"DoHH2 Cell:人胸腔積液濾泡中心母細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞
NCI-SNU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-78細胞、MGSMC細胞、MH7A細胞
HECV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 19Lu細胞、NCTC 3960細胞、PANC-28細胞
H1672細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIHA細胞、H-1437細胞、HS-695T細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
DoHH2 Cell:人胸腔積液濾泡中心母細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
Panc2_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1836細胞、D 407細胞、UCLA SO M21細胞
Molm14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細胞、HCE-2 [50.B1]細胞、HS 445T細胞
H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-6細胞、L 132細胞、SPDC-CCL141細胞
Kit 225細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCC-IT細胞、MC3T3-L1細胞、NFHIOSE-29細胞
SNU-869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 3 HR 1細胞、Uhth-74細胞、T-98細胞
細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分
DoHH2 Cell:人胸腔積液濾泡中心母細胞系
細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MCF-7/ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT67細胞、B16-F0細胞、MDAMB-231細胞
CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
MNNG-HOS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-3細胞、GB1細胞、TMD-8細胞
Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞
RGM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC_7860細胞、MDA436細胞、HCC-1143細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
SW900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細胞、HCA7細胞、BxPC-3細胞
DoHH2 Cell:人胸腔積液濾泡中心母細胞系
Rat-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS18細胞、Kit225-K6細胞、526細胞
D-341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細胞、COLO684細胞、BE2-M17細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
COR-L88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC-7細胞、JCA1細胞、H-1385細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
HCS2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM-1細胞、CHP126細胞、H-2227細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeWo細胞、HCC-9724細胞、H-520細胞
MDA-MB415細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMCUB-1細胞、CAL 85-1細胞、Y-1細胞
MHCC 97細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LL2細胞、EL-4細胞、MDA-kb2細胞
NCI-H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8226/S細胞、NRK-49F細胞、C-127細胞
GCT0404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS766T細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞、SL1細胞
TE353.SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-3細胞、P3/NSI/1-AG4-1細胞、BC-021細胞
SK-GT-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞
C-28/I2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-32細胞、L-5178-Y-R細胞、BNCL-2細胞
P19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE140細胞、LN-18細胞、L 363細胞
L cells (TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細胞、H1882細胞、OV-CA 432細胞
BC-028細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FHC細胞、H446細胞、IAR20細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
HEK-293H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細胞、H1650_CO細胞、10T1/2細胞
N-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞
A875細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU182細胞、U2932細胞、H820細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
2E8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 8細胞、U-87細胞、SKUT1細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
Malme-3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H920細胞、HEK-EBNA細胞、Hs 343.T細胞
P3X63Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293A細胞、SCC-7細胞、SNU407細胞
SNU475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH661細胞、BEL7402細胞、SJRH30細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
JVM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
OVCA432_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細胞、130-T細胞、SW-1271細胞
GT38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOG細胞、CoCL3細胞、Mv 1 Lu細胞
KOSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW42細胞、Mel-MeWo細胞、T-ALL-1細胞
MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞
5637細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細胞、H292細胞、SUP T1細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI細胞、HUSMC細胞、2T細胞
DoHH2 Cell:人胸腔積液濾泡中心母細胞系
Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞
Strain V細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NeHepLxHT細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細胞、SUDHL6細胞
Leukemia L1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Normal Rat, August 3, 1983細胞、NCI.H226細胞、HCGC細胞
ssMCF7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細胞、NCI-H2106細胞、BEL/FU細胞
U251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、H-2444細胞、B16-F10-BL6細胞
A-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co-115細胞、CF-PAC1細胞、SJ-RH30細胞
B10BR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H838細胞、OVCA5細胞、IPEC-1細胞
NCI-H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19-Lu細胞、CNE1-LUC細胞、Scott細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
AG06814-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細胞、SNU-761細胞、Walker/LLC-WRC256細胞
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ssMCF7細胞、Epstein-Barr-2細胞、NCIH2227細胞
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