"HTh74 Cell:人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:未分化甲狀腺癌;女性 SN12CPM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細(xì)胞、COLO 320HSR細(xì)胞、Hs-274-T細(xì)胞 Colo699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2330細(xì)胞、H-661細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞 108CC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OAW 42細(xì)胞、BHP10-3細(xì)胞、RT 112細(xì)胞 AA-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細(xì)胞、L 929細(xì)胞、HT-1080細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HTh74 Cell:人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)過程中相關(guān)問題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時,可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動物細(xì)胞離心下來,其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動物細(xì)胞冷凍保存時最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時會放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級和無菌過濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級,必須為Tissue culture grade之DMSO,其本身即為無菌狀況,次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機會。若要過濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(或隔夜)→液氮槽vaporphase長期儲存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20°C不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時,應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 如何進行細(xì)胞復(fù)蘇:1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化;2)從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;3)離心,1000rpm,5min;4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);5)次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)?!緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細(xì)胞以前的培養(yǎng)細(xì)胞都可以用于凍存,但為對數(shù)生長期細(xì)胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液;2)將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作(戴棉手套),以免凍傷;3)凍存和復(fù)蘇用新配制的培養(yǎng)液。細(xì)胞復(fù)蘇的時候,有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后,放在室溫下,經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸,該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎?其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細(xì)節(jié)要注意的?一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口,再稍擰松蓋子,再放37度水浴鍋中搖溶,在將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到裝有37度預(yù)熱過的培養(yǎng)基的試管中,迅速離心,再用培養(yǎng)基洗一遍。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 PC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIMVEC細(xì)胞、BNCL2細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞 RPMI 8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-611-T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞 D-341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞 Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K-1細(xì)胞、Caco-2/BBe 1細(xì)胞、EOMA細(xì)胞 SUM52PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT-20細(xì)胞、451Lu細(xì)胞、JM1細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 HTh74 Cell:人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項:1.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈,消毒半小時以上。2.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈,打開超凈臺風(fēng)機,等待30min以上,以排盡臭氧。3.穿好隔離衣,戴好口罩,帽子。4.風(fēng)淋2分鐘。5.0.1%水泡手,擦干。6.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應(yīng)避免放入過多的物品;使用的吸管,滴管,試管,培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。7.打開各類瓶蓋前先過火,以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰,鑷子使用前應(yīng)經(jīng)火焰燒灼。8.水平式風(fēng)機的超凈臺,應(yīng)使瓶口斜置,應(yīng)盡量避免瓶口敞開直立。9.同一根吸管或滴管不應(yīng)連續(xù)用于幾個不同的細(xì)胞系;吸取培養(yǎng)基的吸管應(yīng)離開培養(yǎng)瓶或試管口0.5cm,避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口;以防止細(xì)胞系的互相混雜污染。10.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體,立即用酒精棉球擦凈。11.操作完畢后恢復(fù)工作臺面。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 U031細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞、CCF-STTG1細(xì)胞 MDA436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMR106細(xì)胞、HCE-T細(xì)胞、Anip 973細(xì)胞 H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞 Tn5B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細(xì)胞、B16/F10細(xì)胞、RCC10RGB細(xì)胞 NCIH2126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05862細(xì)胞、H1954細(xì)胞、HS-766T細(xì)胞 Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞 Sf-21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KAT5細(xì)胞、MiaPaca.2細(xì)胞、PC10細(xì)胞 HTh74 Cell:人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系 CHP-126細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT 3細(xì)胞、CCC-HIE-2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞 COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞 WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞 SK-Col-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1838細(xì)胞、NIE-115細(xì)胞、TYK-nu細(xì)胞 NCIH2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞 RS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 144細(xì)胞、MSTO-211細(xì)胞、Namalwa細(xì)胞 CHOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞、TYKnu細(xì)胞 CPA47細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H10T1/2細(xì)胞、U251-MG細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞 L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞 L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞 MB157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細(xì)胞、18G3.cl 1細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞 ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞 CAL 78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細(xì)胞、U138-MG細(xì)胞、MB49細(xì)胞 TE-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-20細(xì)胞、C33A細(xì)胞、HEC1A細(xì)胞 3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞 CV 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細(xì)胞、BALL-1細(xì)胞、Z310細(xì)胞 MDA.MB.435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-cell with DC Morphology細(xì)胞、PCI-4.2細(xì)胞、Liver-02細(xì)胞 LU65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:130 T細(xì)胞、H2405細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞 RT 112細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細(xì)胞、H-2291細(xì)胞、KYSE0520細(xì)胞 DrG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1373細(xì)胞、OAW42細(xì)胞、JB6 clone 30, subclone 7b細(xì)胞 U-hth74細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEL-526細(xì)胞、HuT-78細(xì)胞、P3HR1細(xì)胞 PCI-4B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM-1細(xì)胞、NUGC4細(xì)胞、HUT125細(xì)胞 HBSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 832(C).T細(xì)胞、SW1222細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞 CAL-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-51細(xì)胞、My-La 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T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞 KYSE70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TF-1細(xì)胞、H-1838細(xì)胞、52PE細(xì)胞 HEK293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細(xì)胞、Hs746T細(xì)胞、U-937細(xì)胞 JVM-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE180細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞、Tca8113細(xì)胞 Hs 604.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2073細(xì)胞、L(TK-)細(xì)胞、U266-B1細(xì)胞 P-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF/CD18細(xì)胞、184A1細(xì)胞、Spodoptera frugiperda clone 9細(xì)胞 CCD 1112SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-432細(xì)胞、OV1-P細(xì)胞、H-1650細(xì)胞 MMAc-Serum Free細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly18細(xì)胞、TE-4細(xì)胞、KTCTL140細(xì)胞 LS-513細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1792細(xì)胞、OCIAML4細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞 3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞 3LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-22細(xì)胞、PA-TU S細(xì)胞、SH-SY5Y Parental細(xì)胞 MC26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-274-T細(xì)胞、TW 01細(xì)胞、HC-11細(xì)胞 HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞 HTh74 Cell:人未分化甲狀腺癌細(xì)胞系 NCIH1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-1細(xì)胞、NCI-H1395細(xì)胞、SW-403細(xì)胞 CHO-Lec1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1963細(xì)胞、H4-II-EC3細(xì)胞、A2780CP細(xì)胞 LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuNS1細(xì)胞、HEEpiC細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞 DMS-114細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB-231細(xì)胞、253J細(xì)胞、293AD細(xì)胞 NT2-D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞、A253細(xì)胞 OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞 RPMI-7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T HEECs細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞、Hs281T細(xì)胞 RCC10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAPC4細(xì)胞、H2108細(xì)胞、P116細(xì)胞 SNK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966SK細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-2085細(xì)胞 HS578細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA-1細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞、MT-3 [Human leukocytes]細(xì)胞 FRTL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-675-T細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞、SO-RB50細(xì)胞 RPMI8402細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33 A細(xì)胞、HSC6細(xì)胞、BCECs細(xì)胞 "
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