"KMBC Cell:人膽管癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：膽管癌；男性
RCM1細胞系相關產(chǎn)品：J-82細胞、RMS 1598細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞
SUPT-1細胞系相關產(chǎn)品：RIN14B細胞、Hs852T細胞、Cates 1B細胞
NALM-6細胞系相關產(chǎn)品：RCCJF細胞、NIH:OVCAR3細胞、MCF.7細胞
Hs870T細胞系相關產(chǎn)品：JG細胞、NCI-H748細胞、SK-MEL-1細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
KMBC Cell:人膽管癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉(zhuǎn)到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
HCC1599細胞系相關產(chǎn)品：ARO 81-1細胞、ChaGo-K-1細胞、HCC95細胞
Panc_05_04細胞系相關產(chǎn)品：JIMT1細胞、H2172細胞、McARH7777細胞
Human Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
L-132細胞系相關產(chǎn)品：CAL851細胞、EVSA/T細胞、OCI/AML5細胞
LTEP-a2細胞系相關產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
細胞生長特性：貼壁
KMBC Cell:人膽管癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經(jīng)過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內(nèi)形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
NCI-H446細胞系相關產(chǎn)品：WM 451-Lu細胞、TALL1細胞、H-226細胞
RN細胞系相關產(chǎn)品：SCC-4細胞、4T1細胞、NCI-H1963細胞
16HBE140細胞系相關產(chǎn)品：NCI-SNU-475細胞、LCLC-103H細胞、BTI-TN5B1-4細胞
Calu3細胞系相關產(chǎn)品：PY8119細胞、CV1細胞、TM3細胞
KP-N-RT-BM細胞系相關產(chǎn)品：HCT-116細胞、190PT細胞、VERO C 1008細胞
Human Kidney-2細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1975細胞、B16-F10細胞、H-1876細胞
MOLM-16細胞系相關產(chǎn)品：McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞
KMBC Cell:人膽管癌細胞系
CEM/C1細胞系相關產(chǎn)品：H-2106細胞、DH-82細胞、NK-92.05細胞
NIHOVCAR3細胞系相關產(chǎn)品：FL62891細胞、H2052細胞、MC-116細胞
LPC-H12細胞系相關產(chǎn)品：SK-RC 42細胞、MCF7/WT細胞、Kuramochi細胞
L(TK-)細胞系相關產(chǎn)品：MC57G細胞、SUNE-1細胞、RKO-AS-45-1細胞
TGW細胞系相關產(chǎn)品：Clone Y-1細胞、ARO細胞、RCC-JF細胞
C3H/10T1/2 clone 8細胞系相關產(chǎn)品：TE 32細胞、PIG1細胞、RPMI-8402細胞
OLN-93細胞系相關產(chǎn)品：SRA 01/04細胞、C3H/10T1/2細胞、NS1/1-Ag4.1細胞
Panc 03.27細胞系相關產(chǎn)品：Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞
C4-I細胞系相關產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
C4-I細胞系相關產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
NMCG1細胞系相關產(chǎn)品：HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞
SK-ES1細胞系相關產(chǎn)品：HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞
SW1463細胞系相關產(chǎn)品：H69細胞、SF539細胞、TE1細胞
Caco2-BBE細胞系相關產(chǎn)品：Hs729細胞、OCI-AML5細胞、Embryonic Bovine Tracheal cells細胞
P-3J細胞系相關產(chǎn)品：TE14細胞、NCI-H1944細胞、VMCUB-1細胞
NCTC-3960細胞系相關產(chǎn)品：JVM-2細胞、HuT102細胞、TPC-1細胞
F9細胞系相關產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
SW 1783細胞系相關產(chǎn)品：BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞
SUM159PT細胞系相關產(chǎn)品：DMS153細胞、KMH2細胞、BJA-B-1細胞
PANC-28細胞系相關產(chǎn)品：CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞
SUD4細胞系相關產(chǎn)品：HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞
MDCC MSB1細胞系相關產(chǎn)品：MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞
PA I細胞系相關產(chǎn)品：GM00637H細胞、P3J.HR1K細胞、EU-2細胞
HSAS3細胞系相關產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
Hs611T細胞系相關產(chǎn)品：B16-F0細胞、MFD-1細胞、NCIH1385細胞
DSL-6A/C1細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR-420細胞、MDA175細胞、A427細胞
H-1693細胞系相關產(chǎn)品：3 LL細胞、Hs 274細胞、IHH4細胞
P3.653細胞系相關產(chǎn)品：Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞
Jurkat細胞系相關產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
8402細胞系相關產(chǎn)品：VMCUB1細胞、BMDC細胞、WM 2664細胞
SK-MEL-2-LUC細胞系相關產(chǎn)品：VE細胞、CORL105細胞、B16-F10細胞
HSC-1細胞系相關產(chǎn)品：293 H細胞、HOP 62細胞、WI-38細胞
P30/Ohkubo細胞系相關產(chǎn)品：OVCAR 433細胞、SUM 149細胞、CEM T4細胞
CNLMG-B5537SKIN細胞系相關產(chǎn)品：UPCI:SCC90細胞、L 540細胞、SK-N-BE2細胞
U-266細胞系相關產(chǎn)品：EA.hy 926細胞、NCI H508細胞、HCC-1500細胞
FBHE細胞系相關產(chǎn)品：NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
RBMVEC細胞系相關產(chǎn)品：DoTc2 4510細胞、G401細胞、IPLB-SF-21-AE細胞
OCI-Ly7細胞系相關產(chǎn)品：NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
L cells細胞系相關產(chǎn)品：HMC3細胞、M619細胞、MKN 28細胞
MC3T3-L1細胞系相關產(chǎn)品：C-Li-7細胞、BV2細胞、MES-SA-Dx5細胞
NCI-H1876細胞系相關產(chǎn)品：H-647細胞、RBL細胞、RKO細胞
KMBC Cell:人膽管癌細胞系
Raji細胞系相關產(chǎn)品：VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞
Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關產(chǎn)品：CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞
C3H10T1/2細胞系相關產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
746T細胞系相關產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
JVM-3細胞系相關產(chǎn)品：KYSE180細胞、HEL92.1.7細胞、Tca8113細胞
DH82細胞系相關產(chǎn)品：IM-95細胞、J774 A1細胞、NCIH1793細胞
SNU-C2A細胞系相關產(chǎn)品：AAV293細胞、SNU-354細胞、SNU-5細胞
NCTC clone 1469細胞系相關產(chǎn)品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
AML-2細胞系相關產(chǎn)品：OCI-Ly7細胞、NCI-H1755細胞、C-28I2細胞
TE354.T細胞系相關產(chǎn)品：S.B.細胞、HCC44細胞、RS1細胞
MRC9細胞系相關產(chǎn)品：HLEB-3細胞、NCI-H226細胞、NCIH510細胞
GM01232E細胞系相關產(chǎn)品：P3.times.63 Ag8.653細胞、FL-83B細胞、NCTC-929細胞
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