"DU4475 Cell:人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞
MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞
SF 539細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU739細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞、NH6細(xì)胞
H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/G HA VSMC細(xì)胞、KLM1細(xì)胞、HEL-299細(xì)胞
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
DU4475 Cell:人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié)：其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可，吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在３７度一般不到２min足夠消化細(xì)胞（絕大部分１min不到）。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞，連續(xù)這樣傳代，對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后３７度消化。２，什么算是消化好了呢？不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應(yīng)該停止消化，不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性，無論死活的細(xì)胞都是如此，你可以嘗試，準(zhǔn)備１００%的單個細(xì)胞懸液，貼壁后觀察細(xì)胞，仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液（不要笑，這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤，以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開）。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-３細(xì)胞），吹打不超過２０次后（一般１０次即可），成小規(guī)模聚集（１０個細(xì)胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者像有的同學(xué)那樣吹打１h，等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞（潤洗方法５min還不能消化），比如HCT１５, LS４１１和KM１２，這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般１００mm dish，一次最多加入５００ul，就足夠了，一般我加３００ul。即使這樣難消化的細(xì)胞，一般不超過５min，即可見細(xì)胞成片移動，就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候，比如tsDC細(xì)胞，但也只要用少量胰酶孵育，３min左右即可看到成片沙狀移動。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法：每周換液２—３次
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時傳代？體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當(dāng)一個細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細(xì)胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些？可能的原因有：更換了不同的培養(yǎng)液或血清；培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞；培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染；試劑保存不當(dāng)；比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分，比較新血清與舊血清等，找出其它可能的原因。解決辦法：增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度；讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液；換入新鮮配制培養(yǎng)液；補(bǔ)加谷酷肢或生長因子等；用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)污染，去棄培養(yǎng)物，或用抗生素除菌；血清需保存在５℃到２０℃; 培養(yǎng)液需在２-８℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在２-８℃保存，并在２周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物，檢測支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放入３７℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在１-２分鐘內(nèi)大部分融化，特別注意，需殘留一小塊冰塊，就可拿到超凈工作臺操作細(xì)胞，用７５%酒精消毒凍存管，用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
BC-019細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR 8細(xì)胞、VMRC-RCZ細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞
JHH-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MRC-9細(xì)胞、LP1細(xì)胞、IM95細(xì)胞
Mouse Colon 38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KTC1細(xì)胞、SNU-484細(xì)胞、MDA-231細(xì)胞
ZR751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PK (15)細(xì)胞、DI TNC1細(xì)胞、CHP-212細(xì)胞
U-251 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AML-EOL-1細(xì)胞、AMO1細(xì)胞、PC615.3細(xì)胞
細(xì)胞生長特性：懸浮，多細(xì)胞聚集
DU4475 Cell:人乳腺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟：常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器，規(guī)格有３５L和５０L兩種。使用時要注意以下幾點：(１)一般兩周需充液氮一次，至少一個月充氮一次。液氮溫度達(dá)-１９６℃，使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上，以免引起凍傷。(２)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu)，中間為真空層，瓶口有雙層焊接處，應(yīng)防止焊接部裂開。(３)在裝入液氮時，要注意緩慢小心，并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo)，使液氮直達(dá)瓶底，如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用，加液氮時更要緩慢，以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時常備的材料有：０.２５%胰蛋白酶，含１０%～２０%的血清培養(yǎng)液，DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(１２１°C蒸氣高壓消毒)，２mL安瓿(或?qū)Ｓ眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞，使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，細(xì)胞濃度為３×１０６～１×１０７/mL之間。(３)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性：上皮細(xì)胞樣
NCI-H1882細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOPC細(xì)胞、SEM細(xì)胞、SKCO-1細(xì)胞
C4I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V 79-4細(xì)胞、SL-1細(xì)胞、MUM2B細(xì)胞
Hs-746T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOZAWA細(xì)胞、CCRF/CEM-C7細(xì)胞、EAhy926細(xì)胞
16-HBE14o細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12-PM6細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞
Jurkat77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCEC細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、H766T細(xì)胞
C3H/10T1/2 CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT4細(xì)胞、NUGC3細(xì)胞、MCF.10A細(xì)胞
NCIH1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-125細(xì)胞、EB-2細(xì)胞、Soleus clone 8細(xì)胞
DU4475 Cell:人乳腺上皮細(xì)胞系
