"M059J Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
149 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 578T細胞、H-9細胞、SNU878細胞
TH1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A9(Hamprecht)細胞、Large Cell Lung Cancer-103H細胞、SC1細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
M059J Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié)：懸浮性細胞應(yīng)如何繼代處理？一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養(yǎng)液太多時，可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶，加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當濃度，重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為３００xg(約１,０００rpm)，５-１０分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡；細胞之接種密度為何？依照細胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生長之一重要原因；細胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？動物細胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含５-１０%DMSO(dimethyl sulfoxide)和９０-９５%原來細胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO稀釋時會放出大量熱能，故不可將DMSO直接加入細胞液中，必須使用前先行配制完成；DMSO之等級和無菌過濾之方式為何？冷凍保存使用之DMSO等級，必須為Tissue culture grade之DMSO，其本身即為無菌狀況，次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中，保存于４°C，避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì)，并可減少污染之機會。若要過濾DMSO，則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜；冷凍保存細胞之方法？冷凍保存方法一：冷凍管置于４°C ３０~６０分鐘→ (-２０°C ３０分鐘)→-８０°C １６~１８小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降１-３°C至–８０°C以下，再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-２０°C不可超過１小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-８０°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；細胞欲冷凍保存時，細胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細胞濃度？冷凍管內(nèi)細胞數(shù)目一般為１x１０(６)cells/ml vial，融合瘤細胞則以５x１０(６)cells/ml vial為宜；應(yīng)如何避免細胞污染？細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法；如果細胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？直接滅菌后丟棄之。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：６-１：８傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Panc 8.13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-3H-1細胞、TOV-112D細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞
MPVECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WM 239A細胞、PL-9細胞、Hs819.T細胞
WI38細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH748細胞、WC00059細胞、CCRF/CEM-C7細胞
H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
細胞生長特性：貼壁生長
M059J Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：成纖維細胞
NCI-H69C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞
NCI H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞
Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞
MDA-MB-175細胞系相關(guān)產(chǎn)品：293T/17細胞、MDA-MB-453細胞、UCH-1細胞
Mc Ardle 7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC-PRF-5細胞、MBMEC細胞、SUDHL-6細胞
CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
RS 4;11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPC5細胞、H-1404細胞、D-341 Med細胞
M059J Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
BNL 1MEA.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHO K1細胞、SF17細胞、NCTC 1469細胞
CAL-120細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ishikawa細胞、RAT2細胞、MBT-2細胞
MG63細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞
H9c2 (2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞
H2087細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIN6細胞、HCC0827細胞、CCD-33Co細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
GM05862細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1404細胞、Hs695T細胞、OVCA-433細胞
DU4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LNCaP細胞、MT-4細胞、KTC1細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
CCRF/CEM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M-1細胞、PL 5細胞、DHBE細胞
253JB-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OV2008細胞、HSC-6細胞、NCI-HUT-520細胞
SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞
PC-9/GR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC 61-5-3細胞、NCI-H2172細胞、MDA MB 134VI細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
CG4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaTu 8988s細胞、PLC/PRF/5細胞、HCC1954-BL細胞
CEMC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDLF細胞、Jijoye細胞、H.Ep. #2細胞
Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CBRH-7919細胞、H-748細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
JM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H929細胞、Pro-5WgaRI3C細胞、GM03190A細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
ELD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNEP-1細胞、22Rv-1細胞、BT-483細胞
LSECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H295細胞、QGY7701細胞、DHL10細胞
MB49細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC細胞、SF-763細胞、Mhh-Call 2細胞
PT-K75細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM5細胞、NCIH548細胞、HMVEC細胞
HTh74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1568細胞、KG1A細胞、KY-50細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
YAC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-2細胞、SUDHL5細胞、MCA-205細胞
Colo205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KBM-7細胞、RAG細胞、MHCC 97細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
H1703細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAKIKI Clone 1細胞、MDA1386細胞、CACO2細胞
HOCF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Psi2-DAP細胞、RPMI1788細胞、Clone Y1細胞
RSC 96細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ej138細胞、SKMEL-31細胞、IEC 18細胞
Kit-225細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLC8024細胞、ST486細胞、NCIH209細胞
SNU-484細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T.T細胞、KTC-1細胞、EBNA293細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
DH82細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
FRO 81-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hTERT-RPE1細胞、Ect1/E6E7細胞、IMCD3細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
SuDHL 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Evsa T細胞、H-1876細胞、WTRL1細胞
Co 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs1.Tes細胞、KNS81細胞、KYSE 270細胞
H-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IOSE-80細胞、RDES細胞、HPASMC細胞
hs 68細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSB1細胞、MOLP-2細胞、RBL2H3細胞
PL11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK細胞、Madin Darby Canine Kidney細胞、PF-382細胞
M059J Cell:人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞系
SUM 190細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SV-HUC-1細胞、SH-SY5Y Parental細胞、HPAF-II/CD18細胞
NT2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2170細胞、KYSE0410細胞、Y79細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
EA.hy 926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAMSCs細胞、SKMel-5細胞、HEI-193細胞
C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-SUP細胞、GAK細胞、CII細胞
EM3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WISH細胞、BRL3A細胞、Mino細胞
H1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA12細胞、SW900細胞、H283細胞
SMA-560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、801-D細胞、Tu-686細胞
P388細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
mousepodocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HH [Human lymphoma]細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞、MCA-38細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
624 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNUC1細胞、HCT GEO細胞、LMTK-細胞
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