"Hs 294T Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
HITT15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-1細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞、HR-1細(xì)胞
IGROV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細(xì)胞、NFHIOSE-80細(xì)胞、PA-1細(xì)胞
OK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y3-Ag123細(xì)胞、C-8161細(xì)胞、KU 812細(xì)胞
HMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H226細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞、H4細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
SkChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:REC1細(xì)胞、H-146細(xì)胞、LU165細(xì)胞
CHOK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC20細(xì)胞、R 1610細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞
YES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB175細(xì)胞、WM2664細(xì)胞、H-295R細(xì)胞
GM03573A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 5.04細(xì)胞、NOMO1細(xì)胞、LLC-PK1細(xì)胞
NCIH2135細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA-Dx5細(xì)胞、OE-21細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:混合星狀和多邊形
SF-539 BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL1細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞、RMC細(xì)胞
SMA-560細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、801-D細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
LL/2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-436細(xì)胞、TCCPAN2細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞
HOP 92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr/S細(xì)胞、624mel細(xì)胞、DI-TNC1細(xì)胞
Mv 1 Lu (NBL-7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCaP 37細(xì)胞、H-1944細(xì)胞、NCI-UMC-11細(xì)胞
RPMI 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63.Ag8.653細(xì)胞、BEAS 2B細(xì)胞、SU-DHL-4細(xì)胞
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系
H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞、NE1-E6E7細(xì)胞
MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞
HDLM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-97細(xì)胞、D407細(xì)胞、H2106細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
Mino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1-cell細(xì)胞、LM6細(xì)胞、RPMI.8226細(xì)胞
UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Kidney-2細(xì)胞、TSCCa細(xì)胞、SNU-620細(xì)胞
CAL-148細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J-Bladder-V細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞、COLO680N細(xì)胞
T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞
KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞
H1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-3細(xì)胞、SN-12C細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
Vx2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:697細(xì)胞、NCIH2196細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞
MCF7ADR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-5細(xì)胞、A549ATCC細(xì)胞、BrCL12細(xì)胞
MKN28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV112細(xì)胞、D324細(xì)胞、SKLU1細(xì)胞
H774細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IAR 20細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞
NCI-HUT-69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKUT1細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞、H596細(xì)胞
CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞
3T6-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細(xì)胞、STC-1細(xì)胞、G361細(xì)胞
TPC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-4細(xì)胞、Mono Mac 1細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞
MPASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、T-HSC細(xì)胞
HTR-8/SV-neo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T24細(xì)胞、Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H1666_DA細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
CCRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC9706細(xì)胞、SP2/0 Ag-14細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞
ST486細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK1細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞、CHP100細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
P31/Fujioka細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞、D562細(xì)胞
NOMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O細(xì)胞、CII細(xì)胞、HEK293T/17細(xì)胞
Sf21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-251_MG細(xì)胞、NHRF細(xì)胞、HT-3細(xì)胞
SF-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細(xì)胞、OCIAML2細(xì)胞、Lu-99A細(xì)胞
LNCaP.FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細(xì)胞、B10BR細(xì)胞、SW-1417細(xì)胞
RA.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞
MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞
R-1059-D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細(xì)胞、C41細(xì)胞、RBL-1細(xì)胞
OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞
VMCUB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞、PANC0403細(xì)胞
RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞
RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞
HEK (AD293)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI 38細(xì)胞、HT 1197細(xì)胞、BAEC細(xì)胞
H-810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC-42細(xì)胞、COLO-320DM細(xì)胞、H 9細(xì)胞
7860細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF II細(xì)胞、IMR90細(xì)胞、RS411細(xì)胞
H-2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori 3細(xì)胞、PANC3.27細(xì)胞、C1R細(xì)胞
NTERA2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC145細(xì)胞、MGH-U3細(xì)胞、H2195細(xì)胞
B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞
Hs 294T Cell:人黑色素瘤細(xì)胞系
P3HRI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL I細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞、MDST8細(xì)胞
LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞
MEG01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR4細(xì)胞、Hs706T細(xì)胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4細(xì)胞
B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞
MCF-12F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-741細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞、GRSL細(xì)胞
SK-RC-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT 26細(xì)胞、L 1210細(xì)胞、TE 32.T細(xì)胞
NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞
RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞
Normal Rat Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:526 mel細(xì)胞、HVSMC細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
MKN 45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hRPTC細(xì)胞、SK-MEL-2-LUC細(xì)胞、T2細(xì)胞
KMB 17細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10A細(xì)胞、KHYG-1細(xì)胞、HLE-B3細(xì)胞
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