"NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
COLO-829細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-10細胞、SW48細胞、CA 46細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
V79-GalK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05372E細胞、NCIH322細胞、NCIH2196細胞
QBC-939細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC13細胞、TSUpr1細胞、P31/Fujioka細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非常考究你的功夫的!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2傳代
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
HCMEC(BL12-H)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR10細胞、NCI-H1404細胞、AMO-1細胞
DR2R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GNM細胞、DLD 1細胞、Panc2_03細胞
WEHI-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BERH-2細胞、PC-12細胞、SKGT4細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
Ramos細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL51細胞、PC-9細胞、C32 mel細胞
細胞生長特性:貼壁生長
NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞!
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
SNK-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Turbot Embryonic Cell line細胞、HepaRG細胞、HL1細胞
MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
CNE1-LUC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE3A細胞、C643細胞、H-889細胞
SY5Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細胞、BHT-101細胞、TE11細胞
H441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL5細胞、H748細胞、MNNG/HOS Clone F-5細胞
SW1088細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細胞、SUDHL-2細胞、SW-1573細胞
IA-LM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-19Lu細胞、H2009細胞、H-220細胞
NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
H-1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
WEHI-164細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC 3細胞、3T3(A31)細胞、PC-3M-1E8細胞
MDA435細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細胞、MFE280細胞、JEG3細胞
U-251MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1116細胞、EC-GI-10細胞、P 3 HR 1細胞
KG-1a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HVSMC細胞、ROS17/28細胞、QG-56細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
rHSC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細胞、Onda 11細胞、Panc327細胞
QGY7701細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U343細胞、CX1細胞、AM細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
TE 671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
hUC-MSC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞
HuT102細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細胞、RPMI-8226細胞、NCl-H157細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
V79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN5細胞、Tissue Culture-1細胞、HPAFII細胞
PASMCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:138MG細胞、P3 88 D1細胞、DLD1細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
SBC-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SACC-LM細胞、Soleus clone 8細胞、253J-Bladder-V細胞
MT-2J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNAS細胞、FUOV1細胞、293/EBNA細胞
Human Corneal Endothelial Cells-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC-7901/DDP細胞、BAEC細胞、UPCI-SCC-154細胞
H-2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS17/28細胞、SKRC20細胞、Epstein-Barr-1細胞
SNU-878細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細胞、OCI-Ly 1細胞、NCI-SNU-878細胞
Tn-5B1-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC-19細胞、MNNG-HOS細胞、HL-60 Clone 15細胞
A-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192A細胞、NPA 87細胞、SN4741細胞
C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細胞、TE13細胞、RPMI-8226細胞
TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞
HNEpC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat-77細胞、M-NFS-60細胞、C4-I細胞
MUTZ3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero-76細胞、HCC202細胞、HUCCT1細胞
RF/6A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-29/CX-1細胞、RGM1細胞、LU65細胞
NK62a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-1063細胞、ZYM-SVEC01細胞、PG-LH7細胞
HCC-1428細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL-CL.2細胞、HFL1細胞、130-T細胞
L5178YR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D10細胞、L M (TK-)細胞、NCIH748細胞
HEK293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343-MG細胞、HIMEC細胞、Murine Carcinoma-38細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細胞、526-mel細胞、SKMEL-2細胞
GC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 4細胞、C57/B6-L細胞、TSCC1細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
HF-91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-7細胞、10T1/2細胞、Ramos-RA1細胞
CHO-K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V 79細胞、MCF 7細胞、NCI-HUT-69細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
Hs294T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPCa-2b細胞、DanG細胞、J-82細胞
HLCL9B10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1599細胞、8402細胞、BSC40細胞
NCIH524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SDBMSC細胞、MDA-415細胞、Kit225細胞
NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
HRA19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞
SW 900細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細胞、H1563細胞、Tb1.Lu細胞
C8166-CD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KRCY細胞、CAL 27細胞、SMMC 7721細胞
CTV-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細胞、T-98G細胞、FLS細胞
BLO 11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞
HCC2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNCL2細胞、MXI細胞、SW1783細胞
MC/9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A7r5細胞、H-1355細胞、CMEC/D3細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
SkMel31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞
BNL.1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細胞、NCI-SNU-C1細胞、3T3-Swiss albino細胞
UM-UC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CF-1 MEF細胞、GL261細胞、ZYM-DIEC02細胞
NTERA-2/D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RM-1細胞、B4G12細胞、TE6細胞
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關(guān)鍵字: NRK-52E Cell:正常大鼠腎細胞系
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