"NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
MUTZ3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細(xì)胞、HCC202細(xì)胞、HUCCT1細(xì)胞
LL/2(LLc1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL/IU細(xì)胞、MDA-MB-361細(xì)胞、SW 1463細(xì)胞
UMUC-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388D1細(xì)胞、Psi-2 DAP細(xì)胞、MOLT 16細(xì)胞
SK-OV-433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-450細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進(jìn)行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對比觀察看誰長的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對于特別難消化的細(xì)胞和對胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2傳代
常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會導(dǎo)致細(xì)胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞
LUDLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP62細(xì)胞、SY5Y細(xì)胞、NCIH1734細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對細(xì)胞的損傷等等。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞
H-187細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞、JTC-39細(xì)胞
SSP-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T3細(xì)胞、MDCK細(xì)胞、MCF10-A細(xì)胞
MUGCHOR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:no.11細(xì)胞、HCCC-9810細(xì)胞、WIL2S細(xì)胞
HCCC-9810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES2細(xì)胞、CAL-148細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞
SUP-M2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1271細(xì)胞、D283MED細(xì)胞、Baby Hamster Kidney-21細(xì)胞
RC92A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1648細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞、HUT 125細(xì)胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
HPAF-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L Wnt-3A細(xì)胞、NCI-H2107細(xì)胞、HMC3細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
CFSC-2G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2405細(xì)胞、CCD-18Co細(xì)胞、NK 10a細(xì)胞
H-1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKC細(xì)胞、Me Wo細(xì)胞、NP69SV40T細(xì)胞
BT20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-90細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞、PANC-04-03細(xì)胞
LNCaP clone FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、H2330細(xì)胞、JKT-1細(xì)胞
FL83B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細(xì)胞、SW 837細(xì)胞、WM266-4細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
NCI-H740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-N-6細(xì)胞、AM細(xì)胞、Panc_08_13細(xì)胞
U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞
McA-RH7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1373細(xì)胞、SUM-149細(xì)胞、SMC-1細(xì)胞
OCI Ly1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1437細(xì)胞、P3X63 Ag8.653細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞
Leukemia L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞、HCGC細(xì)胞
RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞
AU-565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCLC-103H細(xì)胞、Clone 166細(xì)胞、Panc04.03細(xì)胞
WIL2-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細(xì)胞、TH1細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞
CMT-167細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細(xì)胞、Hs-578-T細(xì)胞、SU8686細(xì)胞
Mc Coy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHs74 Int細(xì)胞、526細(xì)胞、KASUMI1細(xì)胞
CF PAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL(2)細(xì)胞、NCI-H841細(xì)胞、TE12細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
CCD33Co細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-47D細(xì)胞、U118-MG細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞
TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞
U-CH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL33細(xì)胞、Rin-M-5F細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
LY細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H7721細(xì)胞、H35 Reuber細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞
H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1882細(xì)胞、SK N SH細(xì)胞、CEM.C1細(xì)胞
V79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCKII-WT細(xì)胞、SW-948細(xì)胞、Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞
CA 46細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med細(xì)胞、WERI-Rb 1細(xì)胞、Colo741細(xì)胞
MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞
H295R-S1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU565細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞、HEK-2細(xì)胞
HT-55細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT-474細(xì)胞、NS1/1-Ag4.1細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞
P3.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ect1/E6E7細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞、H446細(xì)胞
VA-ES-BJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Col-1細(xì)胞、SW480細(xì)胞、H.Ep. No. 2細(xì)胞
H735細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 934.T細(xì)胞、IPLB-Sf21AE細(xì)胞、CAL 12細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
SCC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Douglas Foster-1細(xì)胞、ASH3細(xì)胞、Balb/3T3-4-Cl31細(xì)胞
UO-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Kidney-2細(xì)胞、PC2細(xì)胞、MC-3T3細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
MV3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE7細(xì)胞、IHH-4細(xì)胞、RD-2細(xì)胞
J45.01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-87細(xì)胞、Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A細(xì)胞、KYSE0030細(xì)胞
Ramos (RA)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB/3T3 clone A31細(xì)胞、H19-7細(xì)胞、Nb-2細(xì)胞
NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
HOCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi2-DAP細(xì)胞、RPMI1788細(xì)胞、Clone Y1細(xì)胞
H-2023細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kelly細(xì)胞、NCI-H102細(xì)胞、Reh細(xì)胞
PK-15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIGI細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞、GB1細(xì)胞
Murine Carcinoma-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-739細(xì)胞、95-D細(xì)胞、87MG細(xì)胞
PC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-HUT-69細(xì)胞、NCIH2591細(xì)胞、P3X63NS1細(xì)胞
MB 157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI:SCC090細(xì)胞、Z-138細(xì)胞、Hepatoma 22細(xì)胞
HFT-8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1155細(xì)胞、TJ905細(xì)胞、Capan2細(xì)胞
VK2 (E6/E7)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320細(xì)胞、GM0637細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞
SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞
CHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-128細(xì)胞、HEK/EBNA細(xì)胞、MGH-U1細(xì)胞
P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞
BT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly 19細(xì)胞、526 mel細(xì)胞、P31-FUJ細(xì)胞
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關(guān)鍵字: NCI-H322 Cell:人肺癌細(xì)胞系
上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。