"PY8119 Cell:小鼠乳腺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：乳腺癌；雌性；C５７BL/６
CaES-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞
HGBEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS-2B細胞、MGH-U1 (EJ)細胞、LNCaP C4-2B細胞
ATN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit 225細胞、EMT-6細胞、H1915細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
PY8119 Cell:小鼠乳腺癌細胞系
細胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細胞（絕大部分１min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備１００%的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細胞，一般不超過５min，即可見細胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候，比如tsDC細胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Mono-Mac-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細胞、ATC241細胞、Normal Rat Kidney細胞
SK-MEL-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H28細胞、Mel624細胞、NCI-SNU-C1細胞
MyLa 2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 melanoma細胞、KYSE 520細胞、mRTEC細胞
C518細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx-5細胞、SV40 MES 13細胞、HLE-SRA-01/04細胞
TEV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：4175細胞、Pan02細胞、Normal fibroblast-10細胞
細胞生長特性：貼壁
PY8119 Cell:小鼠乳腺癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞
TFK-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT1A細胞、MES-SA-Dx5細胞、MDA PCa 2b細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
3T3-F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
Panc5.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs281T細胞、H2342細胞、TOV21細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
PY8119 Cell:小鼠乳腺癌細胞系
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞
P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞
MLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1581細胞、NPA-87細胞、GM03320D細胞
Hs-675-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910細胞、C4 I細胞、RPMI-8226S細胞
NCI-1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05372細胞、MCF7-GFP細胞、102PT細胞
NCI-H1435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat-1細胞、MHCC97L細胞、NCI-H1668細胞
BE2M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-PK-1細胞、KU 19-19細胞、Ketr-3細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
Hs-281-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NPC-TW01細胞、OVCA432_Bast細胞、HT 1080細胞
SCC-25細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ZR75-1細胞、HUT 28細胞、RPMI #1846細胞
COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞
159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞
AE1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO 357細胞、WM-266-mel細胞、MM1S細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
639V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs695T細胞、OPM2細胞、SUDHL-4細胞
CCC-HHM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞
HCT15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-3J細胞、HuT 102細胞、OVCAR 8細胞
526 mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RTE細胞、293-EBNA細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
LK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H3396細胞、PaTu 8988 S細胞、PC-3M 2B4細胞
Ramos.2G6.4C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hepa1-6細胞、NCI-H1915細胞、GC-1 spg細胞
NCI-H1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIADRRES細胞、NCI-H2195細胞、SK-N-BE-2c細胞
HOP-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-WRN細胞、SCC25細胞、LA-N-6細胞
HT 115細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC5細胞、H2171細胞、KYSE520細胞
ZR751細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細胞、DI TNC1細胞、CHP-212細胞
NCI-H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCSUP細胞、H1703細胞、LYR細胞
NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞
Clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB435細胞、MOPC細胞、SNU-368細胞
FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞
CFPAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞
Sc-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS 4;11細胞、SCI1細胞、D283MED細胞
MES-SA/Dx-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
ASH3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、MM1細胞、NCTC-929細胞
NBL-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細胞、H-2085細胞、WSUDLCL2細胞
MRAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP C4-2B細胞、LS-123細胞、RAMSCs細胞
TKB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Embryo Lung-1細胞、AMC-HN-8細胞、KYSE270細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
M2-10B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT 64細胞、IOSE-Van細胞、H522細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞
PY8119 Cell:小鼠乳腺癌細胞系
SRS-82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC-1細胞、MDA-MB415細胞、UMNSAH-DF-1細胞
G422細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKGT2細胞、B16F1細胞、H-2170細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
TU 686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NF639細胞、KOPN8細胞、N-Tera-2細胞
Lu-165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEY A8細胞、HuO9細胞、HCC 70細胞
H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞
RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞
NK-92 MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2291細胞、GP293細胞、BE(2)M17細胞
THLE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞
H-2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞
Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC(939)細胞、JB 6細胞、HIT T15細胞
EB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo320細胞、F36P細胞、A-375細胞
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