"HLE Cell:人肝癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
MNNG-HOS (Cl#5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31-FUJ細胞、HCGC細胞、Hi-5細胞
Michigan Cancer Foundation-10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST486細胞、VP303細胞、3T3-J2細胞
OV-1063細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C127細胞、SKMES1細胞、HCT-15細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HLE Cell:人肝癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預(yù)吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復(fù)蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細胞人多口雜,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
NRK clone 49F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細胞、OVCA-420細胞、OE21細胞
MOLT-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、HT 144細胞、NCIH1437細胞
HCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD293細胞、AG 9細胞、WIL2-S細胞
Pa16C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細胞、Panc02-H0細胞、HO-8910 PM細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
HLE Cell:人肝癌細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
U-138MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-20Y細胞、PC-9S1細胞、HFTF細胞
NCI-H446細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
ST 486細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEC-B4G12細胞、KLN 205細胞、BMF細胞
HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞
T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
HLE Cell:人肝癌細胞系
OCI/AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC3細胞、Panc 8.13細胞、B16 F10細胞
HEL 92.1.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA104細胞、MSTO-211 H細胞、T-24細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
B4G12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細胞、PCI:SG231細胞、Hs-578Bst細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
PAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-8/V細胞、293/EBNA-1細胞、2B4-L細胞
CBRH-7919細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MH-S細胞、J774A.1細胞、BT20細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
HT-1197細胞系相關(guān)產(chǎn)品:766T細胞、GA-10 (Clone 4)細胞、HCT-8/V細胞
HS-729細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Murine Long bone Osteocyte-Y4細胞、SKNMC細胞、RPMI 6666細胞
OPM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細胞、SKRC 39細胞、RSC-364細胞
ROS-17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA2B細胞、COLO 824細胞、GM03570E細胞
H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞
B-CPAP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MuM-2C細胞、SW 527細胞、KYSE 30細胞
KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞
Hs 832(C).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細胞、NW38細胞、HCC-202細胞
TOV21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞、PANC-1細胞、SNU398細胞
Leukemia 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T細胞、CL 1-0細胞、U-2OS細胞
LIPF155C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-114細胞、MonoMac6細胞、Mv 1 Lu (NBL-7)細胞
Hs840_T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC002細胞、578T細胞、EoL-1 cell細胞
BJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-330細胞、T241細胞、NCI-H510A細胞
WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞
SF295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2081細胞、Lu-165細胞、PK136細胞
Panc10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUGCHOR1細胞、MLE-12細胞、Japanese Tissue Culture-28細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
RC-K8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-FT細胞、Molm 14細胞、KLN205細胞
HCC-1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、VMCUB-1細胞、M-07e細胞
RFL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1197細胞、CAKI.1細胞、COLO 738細胞
NCIH740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細胞、NCI-H3255細胞、CCC-HHM-2細胞
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
RMG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細胞、LOU-NH-91細胞、OSC-19細胞
HCC95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN-c細胞、Neuro-2a細胞、SV-HUC細胞
DHL10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1793細胞、TB-1 Lu細胞、32D CL3細胞
3LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細胞、PA-TU S細胞、SH-SY5Y Parental細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
H-250細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H520細胞、Functional Liver Cell-7細胞、OUMS-27細胞
U-87 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAC細胞、L-6TG細胞、ST 486細胞
SW 1990細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE12細胞、NB19細胞、R2C細胞
HLE Cell:人肝癌細胞系
IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
NCI522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-kb2細胞、Epithelioma Papulosum Cyprini細胞、OCI-LY-19細胞
TK-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 03.27細胞、FLC-7細胞、Hep2細胞
L6565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637F細胞、MB157細胞、DU145細胞
Tb1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J-774細胞、SUM-52細胞、BE(2)C細胞
A375-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RT4-D6-P2T細胞、HepG2細胞、NCI-H165細胞
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
MES23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-1040細胞、L Wnt-3A細胞、SN12CPM6細胞
COLO-320-HSR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 433細胞、TERT-RPE1細胞、RPTEC/TERT1細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細胞、KM12 SM細胞、HEK293E細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細胞、Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、LLC-WRC 256細胞
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