"Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:黑色素瘤;雄性;DBA CEMO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1395細(xì)胞、MADB 106細(xì)胞、NUGC-3細(xì)胞 KU-812細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC14細(xì)胞、2008細(xì)胞、NKT細(xì)胞 Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞 NEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U14細(xì)胞、H1355細(xì)胞、Clone M-3細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)問題總結(jié):冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37°C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預(yù)防冷凍管之爆裂;細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時,是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活;培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5%或10%CO2?或根本沒有影響?一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作為pH的緩沖系統(tǒng),而培養(yǎng)基中NaHCO3的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3含量為每公升3.7g時,細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10%CO2;當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3為每公升1.5g時,則應(yīng)使用5%CO2培養(yǎng)細(xì)胞。何時須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。培養(yǎng)基中是否須添加抗生素?除于特殊篩選系統(tǒng)中外,一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下,培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺做實(shí)驗(yàn)時,喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 T98G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4:11細(xì)胞、130T細(xì)胞、NSI/1-Ag4-1細(xì)胞 RAMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H920細(xì)胞、DHL-6細(xì)胞、A3細(xì)胞 OVCAR8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC4細(xì)胞、SKRC-39細(xì)胞、Panc4.03細(xì)胞 HCC94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-2218細(xì)胞、AN-3細(xì)胞、H2227細(xì)胞 HEI193細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD1細(xì)胞、138MG細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對細(xì)胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞 CCD 841 CoTr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細(xì)胞、CHP212細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞 AR4-2J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epithelioma Papulosum Cyprini細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞 MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞 SY5Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DBTRG-05MG細(xì)胞、BHT-101細(xì)胞、TE11細(xì)胞 SEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a2細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞、WM115細(xì)胞 H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞 Clone M-3 Cell:小鼠黑色素瘤細(xì)胞系 B5537SKIN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細(xì)胞、HT 29細(xì)胞、OVCAR-3細(xì)胞 AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞 SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞 MDA-MB-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H28細(xì)胞、3T3 L1細(xì)胞、HEK 293FT細(xì)胞 IBMF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細(xì)胞、SW954細(xì)胞、L5178-R細(xì)胞 Kuramochi細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-4細(xì)胞、OP9細(xì)胞、SNU-C1細(xì)胞 OVCAR-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE細(xì)胞、SKMEL24細(xì)胞、Human Embryonic Kidney 293細(xì)胞 TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞 MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞 MCF.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNEP1細(xì)胞、HCEC細(xì)胞、AGS細(xì)胞 Walker256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1993細(xì)胞、kms 11細(xì)胞、624mel細(xì)胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞 Factor Dependent Continuous-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan-1細(xì)胞、HIT.T15細(xì)胞、MB 157細(xì)胞 MKN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK2細(xì)胞、KLN-205細(xì)胞、Ly3細(xì)胞 SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞 GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞 V79-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM96L細(xì)胞、Capan1細(xì)胞、HEY-A8細(xì)胞 KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 BpRc1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME1細(xì)胞、H1048細(xì)胞、IM-9細(xì)胞 22Rv-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細(xì)胞、HCC-70細(xì)胞、Monomac-1細(xì)胞 CCD-841-CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DOK細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞、LK 2細(xì)胞 McA-RH 7777細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H157細(xì)胞、Gerner 7666細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞 MDAMB435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH647細(xì)胞、PTK1細(xì)胞、UACC 812細(xì)胞 Tb 1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF.10A細(xì)胞、BEL 7402細(xì)胞、NHRF細(xì)胞 SK 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細(xì)胞、SW 756細(xì)胞、Hep 3B2細(xì)胞 ECC-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10細(xì)胞、SCL1細(xì)胞、Lec1細(xì)胞 GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞 NCI-H78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK LU 1細(xì)胞、PK-136細(xì)胞、HEL-1細(xì)胞 NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞 UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞 SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞 NPC-TW01細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pfeiffer細(xì)胞、H1770細(xì)胞、C57/B6-L細(xì)胞 NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞 HANK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細(xì)胞、HCT/FU細(xì)胞、SUP-B1細(xì)胞 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