"End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:子宮內(nèi)膜;女性;HPV16轉(zhuǎn)化
JOSK-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNO-1細(xì)胞、Colo699細(xì)胞、HcaF細(xì)胞
HCC-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NU-GC-2細(xì)胞、BLO11細(xì)胞、TH1細(xì)胞
BC3H-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:769P細(xì)胞、ETCC007細(xì)胞、GEO細(xì)胞
Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞傳代時(shí)消化的問題:可以這樣說,對(duì)于需要消化傳代的細(xì)胞,每一次的消化都是對(duì)這個(gè)細(xì)胞存活與否,狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗(yàn)。很多同學(xué)都遇到過這個(gè)問題,自己養(yǎng)的細(xì)胞開始的幾代長(zhǎng)的還挺好的,可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細(xì)胞,狀態(tài)越來越差勁了。對(duì)于這個(gè)問題,可以非??隙ǖ卣f,你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細(xì)胞受到較大損傷了。所以,越長(zhǎng)越差。在消化的過程中,你加入胰酶后,所有細(xì)胞都在被胰酶消化著,但是我們忽視了一個(gè)問題就是,細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)是不一樣的,每一個(gè)細(xì)胞的貼壁情況也是不一樣的,有的貼壁牢固,有的貼壁沒有那么牢固的,所以,讓所有的細(xì)胞消化同樣的時(shí)間對(duì)細(xì)胞是不公平的,他們受到了差別待遇當(dāng)然會(huì)有脾氣啊。我后來對(duì)消化的方法進(jìn)行了改良。爭(zhēng)取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。(以難消化細(xì)胞為例);具體操作:1)首先不加胰酶,倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗1-2遍,(這是前奏,即為步,目的是將漂浮著的死細(xì)胞之類盡量洗掉。2)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍,這一遍是把貼壁不牢固的細(xì)胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍,兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步(你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng),以與后面胰酶消化過的細(xì)胞對(duì)比觀察看誰長(zhǎng)的更好一點(diǎn)就知道該細(xì)胞對(duì)胰酶的敏感度了。)3)吸干凈瓶?jī)?nèi)剩余液體,加入0.3ml左右的胰酶潤(rùn)洗一遍,吸掉棄之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同時(shí)置于顯微鏡下觀察,待細(xì)胞與細(xì)胞之間間隙明顯的時(shí)候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用,加入新培養(yǎng)基開始吹打,吹打2-3遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用2ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。(你也可以傳入新瓶培養(yǎng),以與后面及前面的做對(duì)比。)這是第三步。4)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進(jìn)去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細(xì)胞。當(dāng)然你也可以用新的胰酶,如果你們那比較富裕的話,呵呵。繼續(xù)鏡下觀察,待剩余細(xì)胞間隙明顯,細(xì)胞獨(dú)立開來的時(shí)候,吸掉胰酶,加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)(根據(jù)實(shí)際情況你自己把握)。這是第四步。其實(shí)還可以有第五步,對(duì)于特別難消化的細(xì)胞和對(duì)胰酶特別敏感的細(xì)胞的話,你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細(xì)胞更好的狀態(tài),更漂亮的樣子,沒辦法,你必須分多批多次消化,這樣才能限度地將胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷降到最低,保證細(xì)胞的狀態(tài)能夠。當(dāng)然了,如果細(xì)胞是屬于那種很容易消化的細(xì)胞,像RAW264.7,僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個(gè)是需要你在實(shí)驗(yàn)中能夠自己用心去體會(huì)的。建議你接受一個(gè)新細(xì)胞時(shí)把各步消化的細(xì)胞分別培養(yǎng)起來做比較,去摸索好細(xì)胞對(duì)胰酶的要求。便于你后續(xù)實(shí)驗(yàn)的開展。將細(xì)胞消化分成這幾步,除了是為了避免胰酶對(duì)細(xì)胞的損傷之外,還有一個(gè)更重要的作用就是,可以程度地把細(xì)胞吹打成單個(gè)單個(gè)的狀態(tài),不成片不連體。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時(shí)間過長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
DHL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞、H2110細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC366細(xì)胞、CG4細(xì)胞、COLO-680N細(xì)胞
R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H510細(xì)胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞、HUT 28細(xì)胞
HBZY1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VeroE6細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞、LS 174T細(xì)胞
MAntle cell VERona-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL88細(xì)胞、PASMCS細(xì)胞、Tu686細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞
624細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCMEC細(xì)胞、D10.G4.1細(xì)胞、CMT 64細(xì)胞
MSCs(mUCMSCs)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細(xì)胞
NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞
LS-174細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN-93細(xì)胞、NCI-H1703細(xì)胞、HCC-2279細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
GLAG-66細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Molm 13細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞
H1666_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細(xì)胞、NCI-SNU-387細(xì)胞、ARO細(xì)胞
MV-1-Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細(xì)胞、NOZC-1細(xì)胞、T 98 G細(xì)胞
McCoy B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU16細(xì)胞、NCIH1373細(xì)胞、BEL-7405細(xì)胞
MDA231-LM2-4175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CSQT-2細(xì)胞、Leukemia L1210細(xì)胞、HCT-FET細(xì)胞
DoTc2 4510細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO201細(xì)胞、SACC-83細(xì)胞、T-47-D細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
SH-SY5Y Parental細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-70細(xì)胞、YD38細(xì)胞、Calu6細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
