"HCA7 Cell:人結腸腺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：結腸腺癌；女性
RCC23細胞系相關產品：L 929細胞、BHK-21細胞、HCC-1438細胞
IALM細胞系相關產品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
T-84細胞系相關產品：SK-RC 39細胞、HCC1500細胞、BHP10-3細胞
H676B細胞系相關產品：CEM T4細胞、AN3細胞、ROS1728細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HCA7 Cell:人結腸腺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞凍存的步驟：１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)；２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為５×１０６～１×１０７/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇；３)將分裝上述細胞懸液于２ml凍存管中，每管０.２５ml。凍存管要將蓋子蓋緊，并標記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))；４)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中，-８０℃冰箱過夜。；如果有程序降溫器(放在-８０℃冰箱過夜，放入液氮罐);或者可以在４℃，２h;然后轉到-２０℃，２h;-８０℃，２h;放入液氮罐；５)細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH1781細胞系相關產品：Jijoye細胞、NRK52E細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞
NS-I/1細胞系相關產品：3T3J2細胞、WRL-68細胞、SNUC2B細胞
16-HBE細胞系相關產品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
Kato-III細胞系相關產品：Ramos 1細胞、Mel-RM細胞、ME180細胞
Swiss 3T3細胞系相關產品：JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
細胞生長特性：貼壁
HCA7 Cell:人結腸腺癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗：體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代，以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭，將培養(yǎng)的細胞分散，從容器中取出，以１:２或１:３以上的比率轉移到另外的容器中進行培養(yǎng)，即為傳代培養(yǎng)；細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增３～６次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數(shù)/１００個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于０.２％～０.５％，腫瘤細胞可達３～５％；細胞接種２～３天分裂增殖旺盛，是活力時期，稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期)，適宜進行各種試驗。實驗步驟：１.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養(yǎng)液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置５～１０分鐘。２.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變圓，相互之間不再連接成片，這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉，加入３～５ml新鮮培養(yǎng)液，吹打，制成細胞懸液。３.將細胞懸液吸出２ml左右，加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加３ml左右培養(yǎng)液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養(yǎng)箱中，繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況，傳代后的細胞在２小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上，２～４天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
BAEC細胞系相關產品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
NCIH1755細胞系相關產品：FET細胞、RGM-1細胞、MILE SVEN1細胞
MDA PCa 2b細胞系相關產品：COLO357細胞、NCI-H78細胞、HCT/FU細胞
MFM-223細胞系相關產品：SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞
KM-H2細胞系相關產品：HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞
ATDC5細胞系相關產品：L23/P細胞、RGC-6細胞、Calf Pulmonary Artery 47細胞
HBE細胞系相關產品：NCI-446細胞、RL細胞、mIMCD3細胞
HCA7 Cell:人結腸腺癌細胞系
KLN-205細胞系相關產品：RCS細胞、H1437細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞
TALL-104細胞系相關產品：Mino細胞、LTEP-sm 1細胞、HEK-293-EBNA細胞
