"ECC-1 Cell:人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:內(nèi)膜腺癌;女性 Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞 Hs 766T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞 OVCAR10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 937細胞、LS-180細胞、SAOS 2細胞 SK-BR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS11細胞、CAMA-1細胞、OVCAR 432細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 ECC-1 Cell:人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應(yīng)該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應(yīng)該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通常控制在1-2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NB19-RIKEN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MODE-K細胞、NCI-H2342細胞、IPEC-J2細胞 HCC-2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryonic Skin細胞、N-9細胞、KYSE-520細胞 MGH-U1 (EJ)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis lung carcinoma line 1細胞、HBL-100細胞、H1436細胞 CAL 39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1S細胞、NCI-H1522細胞、MMAc.SF細胞 CCC-HSF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McArdle RH-7777細胞、UMNSAH-DF-1細胞、2780細胞 細胞生長特性:貼壁 ECC-1 Cell:人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應(yīng)該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 CHP126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HC-11細胞、HCC2935細胞、LS174細胞 Hu-P-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM1細胞、NCI-H28細胞、526mel細胞 GM04154細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-1細胞、PC9細胞、CEL細胞 Hs-852-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343MG細胞、H-295R細胞、ACC2細胞 MLTC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV3細胞、HemECs細胞、SK N SH細胞 HS 1.Tes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCFs細胞、NCI-747細胞、NCI-H-69細胞 L Wnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK1細胞、FRO細胞、Ball 1細胞 ECC-1 Cell:人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 HCC-1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBMEC細胞、OE21細胞、MDAMB330細胞 M20 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115細胞、MeT5A細胞、SUM 159細胞 OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞 3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 361細胞、Panc 05.04細胞、PC-3M-2B4細胞 ReNcell CX細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HM06.A1細胞、U251MG細胞、P3-x63-Ag8 653細胞 LWnt-3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549 ATCC細胞、Epstein-Barr-3細胞、DMS 114細胞 KYSE 450細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞 SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞 SKNEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-LH7細胞、BV173細胞、HT3細胞 Granta-519細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMS13細胞、RPMI 8226/S細胞、SUM 102PT細胞 NCI-H345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOVAS-1細胞、MAC1細胞、K-1735細胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞 T47-D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 1210細胞、EFM-19細胞、CAL 33細胞 PIGI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL 16細胞、HS-683細胞、Y3細胞 KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 Sup T-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2 cl.D1細胞、MC116細胞、SK-MEL-MeWo細胞 SNU-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU01細胞、HCT_116細胞、KYSE-50細胞 B16F10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFPAC細胞、SupB15WT細胞、NB1RGB細胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞 MFM-223細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLU-1細胞、KM12-SM細胞、P3X63Ag8-6-5-3細胞 RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞 MC/CAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-2058細胞、A 72細胞、WEHI 3B細胞 OVCAR.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-446細胞、HCM細胞、IPLB-Sf21AE細胞 C8161細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細胞、H196細胞、FO [Mouse myeloma]細胞 CCD 841 CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-320HSR細胞、CHP212細胞、C3H-10T1/2細胞 NCIH1666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK (NBL-2)細胞、SUDHL10細胞、Murine Lung Epithelial-12細胞 MOLM-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McA-RH8994細胞、Hs 766T細胞、L-428細胞 OSRC2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GL261細胞、Hep 3B2.1-7細胞、CA-OV-3細胞 H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞 NCIH2110細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1.0細胞、SK-N-BE(1)細胞、LA 4細胞 ROS17/28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細胞、MC57G細胞、IGROV-1細胞 Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 Sp 2/0-Ag 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP77細胞、MC3T3E1細胞、MX1細胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞 Panc4.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG-1細胞、EB2細胞、Melanoma 14細胞 TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞 AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞 OCM-1A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A.704細胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細胞、OCILY3細胞 B-95-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-cell細胞、CAMA細胞、KTC-1細胞 H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-676細胞、L cells細胞、EL 4細胞 CMT-167細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC21H細胞、Hs-578-T細胞、SU8686細胞 ECC-1 Cell:人子宮內(nèi)膜腺癌細胞系 JTC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H460細胞、OS-RC-2細胞、MOLT-4細胞 RT112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS4;11細胞、P 815細胞、HaCaT細胞 WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞 SU-DHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細胞、Rat-2細胞、NCIH2170細胞 C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞 CAL12T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L6細胞、SEG1細胞、NCI H747細胞 CCC-ESF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1781細胞、Namalwa細胞、MB231細胞 EAhy926細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs.27細胞、C-33 A細胞、NCI-322細胞 HSC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 900細胞、AR42J細胞、H-510A細胞 WIL2-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 824細胞、TH1細胞、HRPEpiC細胞 C2BBe 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細胞、Hepa-RG細胞、130T細胞 SK HEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK-293-H細胞、Hi-five細胞、SNU638細胞 "
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