YD-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H64細(xì)胞、293-FT細(xì)胞、MS 751細(xì)胞
IPEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細(xì)胞、hFOB細(xì)胞、Mel526細(xì)胞
Hut292細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H650細(xì)胞、GM3569細(xì)胞、H-841細(xì)胞
JTC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G 292 Clone A 141B1細(xì)胞、HSC2細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-415細(xì)胞
SKMEL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細(xì)胞、HCC1954BL細(xì)胞、CHO-Lec1細(xì)胞
NCIH1568細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THEECs細(xì)胞、118 MG細(xì)胞、RPMC細(xì)胞
Jurkat, Clone E6-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2452細(xì)胞、HEYA8細(xì)胞、MC3T3E1細(xì)胞
H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞
COLO-824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 341細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞、M1細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
NCIH1355細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMSC細(xì)胞、D341細(xì)胞、T. T細(xì)胞
FDC-P1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-93細(xì)胞、NCTC clone 929細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞
293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞
PGBE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Simpson細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞、C6661細(xì)胞
YES 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU520細(xì)胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞、SUM-159細(xì)胞
NCI-H250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-295細(xì)胞、H1341細(xì)胞、NCI-H226細(xì)胞
H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H125細(xì)胞、UO-31細(xì)胞、H-9細(xì)胞
SK.OV.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細(xì)胞、NUGC2細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞
H-250細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H520細(xì)胞、Functional Liver Cell-7細(xì)胞、OUMS-27細(xì)胞
HCC-1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159PT細(xì)胞、NIH:OVCAR-4細(xì)胞、Karpas-299細(xì)胞
SKNEP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細(xì)胞、U14細(xì)胞、BIC1細(xì)胞
SKNAS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK-6細(xì)胞、Super Tube細(xì)胞、NIH:OVCAR4細(xì)胞
U251-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia L1210細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞
NCIH1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-2G細(xì)胞、LAN1細(xì)胞、KP-N-YN細(xì)胞
H-1105細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UWB1289細(xì)胞、Pt K2 (NBL-5)細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330細(xì)胞
MSTO-211細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細(xì)胞、TFK1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞
OCI-Ly 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8305C細(xì)胞、F81細(xì)胞、P-3J細(xì)胞
H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞
HCC-1937細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細(xì)胞、OE21細(xì)胞、MDAMB330細(xì)胞
H1819細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL細(xì)胞、NCI-H446細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞
Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞
OCILY7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-520細(xì)胞、PT-67細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞
End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
MKN45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-671細(xì)胞、MCMEC細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞
MuM-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MNNG細(xì)胞、KYSE 70細(xì)胞、CL34細(xì)胞
COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞
IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞
H1792細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細(xì)胞、Caco-2BBe細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞
NCIH748細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375S2細(xì)胞、Central Adrenergic TH-expressing a細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞
H2.35細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNT-229細(xì)胞、CCD1112Sk細(xì)胞、Karpas 299細(xì)胞
NCIH747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 1細(xì)胞、RFL-6細(xì)胞、U266BL細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
SW480E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-361細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞、SU-DH-L5細(xì)胞
MUTZ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKM1細(xì)胞、HEK293-EBNA細(xì)胞、HIT-T15細(xì)胞
Walker-256-TC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R細(xì)胞、SW1222細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
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關(guān)鍵字: End1/E6E7 Cell:人子宮頸內(nèi)膜上皮細(xì)胞系
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