"EBTr Cell:牛胚氣管細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
HPAF-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KM.12細胞、HC11 Mammary Epithelium細胞、Hs 832(C).T細胞
S180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE(2)細胞、HT clone H9細胞、NCI-H1975細胞
H2172細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
EBTr Cell:牛胚氣管細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。１.不同的細胞，喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同，還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長，生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好，譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞，生長速度非常得快，貼壁速度很快，所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞，這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長，而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候，細胞形態(tài)基本上就會差了，老化的會比較多，對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。２.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞，如果細胞形態(tài)不好，（或者細胞形態(tài)不清晰，表面似有異物等）可以在傳代的時候進行如下操作：首先，倒掉舊的培養(yǎng)基，加入３ml新的培養(yǎng)基（有無血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培養(yǎng)基，進行預(yù)吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。（巨噬細胞我們只吹打，不消化的）；其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時間點觀察細胞貼壁情況。１０分鐘觀察一次，２０分鐘，３０分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入３ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。３.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。（可能也是競爭很大，有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。）對于生長速度快的細胞，易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。４.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞，在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài)，比玻璃瓶會好，對于生長速度慢的細胞，玻璃瓶則會更好。同樣，對于同一種細胞，在其生長速度慢的時候，會好一點，比如剛剛復(fù)蘇的時候，或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
WML2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UMR-106細胞、BCP1細胞、K7M2細胞
RAW-264.7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細胞、G361細胞、NCIH2029細胞
H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞
SV-HUC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro 2a細胞、NCI-UMC-11細胞、NCI-SNU-475細胞
細胞生長特性：貼壁或懸浮，詳見細胞說明書部分
EBTr Cell:牛胚氣管細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MDAPCa-2b細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV-112D細胞、U-373MG細胞、HS-683細胞
NCTC clone 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞
MS751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：INS1細胞、EJ 138細胞、HEK-293 c18細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH/3T3細胞、BV-173細胞、HEK/293細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
EBTr Cell:牛胚氣管細胞系
EC-GI-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-180細胞、NOR10細胞、P31FUJ細胞
TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞
IAR-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM1細胞、VA-ES-BJ細胞、BE(2)-M17細胞
OCI-Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m 14B細胞、Hs 578T細胞、P388.D1細胞
Mia PACA 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U118細胞、Ramos 1細胞、GM06141B細胞
COLO-680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293FT細胞、KP 4細胞、HGSMC細胞
P3 NS1 Ag4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OLN93細胞、Panc 2.03細胞、H-740細胞
SN12-PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc08.13細胞、CNE-1細胞、108CC15細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品：alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞
LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuNS1細胞、HEEpiC細胞、MHCC-LM3細胞
58F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BNL CL2細胞、H1395細胞、NCI-H2135細胞
AtT 20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HN13細胞、A549/ATCC細胞、MCF7/WT細胞
T 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB415細胞、ECC 10細胞、SUNE1細胞
CWR22-R1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bat lung細胞、MCF-7B細胞、LS-411細胞
OVCAR 420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞
J774 A.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU-1040細胞、F-81細胞、MCA205細胞
NIH:OVCAR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Super Tube細胞、HDLM-2細胞、IMR32細胞
COS-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87MG細胞、HS-695T細胞、TE-9細胞
RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUC-1細胞、HCC1806細胞、GM 2132細胞
Emory University-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME 180細胞、MDA-MB-157細胞、HIT clone T15細胞
Mv.1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YAC細胞、BC-027細胞、LICCF細胞
OVCA433細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-9706細胞、JCA-1細胞、NCI-H2029細胞
HMEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞
Kupffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-729-T細胞、HN 4細胞、SUM 190PT細胞
UMNSAH-DF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U343MG細胞、WM115mel細胞、VAESBJ細胞
KYSE510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eph4 1424細胞、AE1201細胞、Ramos 2G6.4C10細胞
Panc 5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WBF344細胞、CA-OV-3細胞、MESSA Dx5細胞
WEHI-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Okayama University Medical School-23細胞、H1385細胞、GA-10-Clone-4細胞
G519細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI H747細胞、OVCAR-432細胞、GTL 16細胞
HCC1143細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Biopsy xenograft of Pancreatic Carcinoma line-3細胞、NL-20細胞、MDCK-II細胞
Capan 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO-K1細胞、NCI-H128細胞、ACC-3細胞
WEHI3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OS-732細胞、HepG2/C3A細胞、Madison細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
3T3-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPTEC/TERT1細胞、SVG(P12)細胞、ANA-1細胞
SCL-II細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C41細胞、LL/2(LLc1)細胞、CCFSTTG1細胞
BLO 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
NTera-2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH7細胞、NALM-6-M1細胞、TKB1細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
SNB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOV21細胞、PFSK-1細胞、H748細胞
FT-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B104 [Rat neuroblastoma]細胞、ARH-77細胞、NPA87-1細胞
NCIH660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞
OACP4 C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1581細胞、LLCPK1細胞、MOLT4細胞
EBTr Cell:牛胚氣管細胞系
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞
NCM-460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2227細胞、H-220細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞
CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞
SW-982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LADMAC細胞、C4I細胞、YD-38細胞
NCI-SNU-668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16-BL6細胞、PATU-S細胞、L2細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細胞、SP2-0-Ag14細胞、HMrSV5細胞
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