"HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關文獻介紹
PANC-1細胞系相關產品:HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
AgC11x3A細胞系相關產品:Cloudman M3細胞、SUM 102細胞、NTera 2/cl.D1細胞
KMH2細胞系相關產品:SKNBE(2)細胞、ARIP細胞、PG-4 (S+L-)細胞
ECC-12細胞系相關產品:RCC10細胞、SCL1細胞、Lec1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關問題總結:懸浮性細胞應如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度,重復前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉速,將造成細胞死亡;細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因;細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質,并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質濾膜;冷凍保存細胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細胞欲冷凍保存時,細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術、清潔的環(huán)境、與品質良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細胞發(fā)生微生物污染時,應如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結:1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數據上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經解凍后,為何會發(fā)生細胞數目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現細胞數目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系
BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
H-35細胞系相關產品:KP 4細胞、SUDHL2細胞、BSC1細胞
OVCAR 420細胞系相關產品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
QBC-939細胞系相關產品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
OCI-AML5細胞系相關產品:JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數活細胞數,用凍存液調整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據不同的細胞類型調整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質;5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(細胞在無血清培養(yǎng)基內生長24小時)內凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數量和位置。以最快的速度轉移凍存管知液氮罐內,因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內取出細胞時,有可能會出現凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
PASMCS細胞系相關產品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
Ra #1細胞系相關產品:PC-10細胞、MDAMB157細胞、H-1781細胞
NCI-H719細胞系相關產品:Ca 9-22細胞、HLEC細胞、JG細胞
DHL5細胞系相關產品:B16 BL6細胞、HCC-366細胞、PL-12細胞
Capan 2細胞系相關產品:CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
SNK1細胞系相關產品:H1882細胞、NCI-H847細胞、Human Hepatocyte Line 5細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關產品:L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
HCC4006細胞系相關產品:KAT-5細胞、HCC-94細胞、H-1184細胞
Ball 1細胞系相關產品:KM-H2細胞、HMEC1細胞、GM03569B細胞
A-101D細胞系相關產品:OCI/AML-3細胞、FRTL-5 Cl 2細胞、TE-15細胞
PC 61-5-3細胞系相關產品:GM637細胞、NIH-3T3細胞、BNL.CL2細胞
H-2073細胞系相關產品:Sf21細胞、KMB17細胞、Huh-7細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關產品:Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
HKBML細胞系相關產品:HL-1細胞、8226細胞、SW 962細胞
NCI N87細胞系相關產品:MGC-803細胞、MV4-11細胞、NCIH208細胞
BE2M17細胞系相關產品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
BE2M17細胞系相關產品:LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
Cor L51細胞系相關產品:NU-GC-3細胞、8305C細胞、MeSoTheliOma-211H細胞
H2342細胞系相關產品:HGE細胞、3AA細胞、MC 3T3-E1細胞
HRVEC細胞系相關產品:CCK-81細胞、COLO_320DM細胞、L-6細胞
P3-X63-Ag8.653細胞系相關產品:IMR 32細胞、SMMC 7721細胞、HCC-15細胞
293A細胞系相關產品:WC00044細胞、A-2058細胞、4175細胞
NCI-H2195細胞系相關產品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、HEK 293 EBNA細胞、VMCUB1細胞
SK-RC-20細胞系相關產品:CT 26細胞、L 1210細胞、TE 32.T細胞
PAI細胞系相關產品:UPCISCC090細胞、MS751細胞、H1404細胞
HS688AT細胞系相關產品:OPM2細胞、COV 504細胞、Adeno 293細胞
MFE-280細胞系相關產品:HSAS3細胞、JB6Cl30細胞、L- cell細胞
VMCUB1細胞系相關產品:H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
HEM細胞系相關產品:SW 1116細胞、KASUMI6細胞、NCI-446細胞
A549ATCC細胞系相關產品:H-1435細胞、SJCRH30細胞、RGB細胞
SJCRH30細胞系相關產品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
WERI細胞系相關產品:OV3121細胞、AHH1細胞、HAC-84細胞
6T-CEM細胞系相關產品:SNU-449細胞、MALME 3M細胞、Cattle chondrocytes細胞
Hs 729細胞系相關產品:SK Hep1細胞、YES-2細胞、JB-6 Cl 30細胞
HT-1197細胞系相關產品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
SF 763細胞系相關產品:GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
U-2-OS細胞系相關產品:AM-38細胞、NCI-H2087細胞、SUM149-PT細胞
NCI-H1703細胞系相關產品:LC1sq細胞、NH-6細胞、OVCAR3細胞
NCIH647細胞系相關產品:Kit 225-K6細胞、Tca-83細胞、CX1細胞
H-522細胞系相關產品:HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
MIMVEC細胞系相關產品:A2780細胞、CCLP1細胞、SW-780細胞
SK-ChA-1細胞系相關產品:CHL細胞、PC-3細胞、TOV-112D細胞
MM-1S細胞系相關產品:C12細胞、Human Embryonic Skin細胞、G 292 Clone A 141B1細胞
AZ 521細胞系相關產品:A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
5637細胞系相關產品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
H-1563細胞系相關產品:NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
hFOB細胞系相關產品:H.Ep. No. 2細胞、NCI-446細胞、COV 504細胞
HG2855細胞系相關產品:P116細胞、H-735細胞、MLE-12細胞
PC-14細胞系相關產品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞
BNCL-2細胞系相關產品:CAKI 2細胞、QGY-7701細胞、A72細胞
HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
UCH1細胞系相關產品:HBZY1細胞、H-650細胞、P3J HR1-K細胞
Neuro-2a細胞系相關產品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
hs 68細胞系相關產品:MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
H526細胞系相關產品:PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
IALM細胞系相關產品:DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
ST486細胞系相關產品:GalK1細胞、BNCL-2細胞、CHP100細胞
EAC-E2G8細胞系相關產品:OVCAR3細胞、TM-3細胞、A9 (Hamprecht)細胞
RCF細胞系相關產品:HA細胞、Malme-3 M細胞、MRASMC細胞
NBL-4細胞系相關產品:UMRC-2細胞、Simpson細胞、NCI-H498細胞
SP2-0-Ag14細胞系相關產品:KNS-81細胞、Toledo細胞、MHH-CALL2細胞
293T細胞系相關產品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞
Caco-2 BBe細胞系相關產品:RPMI 6666細胞、CCC-ESF-1細胞、3T3 L1細胞
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關鍵字: HuP-T3 Cell:人胰腺癌細胞系
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