"RCC4 Cell:人腎癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：腎透明細胞癌；男性
hCMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACC-83細胞、EBTr細胞、MN9D細胞
OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞
BLO11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H508細胞、H522細胞、C918細胞
UCLA SO M14細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-220細胞、CEF細胞、C2BBe 1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
RCC4 Cell:人腎癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié)：１)一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞１００X，２００X各一張)，排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過８０%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出，留下１０ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)；超過８０%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液、１０００轉(zhuǎn)/分鐘離心２分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制；２)快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？我們采用快遞發(fā)貨，一般外地２--３天，寄細胞前請確認當?shù)販囟?，如果氣溫低于４度的，則采用郵寄凍存細胞；３)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活；４)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
M 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D.cl3細胞、NCIH187細胞、639 V細胞
CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞
HEL-92_1_7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG-IIIa細胞、H4-IIE-C3細胞、NCI H226細胞
DU_145細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ETCC-007細胞、FT-293細胞、RCC 7860細胞
NCI-H889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 88 D1細胞、MCF.10A細胞、BCAP37細胞
細胞生長特性：貼壁
RCC4 Cell:人腎癌細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析：總結(jié)１：復蘇過程沒有問題，是否是從液氮拿出直接放入溫水，還有培養(yǎng)箱，二氧化碳濃度，培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS １５-２０%，看看能否幫助貼壁，當然也需要考慮血清問題，還有確信拿來的細胞沒問題?？偨Y(jié)２：首先應該懷疑凍存，實際上復蘇出問題的可能非常小，因為操作簡單，而且死板。１、你凍存的時候是不是消化的時間過長，這是一般人所注意不到的，即使書上也不講這個問題，太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力，表現(xiàn)為先貼后死，原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序，不可逆轉(zhuǎn)的死亡。２、你的凍存液好不好，是什么，甘油還是DMSO，質(zhì)量非常重要，否則也會死亡。３、你的凍存液的量加的是不是太多，ATCC推薦是不超過７%，大于５%，太多也不好。４、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻，這個有一些影響，但不算太大。５、你的凍存是否按部就班，就是所溫度梯度是不是把握嚴格，很多人容易忘卻這個事情，因為這個東西流程長。６、如果你細胞污染，你是否能很快看到，我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。７、你的細胞在凍存前是否過密。還有，不贊成孵箱污染這個概念的，所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話，這個細菌是源于孵箱的，但這不代表孵箱污染，因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌，問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找，以后就不犯同樣的問題，這個很重要，不能靠猜，否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題，這個見得太多了，別不當會事。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
HPAF-II/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞
KY70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
LC1sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細胞、RPMI-8226S細胞、RenCa細胞
B16-F10-BL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR.4細胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細胞、NP69細胞
HuP-T4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAN-6細胞、OCI/AML-2細胞、EL4細胞
MDA-MB-453細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2444細胞、C57 Mouse Tumor 64細胞、HS-729細胞
KGN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SO-RB50細胞、HS688AT細胞、SKCO1細胞
RCC4 Cell:人腎癌細胞系
LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞
Y-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細胞、Panc4.03細胞、HEC251細胞
H1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品：He-La細胞、Hs-343-T細胞、PT-67細胞
SKNBE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PGBE1細胞、C26細胞、DHL-2細胞
HVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML5細胞、1.1B4細胞、BLO 11細胞
KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞
Hep G2-Luc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-5細胞、A673細胞、Ls-174-T細胞
HT-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞、HcerEpic細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCKII細胞、NCI-HUT-596細胞、SK-ES細胞
NPA 87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-6TG細胞、32Dcl3細胞、Swiss 3T3細胞
BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L363細胞、OVISE細胞、H-358細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
WSU-DLCL-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UWB1.289+BRCA1細胞、MuM-2C細胞、H.Ep.-2細胞
PSN1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVEC4-10細胞、TOV21G細胞、DiFi細胞
MOLM13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞
WM115F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WIL2S細胞、KPL-1細胞、LLC PK1細胞
A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
HCC2218細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 819.T細胞、rHSC-99細胞、HCC-78細胞
GM00215A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOSEpiC細胞、H2122細胞、GM02219D細胞
TOV21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1563細胞、MDA-231細胞、OCI-Ly18細胞
PANC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HIEC-6細胞、HIT T15細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞
SKNBE(2)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：786-0WT細胞、HEL細胞、MDCK-2細胞
NCI-H1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A3細胞、Strain V細胞、B16細胞
UM-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNEC30細胞、B95.8細胞、Hs832T細胞
NPC-TW-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDAMB231細胞、OV433細胞、LWnt3A細胞
WiDr/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WERI-Rb1細胞、MDCK (NBL-2)細胞、Hs-343-T細胞
NFHIOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCM356細胞、NCI-H2029細胞、NCIH1341細胞
H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞
H-II-E-C3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：beta-TC6細胞、MDCK-2細胞、NE1細胞
BCECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC403細胞、MCF-7/ADR-RES細胞、MDA-MB 468細胞
P-3J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
NCI H548細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC 38細胞、MDAMB175VII細胞、AQ-Mel細胞
OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHSY5Y細胞、QBI-293A細胞、NCIH1623細胞
Panc 05.04細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMST6細胞、CMEC/D3細胞、NUGC-4細胞
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
FDCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RT4P細胞、CCRF/CEM細胞、COR-L23細胞
SUM190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLA-801C細胞、MLE 12細胞、NOMO1細胞
HS-445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC.3細胞、HLE-SRA-01/04細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
RCC4 Cell:人腎癌細胞系
Karpas299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DAN-G細胞、PL-11細胞、MDAPCa2b細胞
A-375.S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN-229細胞、H35細胞、HCT 15細胞
NKM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC 10細胞、RD-2細胞、766T細胞
HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞
WM266細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KE-39細胞、NTERA2-cloneD1細胞、293EBNA細胞
AMJ2C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan 2細胞、BE2C細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞
UCLA SO M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MAVER-1細胞、Mono Mac 6細胞、SF-295細胞
MZCRC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PNT-1A細胞、YD15細胞、HLF-a細胞
HSC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc3_27細胞、NCI-H498細胞、HuTu-80細胞
SW-900細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HD11細胞、Hs68細胞、AMO1細胞
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 294T細胞、MDA-MB453細胞、UM-UC-14細胞
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