"H-EMC-SS Cell:人軟骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹
VERO76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3CA細(xì)胞、SCC090細(xì)胞、CAKI.1細(xì)胞
MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K2細(xì)胞、BT325細(xì)胞、HEK-293A細(xì)胞
H-2029細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-929細(xì)胞、UM-UC3細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞
SNU16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL39細(xì)胞、FL 62891細(xì)胞、RIN14B細(xì)胞
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
H-EMC-SS Cell:人軟骨肉瘤細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無(wú)勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過(guò)夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:4-1:8?jìng)鞔?;每周換液3次。
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
alpha TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO1N1細(xì)胞、MIN-6細(xì)胞、BC-024細(xì)胞
LoVo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 270細(xì)胞、SNU878細(xì)胞、NCI-H1105細(xì)胞
H-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細(xì)胞、SK-N-BE(2C)細(xì)胞、NCI-H187細(xì)胞
IALM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS273細(xì)胞、COS7細(xì)胞、C28/I2細(xì)胞
BBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kupffer細(xì)胞、Y1細(xì)胞、HuCCT-1細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
H-EMC-SS Cell:人軟骨肉瘤細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū)
A-172MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEpiC細(xì)胞、SKG IIIa細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞
H1651細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVSAHO細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞、SkChA1細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
NP69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2023細(xì)胞、LM(TK-)細(xì)胞、NCI-H1573細(xì)胞
HCC0827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-8402細(xì)胞、3 LL細(xì)胞、IBRS-2細(xì)胞
HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞
HEK293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK62a細(xì)胞、Panc 4.03細(xì)胞、L-540細(xì)胞
H-EMC-SS Cell:人軟骨肉瘤細(xì)胞系
NCI-H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Institute for Medical Research-32細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞
HARAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EA. hy 926細(xì)胞、Jurkat FHCRC細(xì)胞、FUOV1細(xì)胞
SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞
LAN-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H82sclc細(xì)胞、207細(xì)胞、CFPAC細(xì)胞
KP-N-YN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細(xì)胞、Bovine ENDometrial cells細(xì)胞、COV504細(xì)胞
U266S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3-E1細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞
NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞
LK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAEC細(xì)胞、COLO 829細(xì)胞、A1847細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLRK 13細(xì)胞、EJ1細(xì)胞、HTR-8/SVneo細(xì)胞
EnCa1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K7M2-WT細(xì)胞、CHL-11細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞
IOSE80UBC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL1細(xì)胞、SW 962細(xì)胞、NCIH2141細(xì)胞
SVHUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2052細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞
HVSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML5細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞、BLO 11細(xì)胞
SK N SH細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC MSB1細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞、H-1341細(xì)胞
C42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LUDLU-1細(xì)胞、1E8-H細(xì)胞、PLA 802細(xì)胞
LC-1Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2172細(xì)胞、Hs 281.T細(xì)胞、Ramos G6.C10細(xì)胞
624-mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]細(xì)胞、aNK細(xì)胞、NUGC-2細(xì)胞
Panc2.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMJ2-C8細(xì)胞、U266BL細(xì)胞、C 6細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
GM04154B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CG-4細(xì)胞、HCV-29細(xì)胞、SNU-354細(xì)胞
Rat 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4IP細(xì)胞、TEV-1細(xì)胞、253J B-V細(xì)胞
H322細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-x63-Ag8 653細(xì)胞、Jiyoye細(xì)胞、293F細(xì)胞
SNU-368細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML12細(xì)胞、MS 751細(xì)胞、5-8F細(xì)胞
AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞
GM05372E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU423細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞、L5178YR細(xì)胞
NCI-UMC-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-115細(xì)胞、H1623細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞
CFPAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH524細(xì)胞、HEL9217細(xì)胞、DMS-153細(xì)胞
RH30SJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:End1/E6E7細(xì)胞、TCC-SUP細(xì)胞、HT22細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH747細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞、NCI747細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
SHP77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-683細(xì)胞、PFSK細(xì)胞、TE-10細(xì)胞
Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞
GP293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU 812細(xì)胞、CL-11細(xì)胞、BMSC/hBMSCs細(xì)胞
Hu-P-T4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV362細(xì)胞、697細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞
COS-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OACP4C細(xì)胞、H-2172細(xì)胞、CL-34細(xì)胞
LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞
P3JHR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMC7細(xì)胞、ECC-10細(xì)胞、JB6Cl30細(xì)胞
NCI-H1993細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK 1細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞、P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞
H-EMC-SS Cell:人軟骨肉瘤細(xì)胞系
H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-4-I細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、T8細(xì)胞
MC3T3-E1 Subclone 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細(xì)胞、H184A1細(xì)胞、CAL 148細(xì)胞
TE354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:S.B.細(xì)胞、HCC44細(xì)胞、RS1細(xì)胞
KPNRTBM1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D clone3細(xì)胞、H 9細(xì)胞、CP-70細(xì)胞
QGY7703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat77細(xì)胞、PK-15細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞
SCL-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM-266-4細(xì)胞、UCLA-SO-M20細(xì)胞、NCI-H647細(xì)胞
HEL-92-1-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-70細(xì)胞、Panc-3_27細(xì)胞、BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞
HEK.EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2196細(xì)胞、WM115F細(xì)胞、NCIH226細(xì)胞
LICR-LON-HN6-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細(xì)胞、VM-CUB-1細(xì)胞、IGR.OV1細(xì)胞
B16-F0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs737T細(xì)胞、AK細(xì)胞、HOEC細(xì)胞
LWnt-3A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細(xì)胞、Epstein-Barr-3細(xì)胞、DMS 114細(xì)胞
NCI-H2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E6-1細(xì)胞、COLO 699細(xì)胞、LLCMK2細(xì)胞
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