"A-549 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
RPMI-7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDQP1細(xì)胞、SBC-3細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞
VP267細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19細(xì)胞、COV-434細(xì)胞、H2029細(xì)胞
Caco2-BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs729細(xì)胞、OCI-AML5細(xì)胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
A-549 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動(dòng)了，多半呈沙壯移動(dòng)，其實(shí)已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集，這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個(gè)細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個(gè)時(shí)候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個(gè)細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時(shí)間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動(dòng)，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細(xì)胞后，應(yīng)該注意什么？客戶收到細(xì)胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細(xì)胞１００X，２００X各一張)，排除細(xì)胞本身污染的情況；收到細(xì)胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過８０%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細(xì)胞多久能到，是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟龋绻麣鉁氐陀冢炊鹊?，則采用郵寄凍存細(xì)胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
H-1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞
TE-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 741細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞、SuperTube細(xì)胞
ECV-304細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：National Medical Center-Glioma 1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞、SDBMSC細(xì)胞
MCM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-36細(xì)胞、C3H 10T1/2細(xì)胞、MFE280細(xì)胞
Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細(xì)胞說明書部分
A-549 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析：總結(jié)１：復(fù)蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當(dāng)然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細(xì)胞沒問題。總結(jié)２：首先應(yīng)該懷疑凍存，實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小，因?yàn)椴僮骱唵?，而且死板。１、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個(gè)問題，太長的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會(huì)死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻，這個(gè)有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格，很多人容易忘卻這個(gè)事情，因?yàn)檫@個(gè)東西流程長。６、如果你細(xì)胞污染，你是否能很快看到，我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。７、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個(gè)概念的，所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話，這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個(gè)很重要，不能靠猜，否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題，這個(gè)見得太多了，別不當(dāng)會(huì)事。
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
NSH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：THC-8307細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞
Leukemic 1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2108細(xì)胞、H-1693細(xì)胞、Co320細(xì)胞
Ca761細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2170細(xì)胞、ST細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞
MDAMB453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-436細(xì)胞、H-1651細(xì)胞、SK-ML2細(xì)胞
16HBE140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-475細(xì)胞、LCLC-103H細(xì)胞、BTI-TN5B1-4細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
CNE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6Cl30細(xì)胞、SP-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞
A-549 Cell:人肺癌細(xì)胞系
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞
IOSE-29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEP-a-2細(xì)胞、SNU-C2B細(xì)胞、MAntle cell VERona-1細(xì)胞
RIN14B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CFSC-8B細(xì)胞、SCC-15細(xì)胞、LC-1-sq細(xì)胞
HCC-1428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL-CL.2細(xì)胞、HFL1細(xì)胞、130-T細(xì)胞
PLMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞、HTh-74細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞
COV 504細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HGBEC細(xì)胞、NCI-H520細(xì)胞、L-132細(xì)胞
TE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEF細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞、DLM8細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
NCIH1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM-451Lu細(xì)胞、HUT-125細(xì)胞、OVCAR 433細(xì)胞
BC-027細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOVAS細(xì)胞、SW 620細(xì)胞、CT-26 WT細(xì)胞
H-II-E-C3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細(xì)胞、MDCK-2細(xì)胞、NE1細(xì)胞
L M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：UT-7細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞、58F細(xì)胞
CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞、Farage OL細(xì)胞
WM 451-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC2185細(xì)胞、H-716細(xì)胞、MKN 45細(xì)胞
HT-115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.3細(xì)胞、HSMC細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞
mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞
MDAMB134細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIT.T15細(xì)胞、Panc-10.05細(xì)胞、Nittby-Salford 1細(xì)胞
HLEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tca8113細(xì)胞、AAV293細(xì)胞、DHL5細(xì)胞
HS-695T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCV29細(xì)胞、SCC 25細(xì)胞、L M (TK-)細(xì)胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
M 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細(xì)胞、NCIH187細(xì)胞、639 V細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
Hs606T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL-83B細(xì)胞、H322細(xì)胞、HCC2935細(xì)胞
BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞
MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞
LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞
COLO 738細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T 98 G細(xì)胞、Hs 688(A).T細(xì)胞、P560細(xì)胞
AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞
ARO81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C細(xì)胞、Y3-Ag1,2,3細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞
WEHI 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tn 5B1-4細(xì)胞、H1793細(xì)胞、H647細(xì)胞
Daudi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 837細(xì)胞、SK-Mel 1細(xì)胞、NKM1細(xì)胞
SLMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 428細(xì)胞、SK-N-F1細(xì)胞、HEC-1-B細(xì)胞
NCI-A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：M14-MEL細(xì)胞、AdHek細(xì)胞、U266 Bl細(xì)胞
RMG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-280細(xì)胞、NCI-H2110細(xì)胞、H82sclc細(xì)胞
SUM 159PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM02132細(xì)胞、TE-5細(xì)胞、P3-X63Ag8.653細(xì)胞
786O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI/ADR-RES細(xì)胞、NCI-H441-4細(xì)胞
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
H7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH2073細(xì)胞、PY8119細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
CCK-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H6c7細(xì)胞、MA-c細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA435細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞、C17.2細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
A-549 Cell:人肺癌細(xì)胞系
SIRC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD-15細(xì)胞、RPE-hTERT細(xì)胞、NIH 3T3細(xì)胞
COLO829細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS-695T細(xì)胞、L-02細(xì)胞、H341細(xì)胞
SCC 25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1650細(xì)胞、hESC細(xì)胞、PAN 02細(xì)胞
MHCC 97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIT-1細(xì)胞、SW-626細(xì)胞、16HBEo-細(xì)胞
M210B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細(xì)胞、NCIH358細(xì)胞、H-920細(xì)胞
MDAMB435S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caco-2/BBe 1細(xì)胞、TOV21細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞
H1648細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFSF細(xì)胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1細(xì)胞、HBE細(xì)胞
Mono Mac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-841CoN細(xì)胞、Walker-Ca.256細(xì)胞、Hs 578Bst細(xì)胞
MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞
HIT T15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SuDHL 8細(xì)胞、DH82細(xì)胞、TCMK-1細(xì)胞
C57 Mouse Tumor 93細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos(RA1)細(xì)胞、HeLa-229細(xì)胞、Sf21細(xì)胞
H2405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細(xì)胞、MSB-1細(xì)胞、PCI-4M細(xì)胞
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