"GP2d Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞
SU4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NW38細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞、CAL-39細(xì)胞
LLC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 52細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞、OCI-AML-2細(xì)胞
OPM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-YN細(xì)胞、SKRC 39細(xì)胞、RSC-364細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
GP2d Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2—1:3傳代,每周換液2—3次
細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SHG-44細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4細(xì)胞、A253細(xì)胞、SF295細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
3396細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細(xì)胞、Panc 05.04細(xì)胞、PC-3M-2B4細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
Hs 822.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-MC細(xì)胞、CV 1細(xì)胞、GCT0404細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
GP2d Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
NE-4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細(xì)胞、rRMECs細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞
MSTO-211H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-748細(xì)胞、Bx-PC3細(xì)胞、ECGI10細(xì)胞
H-1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143BTK-細(xì)胞、LN 229細(xì)胞、hADSCs細(xì)胞
H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細(xì)胞、SKMES-1細(xì)胞、BC-025細(xì)胞
SU86-86細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-4細(xì)胞、S3 HeLa細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞
NOK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、RPMI 1846細(xì)胞、DoHH2細(xì)胞
GP2d Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
143B TK-細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03571細(xì)胞、MH-22a細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞
T173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細(xì)胞、GOS3細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞
H650細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1細(xì)胞、SK HEP 01細(xì)胞、RLE-6TN細(xì)胞
PC.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細(xì)胞、AZ 521細(xì)胞、SK-NM-C細(xì)胞
MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞
GM00346B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ReNcell CX細(xì)胞、RCC10 RGB細(xì)胞、TR-146細(xì)胞
GM 2132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04154B細(xì)胞、GI-1細(xì)胞、EFM-192A細(xì)胞
BNL CL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 20細(xì)胞、MDA2B細(xì)胞、Hs-600-T細(xì)胞
H-2107細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細(xì)胞、HDQP1細(xì)胞、H-1688細(xì)胞
Hs600T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞、U20-S細(xì)胞
MOLM16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16-HBE14o細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞、HSF細(xì)胞
HCC1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE280細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞、SKO3細(xì)胞
Bovine ENDometrial cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:N9細(xì)胞、MDA-MB-134-VI細(xì)胞、CF Pac1細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
COV 434細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/EBNA細(xì)胞、SKNBE2C細(xì)胞、HT1197細(xì)胞
FM-88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM H-2細(xì)胞、MC26細(xì)胞、N1E115細(xì)胞
TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞
H2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1437細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞、SW 48細(xì)胞
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
Ly7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH-7919細(xì)胞、H-748細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞
L-6TG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-2003細(xì)胞、A875細(xì)胞、GS-9L細(xì)胞
C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞
786.O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2347細(xì)胞、Caov-3細(xì)胞、NCIH1838細(xì)胞
SNU-620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH2細(xì)胞、NPC-TW01細(xì)胞、NCIH1435細(xì)胞
Loucy細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep G2/C3A細(xì)胞、Mc Ardle 7777細(xì)胞、Hs294T細(xì)胞
RCC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM933細(xì)胞、NCI-SNU-423細(xì)胞、HEK 293-F細(xì)胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞、RCC4細(xì)胞
NHA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPP-89細(xì)胞、CNE細(xì)胞、NIE 115細(xì)胞
EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞
MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞
HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞
COLO-357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU449細(xì)胞、S91細(xì)胞、MM1.S細(xì)胞
Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC2細(xì)胞、SK-RC-42細(xì)胞、SKMEL1細(xì)胞
TGBC11T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 205細(xì)胞、CLONE M3細(xì)胞、CMT167細(xì)胞
Vero-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細(xì)胞、KMH-2細(xì)胞、PSN1細(xì)胞
LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
KMS-18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細(xì)胞、TCam 2細(xì)胞、HH [Human lymphoma]細(xì)胞
MOLT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME-1細(xì)胞、VeroE6細(xì)胞、Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞
S16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MS751細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞、BEL-7404細(xì)胞
BIU87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2591細(xì)胞、NCI-H358細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞
NCI-H82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSC4.1細(xì)胞、PT67細(xì)胞、H2108細(xì)胞
GP2d Cell:人結(jié)腸癌細(xì)胞系
Tissue Culture-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA-46細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞、WC00059細(xì)胞
NCIH740細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:95C細(xì)胞、NCI-H3255細(xì)胞、CCC-HHM-2細(xì)胞
WM 2664細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-9細(xì)胞、SK-MEL24細(xì)胞、MV411細(xì)胞
SK-SH-SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY-7701細(xì)胞、SKO007細(xì)胞、RS4;11細(xì)胞
NIH3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細(xì)胞、266 Bl細(xì)胞、TE-4細(xì)胞
AML 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225 K6細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞、NCIN87細(xì)胞
SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞
H520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1 cell細(xì)胞、NCIH660細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞
U266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-4-11細(xì)胞、H1993細(xì)胞、AZ-521細(xì)胞
OSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細(xì)胞、SUDHL-4細(xì)胞、OCI-Ly07細(xì)胞
4T1-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92.1.7細(xì)胞、BT-325細(xì)胞、H650細(xì)胞
HS-766-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuCCT-1細(xì)胞、Y1細(xì)胞、NCIH1341細(xì)胞
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