NEC-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-10細(xì)胞、Panc2_03細(xì)胞、KTA7細(xì)胞
PSN-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BJ1細(xì)胞、NB-19細(xì)胞、293E細(xì)胞
C2-C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AQ-Mel細(xì)胞、WEHI3細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞
U373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ASPC1細(xì)胞、BIC1細(xì)胞、Y-79細(xì)胞
RC-K8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-FT細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞、KLN205細(xì)胞
HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞
SW260細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR-10細(xì)胞、PLMVEC細(xì)胞、PG-4(S+L-)細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
HT 1080.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Hep1細(xì)胞、HANK細(xì)胞、HFL細(xì)胞
LP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE520細(xì)胞、Colon26細(xì)胞、HIBEC細(xì)胞
THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞
HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞
TGBC11TKB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2085細(xì)胞、NCTC-3960細(xì)胞、OVCAR-433細(xì)胞
RAW-264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1937細(xì)胞、G361細(xì)胞、NCIH2029細(xì)胞
OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞
32D.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB-1細(xì)胞、Hs 636.T細(xì)胞、Capan1細(xì)胞
SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞
OS-732細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6T-CEM細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞、M-1細(xì)胞
ES2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI AML5細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞、32D/cl3細(xì)胞
CF-1 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、RM1細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞
HS-683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細(xì)胞、OK-WT細(xì)胞、HCC 38細(xì)胞
V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞
Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LU65細(xì)胞、JB6 [Mouse]細(xì)胞、H1623細(xì)胞
SUPB15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12C-PM6細(xì)胞、HRPEpiC細(xì)胞、A 2058細(xì)胞
OSK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC-1細(xì)胞、Pro-5 Lec1.3c細(xì)胞、A-549細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
P3X63Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 48細(xì)胞、CMT-167細(xì)胞、Beta-TC-6細(xì)胞
343 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUD6細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞、H-747細(xì)胞
OV-2008細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPAM-WT細(xì)胞、MHCCLM3細(xì)胞、R1610細(xì)胞
SW403細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：V-79細(xì)胞、no-11細(xì)胞、6T-CEM細(xì)胞
Nb2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4I細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞、U-251MG細(xì)胞
PANC 327細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HepG2/C3A細(xì)胞、PC-3M IE8細(xì)胞、2E8細(xì)胞
HSC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61 5.3細(xì)胞、HLMVEC細(xì)胞、HT1376細(xì)胞
CAL-39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：B16 subline B78細(xì)胞、EA.hy 926細(xì)胞、MC-3T3-E1細(xì)胞
COLO678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30 OHK細(xì)胞、PANC403細(xì)胞、H9細(xì)胞
HF-91細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-7細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞、Ramos-RA1細(xì)胞
MES-SA/Dx5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma-261細(xì)胞、B16-F1細(xì)胞、HANK1細(xì)胞
RKN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tu177細(xì)胞、OE33細(xì)胞、ECV304細(xì)胞
NCI-HUT-125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細(xì)胞、Jurkat E6細(xì)胞、C33細(xì)胞
RBL 2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2023細(xì)胞、UPCI-SCC-90細(xì)胞、C4-2細(xì)胞
SN-12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL 3A細(xì)胞、KM.12細(xì)胞、MCF7細(xì)胞
MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞
DU4475 Cell:人乳腺上皮細(xì)胞系
HSC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細(xì)胞、OVCAR.8細(xì)胞、Ca Ski細(xì)胞
B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞
MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞
L-132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL851細(xì)胞、EVSA/T細(xì)胞、OCI/AML5細(xì)胞
APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞
COLO 206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA 802細(xì)胞、CCD 966 SK細(xì)胞、Hi-five細(xì)胞
SL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C22 (Clara)細(xì)胞、H-2342細(xì)胞、HBL100細(xì)胞
NCI-H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H735細(xì)胞、PL 45細(xì)胞、MHCC 97-H細(xì)胞
IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞
CHP-100細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC9細(xì)胞、CAL-33細(xì)胞、HPDE6c7細(xì)胞
4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞
SF763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H510A細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞、HTori3細(xì)胞
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