"LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
Capan1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細胞、UWB1-289細胞、HRMC細胞
JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HOC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2073細胞、293S細胞、H1648細胞
HCC1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57細胞、UPCI-SCC-154細胞、SU86-86細胞
CMT 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
NCIH650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2 wt細胞、T 24細胞、MDA-361細胞
Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞
NSC-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMK細胞、FRhK-4細胞、SKRC 39細胞
Hs739T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 7細胞、B-cell with DC Morphology細胞、H-2171細胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fortner's melanotic melanoma #3細胞、3T3-442A細胞、HCCC9810細胞
LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
SuperTube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞
B16F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:870細胞、IPLB-Sf21細胞、BALB/3T3 cl. A31細胞
SF17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2157細胞、OCI-Ly3細胞、SK-N-BE-2細胞
293 HEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細胞、Huh 7.5細胞、Sp 2/0-Ag 14細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
V79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細胞、SW-948細胞、Tokyo Medical and Dental university 8細胞
MC3T3-L1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
WM-239細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8D1A細胞、Kit 225-K6細胞、2PK3細胞
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細胞、H-520細胞、MAVER-1細胞
SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN4細胞、CEM-0細胞、MC38細胞
Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87細胞、SNU761細胞、3396細胞
SCaBER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7703細胞、RGC6細胞、L 428細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
GC1-SPG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS-2細胞、SUM149-PT細胞、H-1048細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
MDA-MB-330細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-226AR1細胞、SNU-216細胞、HLE B-3細胞
SUM-149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞
HREC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1672細胞、J.E6-1細胞、PLC-PRF-5細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
P3HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-OV-3細胞、REC 1細胞、KMS11細胞
Ku812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VK-2/E6E7細胞、HTh 74細胞、EFM192細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
NCIH810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2126細胞、NFHIOSE-29細胞、LS513細胞
H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM0637細胞、Spodoptera frugiperda clone 9細胞、Human Epidermoid carcinoma #2細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
SW 403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL_S細胞、4T1-LUC細胞、A375細胞
NCI-H102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KHYG1細胞、B/C3T3細胞、WIL2 S細胞
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
MCF 10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL-65細胞、Tn 5B1-4細胞、ketr 3細胞
Medical Research Council cell strain-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SupT1細胞、G 292 Clone A 141B1細胞、IR983F細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
Ishikawa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C166細胞、CCD19Lu細胞、SUM-102PT細胞
Ca761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2170細胞、ST細胞、PTK 1細胞
MDA415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2135細胞、A 375細胞、HPDLF細胞
U373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE85細胞、C127細胞、CHP126細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
MSTO-211 H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1666細胞、L5178Y-R細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞
T-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22-Rv1細胞、32D clone3細胞、SBC-5細胞
NPA'87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細胞、HBZY1細胞、87 MG細胞
BE2-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/FU細胞、U-2-OS細胞、NCI-841細胞
H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞
Hs852T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA NPA871細胞、NCI-H1573細胞、KTA-7細胞
BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞
Leydig細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
MHH-CALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283MED細胞、NTERA2細胞、SG231細胞
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關(guān)鍵字: LS180 Cell:人結(jié)腸腺癌細胞系
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