"Daoy Cell:人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
IHH-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE CA PJ34細胞、CEM-C1細胞、L 132細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Daoy Cell:人腦髓母細胞瘤細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代;每周換液2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HIT clone T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NL20細胞、SVEC4-10細胞、NW-38細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
HA1800細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUSMC細胞、SUDHL-10細胞、K7M2-WT細胞
Panc-10.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細胞、GP2-293細胞、Rat1細胞
SCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 28細胞、SK-MEL-1細胞、OB2細胞
細胞生長特性:貼壁生長
Daoy Cell:人腦髓母細胞瘤細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:多邊形
Tu-686細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-AD 293細胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1細胞、ROS 17/2.8細胞
NK10a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu 80細胞、UMUC14細胞、SN12PM6細胞
ZR-75-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-522細胞、G-Olig2細胞、DMS-114細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
LO2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE 29細胞、NR 8383細胞、Hs 695T細胞
T173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-G2/C3A細胞、GOS3細胞、SUNE-1細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
Daoy Cell:人腦髓母細胞瘤細胞系
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 375細胞、RLE-6TN細胞、NCM-460細胞
32D.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB-1細胞、Hs 636.T細胞、Capan1細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
H1650_CO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細胞、SW948細胞、H295R細胞
LIM 1215細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細胞、DF1細胞、H1573細胞
NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞
T/G HA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-433細胞、PLC/PRF5細胞、NCI-H1563細胞
SK_N_FI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMUC1細胞、SUDHL4細胞、HMC-1細胞
NCI-H1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1048細胞、OKAC1細胞、NCI-H441細胞
NCI-H1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 2650細胞、COR-L105細胞、KOSC-2細胞
RMS 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1793細胞、EBC1細胞、LC-1Sq細胞
SK MES 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.3細胞、D-283MED細胞、LNCaP C4-2細胞
WM451細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB 17細胞、EFM19細胞、OCI/AML3細胞
Karpas422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12細胞、Hepa 1-6細胞、W133細胞
UACC812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-719細胞、HAEC細胞、SW1990細胞
P3J HR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02219C細胞、NCI.H23細胞、MDA-MB-231-luc細胞
DKMG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR8383.1細胞、ECC 12細胞、Hs821T細胞
LN-229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGCs細胞、786-0細胞、hSCC-25細胞
HELA-GFP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:251MG細胞、NCI-128細胞、HuPT4細胞
Pan02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.5細胞、JTC-28細胞、EHEB細胞
U266B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV433細胞、EO771細胞、OV1063細胞
EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-27細胞、H929細胞、SW480E細胞
IHH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS5細胞、Jurkat-E6細胞、LPC-H12細胞
H-727細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293A細胞、U251細胞、PK-13細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
Tb 1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
BT.549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1755細胞、KU19-19細胞、DV90細胞
R-1059-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DanG細胞、C41細胞、RBL-1細胞
NCI H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1092細胞、RERFLCMS細胞、SUIT2細胞
H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-14細胞、QGY7703細胞、NE1-E6E7細胞
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
Rh30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 115細胞、Ramos.G6.C10細胞、JM-Jurkat細胞
OCI/AML-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC-GI-10細胞、253J-Bladder-V細胞、MHCC97-H細胞
SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞
RT4-D6P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jiyoye(P-2003)細胞、IAR 20細胞、QSG-7701細胞
Ha Fe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1008細胞、AN3CA細胞、OVCAR.8細胞
L 363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3B細胞、MDCK.2細胞、LU451細胞
MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞
GalK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, breast cells細胞、HEB細胞、WiDr細胞
HConEpic細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E-6細胞、KP-N-RT細胞、NCIH929細胞
RC-4B/C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-948細胞、BA/F3細胞、SK Mel28細胞
Daoy Cell:人腦髓母細胞瘤細胞系
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
H1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Eca109細胞、HEK-293-FT細胞、EAC細胞
SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞
KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1299細胞、SUP-B15細胞、C6細胞
Capan2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-460細胞、KMB 17細胞、DI TNC1細胞
SGC7901/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC 97-H細胞、SUM190PT細胞、Co-115細胞
LPC-H12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
Hu-P-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV362細胞、697細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細胞
PG-BE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1792細胞、SUPT-1細胞、H510A細胞
NCI-H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細胞、GM03573細胞、LS 1034細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細胞、GM2219C細胞、C-4-I細胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團隊,提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。