep G2-Luc細胞
T-T細胞系相關產品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
HNTEC細胞系相關產品:MES-SA細胞、NRK clone 52E細胞、MCM細胞
OV-1063細胞系相關產品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
NCI-H865細胞系相關產品:SU-DHL-6細胞、AZ-521細胞、SU-DHL-2細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
Rat Skin 1細胞系相關產品:UCLA SO M21細胞、B16BL-6細胞、CAL39細胞
SKOV3細胞系相關產品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞
H810細胞系相關產品:C-6細胞、L-929細胞、SW 756細胞
NCTC1469細胞系相關產品:SkChA1細胞、RL952細胞、Madison 109細胞
HPAEpiC細胞系相關產品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
HCC0070細胞系相關產品:NCIH1395細胞、TO 175.T細胞、DHL-16細胞
SW48細胞系相關產品:NCI-H2452細胞、LAN5細胞、RS4:11細胞
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
Daudi細胞系相關產品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞
RT112細胞系相關產品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞
COLO320-DM細胞系相關產品:HuO9細胞、RBMEC細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞
NCI660細胞系相關產品:87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
NCI-H1105細胞系相關產品:NCI-H1694細胞、RKO-E6細胞、Sup T-1細胞
Human Embryonic Skin細胞系相關產品:BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞
DAKIKI Clone 1細胞系相關產品:A-431細胞、766T細胞、LLC-MK-2細胞
HuTu-80細胞系相關產品:Alpha Mouse Liver 12細胞、3T3-L1 ad細胞、Vero from pool #76細胞
RPMI2650細胞系相關產品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
RPMI2650細胞系相關產品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關產品:Jeko1細胞、hEM15A細胞、Ca 9-22細胞
H-69細胞系相關產品:VK2 (E6/E7)細胞、E304細胞、NCI-H1048細胞
UK Pan-1細胞系相關產品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關產品:EB1細胞、HCE細胞、MAD109細胞
HEL-92細胞系相關產品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞
HEL細胞系相關產品:OSA細胞、MPP 89細胞、MDAMB175VII細胞
RT-4細胞系相關產品:CCRFCEM細胞、HPDE6c7細胞、ASH-3細胞
SU-DHL-6細胞系相關產品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞
NCI-H1930細胞系相關產品:TCC Sup細胞、Hs695細胞、NCI-H1793細胞
SW1353細胞系相關產品:GP293細胞、L5178Y細胞、CAL-51細胞
HRA19細胞系相關產品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
H-82細胞系相關產品:NCIH295R細胞、HEL 299細胞、PG-BE1細胞
Ca761細胞系相關產品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
NS-1細胞系相關產品:MADB 106細胞、MLOY4細胞、KYSE-140細胞
KBM-7/Hap8細胞系相關產品:HEP3B2細胞、GCT0404細胞、4T1-A細胞
EL4細胞系相關產品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
AML12細胞系相關產品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
NK-92細胞系相關產品:WPMY1細胞、CAL-62細胞、MDA-MB-361細胞
NCIH841細胞系相關產品:C33-A細胞、HARAB細胞、NCI-SNU-761細胞
J.E6-1細胞系相關產品:JROECL 33細胞、SU86_86細胞、18G3.cl 1細胞
NCIH2122細胞系相關產品:LN-382細胞、OVTOKO細胞、NCIH1581細胞
COLO-699細胞系相關產品:LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
BIU87細胞系相關產品:H2591細胞、NCI-H358細胞、HSAEC1-KT細胞
CAKI 2細胞系相關產品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞
MDCK Type II細胞系相關產品:LMH細胞、Michigan Cancer Foundation-12F細胞、HEC-1A細胞
BEAS 2B細胞系相關產品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
HuLEC-5a細胞系相關產品:AG06814-M細胞、OCI-AML-5細胞、NBLAN5T細胞
HPDE細胞系相關產品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞
Panc327細胞系相關產品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
SW 1417細胞系相關產品:OB2細胞、SKMEL1細胞、U-2 OS細胞
NALM 6細胞系相關產品:MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
RPMI No. 1846細胞系相關產品:NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
HP615細胞系相關產品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
AX-Mel細胞系相關產品:TCMK-1細胞、OCUM-1細胞、AE 1201細胞
OCI Ly1細胞系相關產品:NCIH1437細胞、P3X63 Ag8.653細胞、SUDHL-2細胞
NCI-H1781細胞系相關產品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞
CL1-5細胞系相關產品:HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細胞系相關產品:G-Olig2細胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、Wistar Institute-38細胞
NE1-E6E7細胞系相關產品:SNU668細胞、H-1105細胞、MOLT 4細胞
JIMT1細胞系相關產品:SKMel-28細胞、CL40細胞、Calu-6細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關產品:Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
RK13細胞系相關產品:CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
PC-3細胞系相關產品:Lec1細胞、C57 Mouse Tumor 93細胞、H2141細胞
NPC-TW 039細胞系相關產品:Leghorn Male Hepatoma cell line細胞、LLC PK1細胞、CAL51細胞
MDCK-II細胞系相關產品:C-Lu-65細胞、U-373-MG細胞、SKMES1細胞
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關鍵字: SRS-82 Cell:小鼠腹水瘤細胞系
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