PK (15)細胞系相關產品：GM07404D細胞、Hs-578T細胞、NCIH2286細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關產品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
NCI-H2227細胞系相關產品：H-2286細胞、HC11細胞、FAT細胞
HS0578T細胞系相關產品：L cells (TK-)細胞、TK 10細胞、MGc80-3細胞
MKN-7細胞系相關產品：KM12 SM細胞、108CC15細胞、NR-8383細胞
ROS1728細胞系相關產品：T_T_細胞、SW962細胞、SW 954細胞
Rat 2細胞系相關產品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
Rat 2細胞系相關產品：AR4IP細胞、TEV-1細胞、253J B-V細胞
YH細胞系相關產品：NL-20細胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D細胞、NCIH596細胞
NCTC clone 1469細胞系相關產品：Hs 729T細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM 239細胞
NCI-H1688細胞系相關產品：MOLT3細胞、P 3 HR 1細胞、CCD 1112SK細胞
IALM細胞系相關產品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
Madison細胞系相關產品：RF/6A細胞、SF 126細胞、CBRH7919細胞
OCI-AML5細胞系相關產品：JURKAT E-6.1細胞、HCe-8693細胞、GM07404A細胞
OV3121細胞系相關產品：BCP-1細胞、NCI-BL1339細胞、Hs294細胞
RKO-AS45-1細胞系相關產品：HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
MRMT-1細胞系相關產品：HOEC細胞、SNU-638細胞、CORL88細胞
UACC 893細胞系相關產品：M2-10B4細胞、RT-BM-1細胞、293S細胞
AA-Mel細胞系相關產品：SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
SK-GT-4細胞系相關產品：6-10B細胞、H1963細胞、M2-10B4細胞
SK-N-BE2C細胞系相關產品：MDA-MB468細胞、TE 32.T細胞、OVCAR-432細胞
OCILY-10細胞系相關產品：P3-X63-Ag8-653細胞、WM 239A細胞、Cor L51細胞
A-2780細胞系相關產品：H9c2細胞、SCL-2細胞、BALL1細胞
BE(2)M17細胞系相關產品：Mhh-Call 2細胞、MPP-89細胞、Normal Rat, August 3, 1983細胞
Hce8693細胞系相關產品：UPCI-SCC-154細胞、ME-1 [Human leukemia]細胞、CMT-167細胞
NCI-H2171細胞系相關產品：AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
T47D細胞系相關產品：AR-42J細胞、Hs895T細胞、Hs888T細胞
HC11 Mammary Epithelium細胞系相關產品：F98細胞、H-1734細胞、4T1.2細胞
RK13細胞系相關產品：CCLP1細胞、AMJ2C8細胞、H-2444細胞
McA-RH 7777細胞系相關產品：H157細胞、Gerner 7666細胞、COR-L279細胞
Saos2細胞系相關產品：BHK21細胞、CL MC/9細胞、RH-30細胞
PANC0203細胞系相關產品：SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞
CCD-841CoTr細胞系相關產品：Fao細胞、NuTu 19細胞、UPCI-SCC-090細胞
DoHH2細胞系相關產品：VMRCRCZ細胞、KYSE 180細胞、H-2291細胞
Sf-21細胞系相關產品：KAT5細胞、MiaPaca.2細胞、PC10細胞
KY70細胞系相關產品：MC3T3-E1 Subclone 4細胞、SNU398細胞、Malme-3M細胞
PTK 2細胞系相關產品：COLO 699細胞、NS1-Ag4/1細胞、hCMEC/D3細胞
HEI-193細胞系相關產品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
AU 565細胞系相關產品：Det 562細胞、OCM1細胞、WC00097細胞
Tn-5細胞系相關產品：MHCC97H細胞、AG06814-M細胞、16-HBE細胞
P388細胞系相關產品：KG1細胞、H-378細胞、NH-6細胞
HCA7 Cell:人結腸腺癌細胞系
THLE-2細胞系相關產品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
IAR20細胞系相關產品：SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
H747細胞系相關產品：SUD-4細胞、MDA MB 231細胞、SUM-52PE細胞
GB-1細胞系相關產品：DLD-1細胞、RPVSMC細胞、MOLT3細胞
NS-1-Ag4-1細胞系相關產品：H661細胞、Tb1Lu細胞、OUMS27細胞
H-524細胞系相關產品：SRA01/04細胞、FC33細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞
16-HBE細胞系相關產品：MN60細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞、IPLB-Sf21-AE細胞
LAPC-4細胞系相關產品：MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞
C 6細胞系相關產品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
UM-UC-3細胞系相關產品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
NCI-HUT-69細胞系相關產品：SKUT1細胞、Karpas 299細胞、H596細胞
Ramos細胞系相關產品：CAL51細胞、LLC PK1細胞、NCI-SNU-182細胞
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