"C22 (Clara) Cell:大鼠肺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:肺;上皮細(xì)胞 TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞 C8161細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1238細(xì)胞、H196細(xì)胞、FO [Mouse myeloma]細(xì)胞 KRC-Y細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Foreskin Fibroblast細(xì)胞、EAC細(xì)胞、Y3M細(xì)胞 HCC9724細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU87細(xì)胞、MRAEC細(xì)胞、T-47D細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 C22 (Clara) Cell:大鼠肺上皮細(xì)胞系 細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無(wú)菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見(jiàn),把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒(méi)有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過(guò)20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 C8D1A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1930細(xì)胞、HELA-GFP細(xì)胞、Dunn LM8細(xì)胞 NCI-SNU-182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIC細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞、PNT1/A細(xì)胞 Ramos-2G6-4C10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT 549細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞、COS7細(xì)胞 HeLa/DDP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320細(xì)胞、KATO 3細(xì)胞、L-6 myoblast細(xì)胞 CCD966SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-150細(xì)胞、Hs821T細(xì)胞、YD38細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 C22 (Clara) Cell:大鼠肺上皮細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒(méi)有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過(guò)度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過(guò)程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書 alphaTC1 Clone 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF.CEM細(xì)胞、HBE135-E6E7細(xì)胞、ZR-75-1細(xì)胞 HPF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4-L細(xì)胞、SVHUC細(xì)胞、Hepatoma-22細(xì)胞 HTR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細(xì)胞、MDA-157細(xì)胞、V 79細(xì)胞 Hs 611.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細(xì)胞、P3/X63-Ag8細(xì)胞、HPAF/CD18細(xì)胞 NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞 R 1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細(xì)胞、PA1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞 TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞 C22 (Clara) Cell:大鼠肺上皮細(xì)胞系 COLO320HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2110細(xì)胞、SuDHL 4細(xì)胞、H2073細(xì)胞 HEK-293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos 2G6.4C10細(xì)胞、OCI-Ly19細(xì)胞、NPA'87細(xì)胞 MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞 MPP 89細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY180細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞、INS1細(xì)胞 PC12(高分化)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Oregon J-111細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞、PC3細(xì)胞 H-1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2 Secreting細(xì)胞、H125細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞 TE-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Wien-133細(xì)胞、Daudi細(xì)胞、Wien 133細(xì)胞 HIEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 600.T細(xì)胞、DoHH-2細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞 Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞 Normal Rat Kidney-52E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138-MG細(xì)胞、MDA-MB157細(xì)胞、Wayne State University-Head and Neck 13細(xì)胞 SN12-PM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc08.13細(xì)胞、CNE-1細(xì)胞、108CC15細(xì)胞 NRK49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN4741細(xì)胞、GM04678細(xì)胞、3T3-L1 ad細(xì)胞 UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞 HT 1197細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL 6細(xì)胞、HEK293-FT細(xì)胞、IALM細(xì)胞 Farage OL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞 CWR22R-V1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細(xì)胞、NG-108-15細(xì)胞、CAL12T細(xì)胞 ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞 H1436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 2細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞、D6P2T細(xì)胞 THLE-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human podocyte細(xì)胞、SKMES細(xì)胞、95D細(xì)胞 Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細(xì)胞、hEM15A細(xì)胞、Ca 9-22細(xì)胞 RPE1-hTERT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1993細(xì)胞、FRTL 5細(xì)胞、A2780S細(xì)胞 ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞 GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞 Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞 RKO-E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RetroPack PT67細(xì)胞、HMEL細(xì)胞、SF126細(xì)胞 IMCD-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2009細(xì)胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-2細(xì)胞、LIM 1215細(xì)胞 MKN-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHSY-5Y細(xì)胞、HPB/ALL細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞 Pro-5WgaRI3C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細(xì)胞、NCIH69細(xì)胞、Hs 934.T細(xì)胞 RCC10 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細(xì)胞、HEC-1B細(xì)胞、Rat Skin 1細(xì)胞 RPMI no 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細(xì)胞、KYSE-450細(xì)胞、ARH77細(xì)胞 BeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-5細(xì)胞、TE-3A細(xì)胞、UM-UC-3細(xì)胞 RASMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-Ly8細(xì)胞、TPC-1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞 IFRS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-423細(xì)胞、GM06141細(xì)胞、TE13細(xì)胞 OCI-LY-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC-251細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞、Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15細(xì)胞 MHCC97L細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細(xì)胞、COLO 741細(xì)胞、CEM-C7細(xì)胞 ZR75-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSB-1細(xì)胞、SF126細(xì)胞、Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞 ANA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBE4細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞、NCI-460細(xì)胞 HCC2157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMR-32細(xì)胞、Panc10.05細(xì)胞、OV433細(xì)胞 SW1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63NS1細(xì)胞、SUDHL-2細(xì)胞、SW-1573細(xì)胞 HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞 Calu6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細(xì)胞、RPMI8402細(xì)胞、HEK-A細(xì)胞 HCC-94細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE D407細(xì)胞、8226/S細(xì)胞、H2081細(xì)胞 L5178Y-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD3細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞、HK2細(xì)胞 C22 (Clara) Cell:大鼠肺上皮細(xì)胞系 Normal fibroblast-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:58F細(xì)胞、PNT1A細(xì)胞、JVM-2細(xì)胞 OCI-Ly8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL5細(xì)胞、LCMS細(xì)胞、NCI-H69細(xì)胞 H1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Opossum Kidney細(xì)胞、SUP-T1細(xì)胞、JEKO細(xì)胞 3T3-Swiss albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT1細(xì)胞、SVG(P12)細(xì)胞、ANA-1細(xì)胞 BrCL15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep II細(xì)胞、Cates 1B細(xì)胞、P388-D1細(xì)胞 SUDHL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LP-1細(xì)胞、SK-N-BE-2細(xì)胞、8226細(xì)胞 MES 13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA38細(xì)胞、HLEB-3細(xì)胞、SUM 149PT細(xì)胞 H69C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H522細(xì)胞、MEF (CF-1)細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞 MALME 3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A204細(xì)胞、HaCaT細(xì)胞、MDCK II細(xì)胞 HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞 Duke University 145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M619細(xì)胞、D-283 Med細(xì)胞、Japanese Tissue Culture-39細(xì)胞 Co 205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs1.Tes細(xì)胞、MOLM-16細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞 "
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